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硫化氫對(duì)大豆共生根瘤衰老的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-13 23:05
  硫化氫信號(hào)分子(Hydrogen sulfide,H2S)能夠參與植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程,并在植物響應(yīng)各種生物和非生物脅迫過(guò)程中發(fā)揮重要作用,因此被認(rèn)定為繼一氧化氮(Nitric oxide,NO)和一氧化碳(Carbon monoxide,CO)后的新的氣體信號(hào)分子。然而,H2S是否參與調(diào)控大豆-根瘤菌共生固氮體系進(jìn)而影響根瘤的固氮及衰老過(guò)程還不是很清楚。因此,本項(xiàng)目選用大豆中黃13為實(shí)驗(yàn)材料,從植株生長(zhǎng)表型、氮素含量、根瘤數(shù)目及衰老根瘤所占比例、根瘤內(nèi)固氮酶活性、固氮酶蛋白表達(dá)、衰老標(biāo)記基因及固氮共生基因的表達(dá)等方面分析H2S在大豆植物根瘤衰老以及固氮過(guò)程中的調(diào)控機(jī)制研究。研究結(jié)果如下:1.以人工氣候室培養(yǎng)的大豆(中黃13)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,接種大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii,strain Q8)。在接種根瘤菌后三周,外源添加H2S,分6個(gè)時(shí)期(3周、4周、5周、6周、7周、8周)分別收取樣品,并測(cè)定大豆地上/地下干重、根瘤總數(shù)及衰老根瘤所占比例等生理指標(biāo)。結(jié)果表明,相比對(duì)照組,H<... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物和微生物之間的共生作用
    1.2 豆科植物-根瘤菌共生的研究進(jìn)展
        1.2.1 豆科植物共生固氮作用的相關(guān)研究
        1.2.2 豆科植物根瘤的形態(tài)特征
        1.2.3 豆科植物結(jié)瘤的分子機(jī)制
    1.3 植物衰老的研究進(jìn)展
        1.3.1 豆科植物衰老過(guò)程中的表觀形態(tài)特征
        1.3.2 根瘤衰老過(guò)程中的形態(tài)特征
        1.3.3 豆科植物衰老過(guò)程中的標(biāo)記基因
    1.4 H2S信號(hào)分子的研究進(jìn)展
    1.5 立題依據(jù)及意義
    1.6 技術(shù)路線
第二章 H2S信號(hào)分子對(duì)大豆-根瘤菌共生體系生理指標(biāo)的影響
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料、試劑、儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及菌株
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 大豆生長(zhǎng)條件及菌株培養(yǎng)
        2.3.2 植株表型及根瘤形態(tài)特征
        2.3.3 大豆不同部位氮素含量測(cè)定
        2.3.4 氣相色譜法測(cè)定根瘤固氮酶活性測(cè)定
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 大豆生長(zhǎng)表型
        2.4.2 大豆銨態(tài)氮、硝態(tài)氮、總氮含量
    2.5 討論
第三章 根瘤組織形態(tài)觀察
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料、儀器、試劑
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 石蠟切片制作及觀察
        3.3.2 透射電鏡樣品制備及實(shí)驗(yàn)觀察
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 根瘤結(jié)構(gòu)分析
        3.4.2 根瘤超微結(jié)構(gòu)分析
    3.5 討論
第四章 大豆根、根瘤內(nèi)的蛋白表達(dá)分析
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料、儀器、試劑
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 大豆根、根瘤蛋白提取
        4.3.2 Western-blot實(shí)驗(yàn)方法
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 固氮酶鐵蛋白表達(dá)分析
        4.4.2 結(jié)瘤素蛋白表達(dá)分析
    4.5 討論
第五章 大豆根、根瘤內(nèi)基因表達(dá)分析
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料、儀器、試劑
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 大豆根、根瘤總RNA提取
        5.3.2 大豆根、根瘤總RNA反轉(zhuǎn)錄
        5.3.3 引物設(shè)計(jì)
        5.3.4 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)方法程序
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 大豆根、根瘤內(nèi)與衰老相關(guān)的基因表達(dá)分析
        5.4.2 大豆根、根瘤內(nèi)與共生相關(guān)的基因表達(dá)分析
        5.4.3 大豆根瘤內(nèi)與氮代謝相關(guān)的基因表達(dá)分析
    5.5 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]固氮酶催化N2和H~+還原的機(jī)制[D]. 趙德華.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004

碩士論文
[1]大豆根瘤固氮酶活性與固氮量的研究[D]. 邸偉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]陜西、甘肅黃土高原重要豆科植物根瘤的顯微及超微結(jié)構(gòu)研究[D]. 何一.西北大學(xué) 2003



本文編號(hào):3136167

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