玉米（Zea mays L.）是全球主要的糧食、飼料和經(jīng)濟作物,而玉米中磷的吸收利用效率與產(chǎn)量密切相關(guān)。生長素應(yīng)答因子（Auxin response factor,ARF）,是一類受生長素調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子,在生長素信號傳導(dǎo)途徑中起著重要的作用,影響植物生長的多個過程,包括細胞伸長、頂端優(yōu)勢、衰老以及調(diào)控植物根系生長發(fā)育等。為了解玉米生長素應(yīng)答因子ZmARF家族基因在低磷脅迫條件下的時空表達模式,本研究以玉米耐低磷自交系178和低磷敏感自交系9782為材料,分析在低磷脅迫0h、12 h、24 h、48h、72h條件下,ZmARF家族基因在178、9782苗期根系和葉片中的表達模式。為進一步分析ZmARF家族基因成員ZmARF23與耐低磷性狀顯著關(guān)聯(lián)的變異位點,本研究在108份來自熱帶、業(yè)熱帶、溫帶的玉米自交系中擴增基因ZmARF23,對其進行序列多態(tài)性分析。同時,結(jié)合2010、2012、2016三年玉米苗期耐低磷相關(guān)表型性狀,進行候選基因關(guān)聯(lián)分析。最后,在178×9782重組自交系（Recombinat inbred lines,RIL）群體中對關(guān)聯(lián)到的顯著位點進行驗證,并挖掘有利單倍型。... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

低磷脅迫下擬南芥根形態(tài)變化I81

３．１．１總ＲＮＡ的提取和檢測??１７８、９７８２兩份材料在低磷脅迫Ｏｈ、１２?ｈ、２４?ｈ、４８?ｈ、７２?ｈ?５個時間點的根系??和葉片，共２０份樣品，提取總ＲＮＡ。經(jīng)１％的瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果見圖２。??２８Ｓ＿Ａ??１８ＳｒＲＮＡ??１８?Ｓ?ｒ?Ｒ?Ｎ?Ａ??２８ＳｒＲＮＡ＾ｉ，ｌ，ｌｌ｜ｌｌｌ＂ｌ｜ｌｌｌ？ｌｌ＂＂１！?ＴＳＫＳＫＳｔＭ??１８ＳｒＲＮＡ?．．．．．．?｜ｍ?ＪＬ．．?．ｉ??圖２總ＲＮＡ樣品瓊脂糖凝膠電泳檢測圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｔｈｅ?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｓａｍｐｌｅｓ??３．１．２?ＺｍＭＦ家族基因定量結(jié)果??從ｍａｉｚｅｇｄｂ上下載的３８個Ｚｗ狀Ｆ家族基因在Ｂ７３正常牛長條件下］２個發(fā)育??時期的表達水平見圖３?（Ａ）。從圖中可以看出ＺｗＡ／？Ｆ家族３８個基因中７個基因??ＺｍＡＲＦ５、ＺｉｎＡＲＦ６、ＺｍＡＲＦ３Ｉ、ＺｍＡＲＦ３２、ＺｍＡＲＦ３３、ＺｍＡＲＦ３７、ＺｍＡＲＦ３８?在?Ｂ７３??的１２個牛．長發(fā)ｆ吋期表達量都很低，而剩余多數(shù)苺因在頂端分牛ｉ且織、花絲、雄穗、??胚、胚乳表達量高且相對穩(wěn)定。另外，在其余時期，表達Ｍ？變異較大，例如??在Ｂ７３苗期根部表達量高，Ｚｍｖ４／？Ｆ／３在１２個牛．長發(fā)肓吋期表達量都高。??ＺｗＡＲＦ家族３４個基因在１７８、９７８２兩份材料根系和葉片低磷脅迫Ｏｈ、１２?ｈ、２４??ｈ、４８?ｈ、７２?ｈ相對表達量結(jié)果見圖３?（Ｂ）。從圖中可以看出多數(shù)基因都受到低磷脅??１

３．２．１基因的克隆??耐低磷候選基因乃以沿＾的棊因組ＤＮＡ序列全長為６２４５?ｂｐ?（包含５＇ＵＴＲ和??３ＵＴＲ），將基因分三段擴增，圖４是８份自交系巾擴增基因Ｚ；？ＭＦ２３三段序列的１％??瓊脂糖凝膠電泳檢測圖，分別為２０００?ｂｐ、２５００?ｂｐ和２２００?ｂｐ。??圖４?基因的克隆??Ｆｉｇｕｒｅ４?Ｃｌｏｎｉｎｇ?ｏｆ?ＺｍＡＲＦ２３．??３．２．２基因ＺｗＪ／＾２３的序列多態(tài)性分析??根據(jù)玉米自交系Ｂ７３的全基因組測序結(jié)果，預(yù)測有兩種轉(zhuǎn)錄本形式存在，??分別為Ｚ／／ｄ／？Ｆ２Ｊ－Ｔ０１和Ｚｗｄ兄Ｐ２３－Ｔ０２?（圖５）。Ｔ０１轉(zhuǎn)錄本包含１０個外顯子，Ｔ０２包含??５個外顯子，Ｔ０２轉(zhuǎn)錄本包含Ｔ０１轉(zhuǎn)錄本的部分第６外顯子和第７、８、９、１０外顯子，其??中第１０外顯子最長。本實驗擴增較長轉(zhuǎn)錄本ＺｍＡ？Ｆ２Ｊ－Ｔ０１進行研究，在序列比對、拼??接后最終得到的序列長度為６８１０?５口左右，包含了乃７＾兄＾２３完整的編碼區(qū)以及５＇１；�。保�??和３＇ＵＴＲ序列。多序列比對和統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，在總計１０８條序列中，共檢測到２２２個多??態(tài)性位點

【參考文獻】：
期刊論文
[1]兩種磷水平下玉米苗期根系性狀的QTL定位[J]. 蘇順宗,徐剛,劉丹,吳玲,張嘯,任志勇,聶治,林海建,高世斌.  玉米科學(xué). 2013(04)
[2]四川省耕地土壤養(yǎng)分分布特征與動態(tài)變化趨勢探討[J]. 許宗林,茍曦,李昆,葉德憲.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2008(03)
[3]玉米苗期耐低磷基因型的篩選與鑒定[J]. 張吉海,高世斌,潘光堂.  玉米科學(xué). 2006(05)
[4]芒果生長素反應(yīng)因子類蛋白的cDNA克隆和表達[J]. 肖潔凝,黃學(xué)林,黃霞,李筱菊.  生物工程學(xué)報. 2004(01)
[5]土壤磷素水平和水體環(huán)境保護[J]. 魯如坤.  磷肥與復(fù)肥. 2003(01)
[6]菜豆根構(gòu)型對低磷脅迫的適應(yīng)性變化及基因型差異[J]. 廖紅,嚴小龍.  植物學(xué)報. 2000(02)

博士論文
[1]玉米LEAFY、RTCS和dbf1基因序列變異及其產(chǎn)量相關(guān)性狀關(guān)聯(lián)分析[D]. 張恩盈.揚州大學(xué) 2014
[2]耐旱候選基因與玉米相關(guān)性狀的關(guān)聯(lián)分析[D]. 蘇治軍.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009

碩士論文
[1]玉米光周期途徑中藍光響應(yīng)節(jié)律基因ZmFKF1的分子進化與關(guān)聯(lián)分析[D]. 劉玲.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]玉米再生候選基因ZmLEC1的序列變異及其與胚性愈傷形成能力的關(guān)聯(lián)分析[D]. 李釗.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]500余份玉米自交系根系低磷響應(yīng)特征分析與農(nóng)藝經(jīng)濟性狀鑒定[D]. 宋占哲.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]玉米耐旱相關(guān)候選基因dhn2與表型性狀的關(guān)聯(lián)分析[D]. 趙曦.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008



本文編號：3248211