ZmmiR169q在玉米應(yīng)答鹽脅迫中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-08 14:20
玉米是全球范圍內(nèi)重要的糧食、飼料和工業(yè)原料作物,土壤鹽堿化極大地影響了玉米的生長(zhǎng)和最終產(chǎn)量,miRNAs是植物生長(zhǎng)發(fā)育和逆境應(yīng)答過(guò)程的關(guān)鍵調(diào)控因子,但miRNAs參與玉米高鹽應(yīng)答的研究還很少。本研究前期鑒定了一個(gè)玉米根中對(duì)鹽脅迫敏感的miR169家族成員ZmmiR169q,初步分析表明,ZmmiR169q參與了調(diào)控玉米對(duì)鹽逆境的應(yīng)答。在前期基礎(chǔ)之上,深入研究了ZmmiR169q調(diào)控玉米鹽應(yīng)答的分子機(jī)制,主要取得以下結(jié)果:1.對(duì)pmiR169q:GUS轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行GUS染色分析,發(fā)現(xiàn)在200?mM NaCl處理1 h時(shí),根中ZmmiR169q表達(dá)量降到最低,4 h后逐漸升高,表明ZmmiR169q可能是玉米根中的一個(gè)鹽應(yīng)答信號(hào)。2.ZmmiR169q沉默的轉(zhuǎn)基因玉米株系(MIM169q)對(duì)200 mM NaCl表現(xiàn)很強(qiáng)的耐受性,而ZmmiR169q過(guò)表達(dá)株系(ZmmiR169q OE)則對(duì)200 mM NaCl很敏感,表現(xiàn)出極不耐鹽的表型,表明ZmmiR169q對(duì)玉米植株耐鹽性具有負(fù)調(diào)控作用。3.ZmmiR169q OE株系及WT植株的根部轉(zhuǎn)錄組分析表明,ZmmiR169q可能參與高鹽...
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
主要符號(hào)對(duì)照表
第一章 緒論
1.1 植物的耐鹽機(jī)理
1.1.1 滲透調(diào)節(jié)
1.1.2 離子調(diào)節(jié)
1.1.3 次生調(diào)節(jié)
1.2 miRNA參與植物逆境脅迫的研究進(jìn)展
1.3 NF-Y參與植物逆境脅迫的研究進(jìn)展
1.4 miR169/NF-YA參與調(diào)控植物逆境脅迫和生長(zhǎng)發(fā)育的研究進(jìn)展
1.5 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 玉米材料的種植與處理
2.2.2 生物量的測(cè)定
2.2.3 DAB與 NBT染色
2.2.4 GUS組織化學(xué)染色與觀察
2.2.5 丙二醛(MDA)濃度和抗氧化酶活性的測(cè)定
2.2.6 植物基因組DNA的提取方法
2.2.7 植物基因組PCR鑒定方法
2.2.8 玉米材料RNA的提取及cDNA的獲得
2.2.9 qPCR檢測(cè)靶基因相對(duì)表達(dá)量
2.2.10 酵母單雜交
2.2.11 ChIP實(shí)驗(yàn)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 ZmmiR169q低表達(dá)增強(qiáng)了玉米的耐鹽性
3.2 轉(zhuǎn)錄組分析表明Zmmi R169q參與了鹽脅迫誘導(dǎo)的氧化脅迫
3.3 Zmmi R169q通過(guò)其下游靶基因Zm NF-YA14 發(fā)揮功能
3.4 Zm NF-YA14 過(guò)表達(dá)增強(qiáng)了玉米的耐鹽性
3.5 鹽脅迫下Zmmi R169q OE和Zm NF-YA14 OE中的ROS表達(dá)變化
3.5.1 轉(zhuǎn)基因材料的DAB與 NBT染色
3.5.2 不同轉(zhuǎn)基因株系中抗氧化物酶系的活性測(cè)定
3.6 Zm NF-YA14 特異結(jié)合Zm PER1 的啟動(dòng)子
3.6.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)及ZmPER1啟動(dòng)子序列分析
3.6.2 Zm NF-YA14 與啟動(dòng)子的相互作用驗(yàn)證
第四章 結(jié)論
第五章 討論
參考文獻(xiàn)
附錄 A
附錄 B
致謝
作者簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3175490
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
主要符號(hào)對(duì)照表
第一章 緒論
1.1 植物的耐鹽機(jī)理
1.1.1 滲透調(diào)節(jié)
1.1.2 離子調(diào)節(jié)
1.1.3 次生調(diào)節(jié)
1.2 miRNA參與植物逆境脅迫的研究進(jìn)展
1.3 NF-Y參與植物逆境脅迫的研究進(jìn)展
1.4 miR169/NF-YA參與調(diào)控植物逆境脅迫和生長(zhǎng)發(fā)育的研究進(jìn)展
1.5 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 玉米材料的種植與處理
2.2.2 生物量的測(cè)定
2.2.3 DAB與 NBT染色
2.2.4 GUS組織化學(xué)染色與觀察
2.2.5 丙二醛(MDA)濃度和抗氧化酶活性的測(cè)定
2.2.6 植物基因組DNA的提取方法
2.2.7 植物基因組PCR鑒定方法
2.2.8 玉米材料RNA的提取及cDNA的獲得
2.2.9 qPCR檢測(cè)靶基因相對(duì)表達(dá)量
2.2.10 酵母單雜交
2.2.11 ChIP實(shí)驗(yàn)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 ZmmiR169q低表達(dá)增強(qiáng)了玉米的耐鹽性
3.2 轉(zhuǎn)錄組分析表明Zmmi R169q參與了鹽脅迫誘導(dǎo)的氧化脅迫
3.3 Zmmi R169q通過(guò)其下游靶基因Zm NF-YA14 發(fā)揮功能
3.4 Zm NF-YA14 過(guò)表達(dá)增強(qiáng)了玉米的耐鹽性
3.5 鹽脅迫下Zmmi R169q OE和Zm NF-YA14 OE中的ROS表達(dá)變化
3.5.1 轉(zhuǎn)基因材料的DAB與 NBT染色
3.5.2 不同轉(zhuǎn)基因株系中抗氧化物酶系的活性測(cè)定
3.6 Zm NF-YA14 特異結(jié)合Zm PER1 的啟動(dòng)子
3.6.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)及ZmPER1啟動(dòng)子序列分析
3.6.2 Zm NF-YA14 與啟動(dòng)子的相互作用驗(yàn)證
第四章 結(jié)論
第五章 討論
參考文獻(xiàn)
附錄 A
附錄 B
致謝
作者簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3175490
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