開(kāi)花時(shí)間是熟期指示性狀,開(kāi)花時(shí)間早的油菜早熟。目前,開(kāi)花時(shí)間QTL的定位研究仍處于粗定位,定位出的開(kāi)花時(shí)間QTL（Quantitative trait locus）與標(biāo)記之間的距離較大,在進(jìn)行標(biāo)記輔助育種時(shí)存在偏差。本研究在前期研究的基礎(chǔ)上,對(duì)A基因組上定位出的與開(kāi)花時(shí)間QTL連鎖的SSR標(biāo)記進(jìn)行分離、測(cè)序,確定了開(kāi)花時(shí)間QTL所在的染色體;根據(jù)所在染色體的參考基因組,利用同源系列法開(kāi)發(fā)了與開(kāi)花時(shí)間QTL連鎖的標(biāo)記,并結(jié)合BSA法對(duì)QTL所在區(qū)段進(jìn)行了加密,選出了與開(kāi)花時(shí)間QTL緊密連鎖的標(biāo)記;在DNA水平和RNA水平上對(duì)QTL所在區(qū)段內(nèi)的候選基因進(jìn)行分析。該項(xiàng)研究為進(jìn)一步進(jìn)行標(biāo)記輔助育種奠定基礎(chǔ)。論文主要研究結(jié)果如下:（1）利用BSA法對(duì)已建圖譜上與開(kāi)花時(shí)間QTL連鎖的85個(gè)SSR標(biāo)記進(jìn)行篩選后發(fā)現(xiàn)有6對(duì)引物在親本和極端基因池中能擴(kuò)增出9個(gè)特異性的條帶,經(jīng)標(biāo)記分離、測(cè)序后初步確定開(kāi)花時(shí)間QTL FQ10和FQ12在A3染色體上的4785 Kb-11400 Kb的區(qū)間內(nèi)。（2）根據(jù)QTLs所在的A3染色體參考基因組NC₀27759.2上的2500 Kb-12500... 

【文章來(lái)源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

引物篩選結(jié)果

圖 2.2 125 號(hào)引物的電泳結(jié)果Figure 2.2 Electrophoresis results for 125M：100bp DNALadder Marker 1-5：早熟親本 6-10：晚熟11-15：早花基因池 16-20：晚花基因池 Note:M：100bp DNALadder Marker 1-5：Early flowering paren6-10: Late flowering parents15：Early flowering gene pool 16-20：Late flowering gene PCR 及差異片段的測(cè)序酰胺凝膠回收產(chǎn)物為模板進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物行電泳，并將獲得的片段與聚丙烯酰胺上的片段進(jìn)片段從瓊脂糖凝膠上切下來(lái)，進(jìn)行膠回收。其中部2.3 所示。

圖 2.3 125-1 二次 PCR 的電泳結(jié)果Electrophoresis results for the second：100bp Ladder Marker 1-2：二次 P100bp Ladder Marker 1-2： Secon瓊脂糖凝膠回收試劑盒回收�；厥辗志候�(yàn)證的結(jié)果如圖 2.4 所示

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]新型春性甘藍(lán)型油菜開(kāi)花相關(guān)基因的篩選及表達(dá)模式研究[D]. 張生萍.青海大學(xué) 2017
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本文編號(hào)：3147042