玉米（Zea mays L.）是全球主要的糧食、飼料和經(jīng)濟(jì)作物,而玉米中磷的吸收利用效率與產(chǎn)量密切相關(guān)。生長素應(yīng)答因子（Auxin response factor,ARF）,是一類受生長素調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子,在生長素信號(hào)傳導(dǎo)途徑中起著重要的作用,影響植物生長的多個(gè)過程,包括細(xì)胞伸長、頂端優(yōu)勢、衰老以及調(diào)控植物根系生長發(fā)育等。為了解玉米生長素應(yīng)答因子ZmARF家族基因在低磷脅迫條件下的時(shí)空表達(dá)模式,本研究以玉米耐低磷自交系178和低磷敏感自交系9782為材料,分析在低磷脅迫0h、12 h、24 h、48h、72h條件下,ZmARF家族基因在178、9782苗期根系和葉片中的表達(dá)模式。為進(jìn)一步分析ZmARF家族基因成員ZmARF23與耐低磷性狀顯著關(guān)聯(lián)的變異位點(diǎn),本研究在108份來自熱帶、業(yè)熱帶、溫帶的玉米自交系中擴(kuò)增基因ZmARF23,對其進(jìn)行序列多態(tài)性分析。同時(shí),結(jié)合2010、2012、2016三年玉米苗期耐低磷相關(guān)表型性狀,進(jìn)行候選基因關(guān)聯(lián)分析。最后,在178×9782重組自交系（Recombinat inbred lines,RIL）群體中對關(guān)聯(lián)到的顯著位點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證,并挖掘有利單倍型。... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

低磷脅迫下擬南芥根形態(tài)變化I81

３．１．１總ＲＮＡ的提取和檢測??１７８、９７８２兩份材料在低磷脅迫Ｏｈ、１２?ｈ、２４?ｈ、４８?ｈ、７２?ｈ?５個(gè)時(shí)間點(diǎn)的根系??和葉片，共２０份樣品，提取總ＲＮＡ。經(jīng)１％的瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果見圖２。??２８Ｓ＿Ａ??１８ＳｒＲＮＡ??１８?Ｓ?ｒ?Ｒ?Ｎ?Ａ??２８ＳｒＲＮＡ＾ｉ，ｌ，ｌｌ｜ｌｌｌ＂ｌ｜ｌｌｌ？ｌｌ＂＂１！?ＴＳＫＳＫＳｔＭ??１８ＳｒＲＮＡ?．．．．．．?｜ｍ?ＪＬ．．?．ｉ??圖２總ＲＮＡ樣品瓊脂糖凝膠電泳檢測圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｔｈｅ?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅｓ??３．１．２?ＺｍＭＦ家族基因定量結(jié)果??從ｍａｉｚｅｇｄｂ上下載的３８個(gè)Ｚｗ狀Ｆ家族基因在Ｂ７３正常牛長條件下］２個(gè)發(fā)育??時(shí)期的表達(dá)水平見圖３?（Ａ）。從圖中可以看出ＺｗＡ／？Ｆ家族３８個(gè)基因中７個(gè)基因??ＺｍＡＲＦ５、ＺｉｎＡＲＦ６、ＺｍＡＲＦ３Ｉ、ＺｍＡＲＦ３２、ＺｍＡＲＦ３３、ＺｍＡＲＦ３７、ＺｍＡＲＦ３８?在?Ｂ７３??的１２個(gè)牛．長發(fā)ｆ吋期表達(dá)量都很低，而剩余多數(shù)苺因在頂端分牛ｉ且織、花絲、雄穗、??胚、胚乳表達(dá)量高且相對穩(wěn)定。另外，在其余時(shí)期，表達(dá)Ｍ？變異較大，例如??在Ｂ７３苗期根部表達(dá)量高，Ｚｍｖ４／？Ｆ／３在１２個(gè)牛．長發(fā)肓吋期表達(dá)量都高。??ＺｗＡＲＦ家族３４個(gè)基因在１７８、９７８２兩份材料根系和葉片低磷脅迫Ｏｈ、１２?ｈ、２４??ｈ、４８?ｈ、７２?ｈ相對表達(dá)量結(jié)果見圖３?（Ｂ）。從圖中可以看出多數(shù)基因都受到低磷脅??１

３．２．１基因的克隆??耐低磷候選基因乃以沿＾的棊因組ＤＮＡ序列全長為６２４５?ｂｐ?（包含５＇ＵＴＲ和??３ＵＴＲ），將基因分三段擴(kuò)增，圖４是８份自交系巾擴(kuò)增基因Ｚ；？ＭＦ２３三段序列的１％??瓊脂糖凝膠電泳檢測圖，分別為２０００?ｂｐ、２５００?ｂｐ和２２００?ｂｐ。??圖４?基因的克隆??Ｆｉｇｕｒｅ４?Ｃｌｏｎｉｎｇ?ｏｆ?ＺｍＡＲＦ２３．??３．２．２基因ＺｗＪ／＾２３的序列多態(tài)性分析??根據(jù)玉米自交系Ｂ７３的全基因組測序結(jié)果，預(yù)測有兩種轉(zhuǎn)錄本形式存在，??分別為Ｚ／／ｄ／？Ｆ２Ｊ－Ｔ０１和Ｚｗｄ兄Ｐ２３－Ｔ０２?（圖５）。Ｔ０１轉(zhuǎn)錄本包含１０個(gè)外顯子，Ｔ０２包含??５個(gè)外顯子，Ｔ０２轉(zhuǎn)錄本包含Ｔ０１轉(zhuǎn)錄本的部分第６外顯子和第７、８、９、１０外顯子，其??中第１０外顯子最長。本實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增較長轉(zhuǎn)錄本ＺｍＡ？Ｆ２Ｊ－Ｔ０１進(jìn)行研究，在序列比對、拼??接后最終得到的序列長度為６８１０?５口左右，包含了乃７＾兄＾２３完整的編碼區(qū)以及５＇１；�。保�??和３＇ＵＴＲ序列。多序列比對和統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，在總計(jì)１０８條序列中，共檢測到２２２個(gè)多??態(tài)性位點(diǎn)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]玉米再生候選基因ZmLEC1的序列變異及其與胚性愈傷形成能力的關(guān)聯(lián)分析[D]. 李釗.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
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本文編號(hào)：3248211