玉米是全球范圍內(nèi)重要的糧食、飼料和工業(yè)原料作物,土壤鹽堿化極大地影響了玉米的生長和最終產(chǎn)量,miRNAs是植物生長發(fā)育和逆境應(yīng)答過程的關(guān)鍵調(diào)控因子,但miRNAs參與玉米高鹽應(yīng)答的研究還很少。本研究前期鑒定了一個(gè)玉米根中對鹽脅迫敏感的miR169家族成員ZmmiR169q,初步分析表明,ZmmiR169q參與了調(diào)控玉米對鹽逆境的應(yīng)答。在前期基礎(chǔ)之上,深入研究了ZmmiR169q調(diào)控玉米鹽應(yīng)答的分子機(jī)制,主要取得以下結(jié)果:1.對pmiR169q:GUS轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行GUS染色分析,發(fā)現(xiàn)在200?mM NaCl處理1 h時(shí),根中ZmmiR169q表達(dá)量降到最低,4 h后逐漸升高,表明ZmmiR169q可能是玉米根中的一個(gè)鹽應(yīng)答信號。2.ZmmiR169q沉默的轉(zhuǎn)基因玉米株系（MIM169q）對200 mM NaCl表現(xiàn)很強(qiáng)的耐受性,而ZmmiR169q過表達(dá)株系（ZmmiR169q OE）則對200 mM NaCl很敏感,表現(xiàn)出極不耐鹽的表型,表明ZmmiR169q對玉米植株耐鹽性具有負(fù)調(diào)控作用。3.ZmmiR169q OE株系及WT植株的根部轉(zhuǎn)錄組分析表明,ZmmiR169q可能參與高鹽... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
主要符號對照表
第一章 緒論
    1.1 植物的耐鹽機(jī)理
        1.1.1 滲透調(diào)節(jié)
        1.1.2 離子調(diào)節(jié)
        1.1.3 次生調(diào)節(jié)
    1.2 miRNA參與植物逆境脅迫的研究進(jìn)展
    1.3 NF-Y參與植物逆境脅迫的研究進(jìn)展
    1.4 miR169/NF-YA參與調(diào)控植物逆境脅迫和生長發(fā)育的研究進(jìn)展
    1.5 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 玉米材料的種植與處理
        2.2.2 生物量的測定
        2.2.3 DAB與 NBT染色
        2.2.4 GUS組織化學(xué)染色與觀察
        2.2.5 丙二醛(MDA)濃度和抗氧化酶活性的測定
        2.2.6 植物基因組DNA的提取方法
        2.2.7 植物基因組PCR鑒定方法
        2.2.8 玉米材料RNA的提取及cDNA的獲得
        2.2.9 qPCR檢測靶基因相對表達(dá)量
        2.2.10 酵母單雜交
        2.2.11 ChIP實(shí)驗(yàn)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 ZmmiR169q低表達(dá)增強(qiáng)了玉米的耐鹽性
    3.2 轉(zhuǎn)錄組分析表明Zmmi R169q參與了鹽脅迫誘導(dǎo)的氧化脅迫
    3.3 Zmmi R169q通過其下游靶基因Zm NF-YA14 發(fā)揮功能
    3.4 Zm NF-YA14 過表達(dá)增強(qiáng)了玉米的耐鹽性
    3.5 鹽脅迫下Zmmi R169q OE和Zm NF-YA14 OE中的ROS表達(dá)變化
        3.5.1 轉(zhuǎn)基因材料的DAB與 NBT染色
        3.5.2 不同轉(zhuǎn)基因株系中抗氧化物酶系的活性測定
    3.6 Zm NF-YA14 特異結(jié)合Zm PER1 的啟動子
        3.6.1 轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)及ZmPER1啟動子序列分析
        3.6.2 Zm NF-YA14 與啟動子的相互作用驗(yàn)證
第四章 結(jié)論
第五章 討論
參考文獻(xiàn)
附錄 A
附錄 B
致謝
作者簡歷



本文編號：3175490