植物油脂在生活中具有重要的作用,提高油料作物油脂含量是育種工作者改良作物品質(zhì)性狀的主要目標之一。隨著分子生物學的發(fā)展,應用基因工程的方法挖掘和克隆與作物角果和種子發(fā)育的相關(guān)基因是改良作物遺傳性狀常用的研究方法和技術(shù)。擬南芥（Arabidopsis thaliana L.）SPATULA（AtSPT）基因是植株生長發(fā)育過程中一個重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,是一個多功能基因,主要調(diào)節(jié)擬南芥花的形態(tài)建成和角果發(fā)育等多種發(fā)育過程。擬南芥功能缺失突變體spt2和spt12,角果發(fā)育受阻,且多數(shù)不育。我們研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)這個基因突變體種子含油量和脂肪酸組分也發(fā)生改變。在本文的研究中,我們從甘藍型油菜（Brassica napusL.）品種ZS72中克隆到兩個BnSPTs基因,即BnaA01g0073D（BnSPT1）和BnaC03g61610D（BnSPT4）,同時對它們進行了初步的功能驗證分析。這些研究結(jié)果對于提高油料作物產(chǎn)量和產(chǎn)油量具有潛在理論和應用價值。本研究所取得的主要結(jié)果如下:克隆油菜SPT同源基因BnSPT1和BnSPT4,利用qRT-PCR研究了BnSPT1和BnSPT4在油菜不同組織和角果發(fā)育... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

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圖１．１種子不同發(fā)育階段及特征

??圖１．１種子不同發(fā)育階段及特征。Ａ，種子內(nèi)胚胎發(fā)育的典型模式；Ｂ，種子發(fā)育??階段和儲藏物積累（Ｖｉｃｅｎｔｅ－Ｃａｒｂａｊｏｓａ?ｅｔ?ａｌ．，２００５）。??Ｆｉｇ．?１．１?Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ?ｗｉｔｈｉｎ?ｔｈｅ?ｓｅｅｄ．?Ｐｈａｓｅｓ?ａｎｄ?Ｆｅａｔｕｒｅｓ．?（Ａ）?Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ?ｏｆ??ｅｍｂｒｙｏ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ?ｕｎｄｅｒ?ａ?ｖｉｖｉｐａｒｏｕｓ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｒ?ｗｉｔｈｉｎ?ｔｈｅ?ｓｅｅｄ．?（Ｂ）?Ｔｉｍｅ?ｃｏｕｒｓｅ??ｏｆ?Ａｒａｂｉｄｏｓｉｓ?ｓｅｅｄ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ?（ａｄａｐｔｅｄ?ｆｒｏｍ?Ｂａｕｄ?ｅｔ?ａｌ．．?２００２）?（Ｖｉｃｅｎｔｅ－Ｃａｒｂａｊｏｓａ??ｅｔ?ａｌ．，?２００５）．??１．１．２成熟干種子中主要貯藏物質(zhì)??在干種子的胚和胚乳中，儲藏蛋白液泡（ＰＳＶｓ：?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｓｔｏｒａｇｅ?ｖａｃｕｏｌｅｓ）和油??滴占據(jù)絕大部分空間，種子儲藏蛋白和三酰甘油占據(jù)種子干重（ＤＷ：?ｄｒｙ?ｗｅｉｇｈｔ）??的３０－４０％，ＰＳＶｓ通常位于胚細胞的中央，靠近細胞核（Ｍａｎｓｆｉｅｌｄ?ｅｔａｌ．．?１９９２；?Ｃｏｈｅｎ??３??

喧要求進行管理。??２．１．２載體??本研究所用克隆載體為ｐＥＮＴＲｌＡ入門載體（圖譜見圖２．１）。??ｒｍＢ?Ｔ１?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ??／??ｐＵＣ?ｏｒｉｇｉｎ?ｒｍＢ?Ｔ２?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ??／?Ｖ??｜??匕?ｐＥＮＴＲｌＡ??２７１７?ｂｐ??ｙ?Ｌ＿ｃｃｄＢ??＼??．＇?一?ａｔｔＬ２??Ｋａｎ（Ｒ）??圖２．１?ｐＥＮＴＲｌＡ載體圖譜??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｍａｐ?ｏｆ?ｐＥＮＴＲ?１Ａ?ｖｅｃｔｏｒ??２．２實驗方法??２．２．１植物總ＲＮＡ提取??在提取植物總ＲＮＡ實驗中所闬的ＲＮａｓｅ－ｆｒｅｅ的槍頭、１．５ｍｌ離心管等均購??自Ａｘｙｇｅｎ幺司，７５°／。乙醇用ＤＥＰＣｈｂＯ配置。本實驗采用Ｔｒｉｚｏｌ法提取提取楦??物總?ＲＮＡ，所用試劑為?Ｔａｋａｒａ?公司的?ＲＮＡｉｓｏ?Ｐｌｕｓ?試劑（Ｔａｋａｒａ?ｃｏｄｅ：?Ｄ９１０８Ａ），??具體操作步驟是按照說明書進行。方法如下：??１?４??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3249176