野生二粒小麥（Triticum dicoccoiides,AABB,2n=4x=28）擁有豐富的高分子量谷蛋白亞基（HMW-GS）等位變異。因此,其新型HMW-GS的鑒定和利用既能豐富普通小麥HMW-GS基因的遺傳多樣性,又能為改良普通小麥品質(zhì)提供基因資源。本研究擬通過對野生二粒小麥D97的x-型HMW-GS,及D97與高產(chǎn)弱筋小麥品種“CN16”雜交高代（>F9）穩(wěn)定株系的HMW-GS進(jìn)行鑒定,在此基礎(chǔ)上針對普通小麥Glu-Ax遺傳多樣性低的問題,對Glu-Ax基因進(jìn)行分子克隆及其結(jié)構(gòu)分析,并對雜種后代的加工品質(zhì)進(jìn)行測定分析,旨在探討野生二粒小麥對普通小麥HMW-GS遺傳基礎(chǔ)的豐富潛能和對加工品質(zhì)的改良潛能。主要研究結(jié)果如下:1.SDS-PAGE顯示,D97的“l(fā)Bx亞基”的帶型很弱,根據(jù)電泳遷移率定為“疑似1Bx6.2亞基”。通過質(zhì)譜分析“疑似1Bx6.2亞基”應(yīng)屬于1Ax亞基的降解產(chǎn)物�；蚩寺�、序列分析和聚類分析結(jié)果顯示,D97的lBx基因全長2354bp,與GenBank數(shù)據(jù)庫中l(wèi)Bx-null（JQ007588）和lBx14（KF733216）擁有最高的相似度,分別為... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１野生二粒小麥Ｄ９７與對照ＣＳ、ＬＦＭ?１的ＨＭＷ－ＧＳｓ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，紅色直線箭頭和??

１Ｂｘ６．２亞基基因轉(zhuǎn)化的細(xì)菌卻不含有表達(dá)產(chǎn)物（圖２．２ｃ），因此初步確定疑似１Ｂｘ６．２??亞基不是ｌＢｘ條帶，表明Ｄ９７的川ｘ基因是沉默不表達(dá)的。??根據(jù)克隆到的Ｄ９７的基因和基因與己報到的其它１９個ｘ－型和６個??ｙ－型ＨＭＷ－ＧＳ基因的編碼區(qū)序列構(gòu)建了系統(tǒng)進(jìn)化樹（圖２．３）。結(jié)果表明，構(gòu)建的進(jìn)??化樹可以明顯地分成２大支，其中所有ｘ－型亞基基因和所有ｙ－型亞基基因各聚為一??大類。在ｘ－型亞基基因類群中，等位基因，／５ｘ等位基因和／Ｚ）ｘ等位基因分別聚??在一起。在以ｘ等位基因分支中，可以發(fā)現(xiàn)Ｄ９７的基因（ＫＴ３６８１５５）并未與??核苷酸長度相同的ｌＡｘｌ基因聚在一起，而是單獨分為一小支（圖２．３），說明該Ｌ４Ｗ．２??基因與其它等位基因具有一定的遺傳距離，暗示了?Ｄ９７中的Ｍｘ２．２基因是一個??新的等位基因。同樣

?｜ｒ％?—??、畫?ｉ?ｕ??圖２．２野生二粒小麥Ｄ９７的Ｌ４ｘ、／Ｓｘ基因ＰＣＲ擴(kuò)增與原核表達(dá)圖譜。??ａ：?Ｄ９７的ＨＭＷ－ＧＳ基因的ＰＣＲ擴(kuò)增，其中Ｄ９７的／辦２．２基因和“疑似／辦６．２基因”分別由紅色??直線箭頭和紅色三角箭頭標(biāo)示，Ｍａｒｋｅｒ為ｌｋｂＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ。??ｂ和ｃ：分別為／Ａｃ２．２和“疑似／Ｂｘ６．２基因”成熟蛋白編碼區(qū)的原核表達(dá)分析，１Ａｘ２．２亞基和“疑??似丨Ｂｘ６．２亞基”分別用黑色和白色箭頭標(biāo)出。其中泳道１為種子蛋白，泳道２和４均為由誘導(dǎo)??后并分別經(jīng)丙酮法純化和作為對照的未經(jīng)丙酮法純化的表達(dá)蛋白，泳道３和５均為未用ＩＰＴＧ誘??導(dǎo)并分別經(jīng)丙酮法純化和作為對照的未經(jīng)丙酮法純化的圖譜。??Ｆｉｇ．?２．２?ＤＮＡ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｌＡｘ，?ＩＢｘ?ｇｅｎｅｓ?ｏｆ?ｗｉｌｄ?ｅｍｍｅｒ?Ｄ９７．??ａ：?Ｔｈｅ?ａｍｐｌｉｆｉｅｄ?ｃｏｍｐｌｅｔｅ?ＯＲＦ?ｏｆ?ＨＭＷ－ＧＳ?ｇｅｎｅｓ?ｏｆ?Ｄ９７，?Ｏｆ?ｗｈｉｃｈ，?！Ａｘ２．２?ｇｅｎｅ?ａｎｄ?４ｉｉｋｅｌｙ?１Ｂｘ６．２??ｇｅｎｅ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]野生二粒小麥導(dǎo)入普通小麥抗白粉病基因的分子標(biāo)記[J]. 沈紅霞,辛明明,梁榮奇,解超杰,楊作民,劉志勇,孫其信.  華北農(nóng)學(xué)報. 2012(04)
[2]野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基組成的多態(tài)性研究[J]. 張大樂,李黎,方圓,蘇亞蕊,李玉閣,李鎖平.  河南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(03)
[3]Characterization of a Novel 1Ay Gene and Its Expression Protein in Triticum urartu[J]. HU Xi-gui1, 2, WU Bi-hua1, 2, YAN Ze-hong1, 2, LIU Deng-cai1, 2, 3, WEI Yu-ming1, 2 and ZHENG You-liang1, 2 1 Triticeae Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang 611130, P.R.China 2 Key Laboratory of Crop Genetic Resources and Improvement, Ministry of Education/Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, P.R.China 3 Key Laboratory of Adaptation and Evolution of Plateau Biota, Northwest Institute of Plateau Biology, Chinese Academy of Sciences, Xining 810001, P.R.China.  Agricultural Sciences in China. 2010(11)
[4]硬粒小麥和野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基的遺傳多樣性[J]. 金廣慧,杜向紅,譚秀芳,高永鋼,宋衛(wèi)寧.  麥類作物學(xué)報. 2010(02)
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[6]從野生二粒小麥導(dǎo)入普通小麥的抗白粉病基因MlWE18分子標(biāo)記定位[J]. 韓俊,張連松,李根橋,張宏濤,解超杰,楊作民,孫其信,劉志勇.  作物學(xué)報. 2009(10)
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[8]野生二粒小麥導(dǎo)入普通小麥的抗白粉病基因MlWE29分子標(biāo)記定位[J]. 張連松,華為,關(guān)海英,李根橋,張宏濤,解超杰,楊作民,孫其信,劉志勇.  作物學(xué)報. 2009(06)
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博士論文
[1]栽培一粒和野生二粒小麥HMW-GS及其編碼基因的特異性和在普通小麥中的可利用性研究[D]. 郭孝輝.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]小麥屬物種高分子量谷蛋白亞基遺傳多樣性研究[D]. 徐黎黎.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009

碩士論文
[1]野生二粒小麥1By基因的分子克隆與序列分析[D]. 王真真.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]栽培二粒小麥Glu-A1和Glu-B1基因的沉默機(jī)制分析及其向六倍體小麥轉(zhuǎn)移[D]. 胡信坤.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]利用野生二粒小麥優(yōu)異基因創(chuàng)制小麥高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)育種新材料的研究[D]. 李平.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[4]野生二粒小麥1Ay高分子量谷蛋白亞基的分子克隆及其“表達(dá)—沉默”機(jī)理探討[D]. 鄭雯.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[5]野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基等位變異分析[D]. 盧霖.首都師范大學(xué) 2008
[6]沉默的小麥1By高分子量谷蛋白亞基的分子克隆[D]. 袁中偉.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3233053