花椒（Zanthoxylum bungeanum Maxim）作為我國常用的藥為食兩用作物,具有較高的生態(tài)價值和經(jīng)濟價值�；ń繁旧砭哂锌咕蜌⑾x的功效,植物幾丁質(zhì)酶基因在植物抗逆防御病害反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,但該基因在花椒中尚未有人克隆,本研究在實驗室構(gòu)建的朝倉花椒轉(zhuǎn)錄組庫的基礎(chǔ)上,以花椒嫩芽為材料,克隆ZaCHIT1-like基因全長編碼序列,并檢測了ZaCHIT1-like基因在花椒葉、莖、果實等器官中的表達水平。研究結(jié)果如下:提取朝倉花椒嫩芽的總mRNA,采用RACE技術(shù)克隆了朝倉花椒ZaCHIT1-like基因中的5’-RACE片段1080 bp和3’-RACE片段896 bp,將RACE擴增片段拼接并重新設(shè)計cDNA全長序列引物進行擴增,得到了1373 bp的ZaCHIT1-like基因的cDNA全長序列。ZaCHIT1-like基因CDS全長序列為969 bp。經(jīng)過BLASTp比對,發(fā)現(xiàn)ZaCHIT1-like與克萊門柚（Citrus clementina）、土瓶草（Cephalotus follicularis）CHIT序列同源性分別為88%和81%;功能結(jié)構(gòu)域分析預(yù)測,該... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

通用引物GSPs及其擴增產(chǎn)物與cDNA模板的關(guān)系

230=1.90，說明所提取的 RNA 質(zhì)量符合 RACE 擴增的要求。圖2.2 花椒總RNA提取Figure2.2 Total RNA isolated from Zanthoxylum piperitum DC.

貴州大學(xué)碩士畢業(yè)論文3.1.2 ZaCHIT1-like 基因的 5’、3’RACE 克隆結(jié)果使用通用引物 UPM 分別與 ZaCHI-5 和 ZaCHI-3 與組合進行 5’-RACE 和PCR 擴增，隨后將所得擴增產(chǎn)物使用 1.0 %瓊脂糖凝膠進行電泳檢測，并對其測序結(jié)果顯示 5’-RACE 擴增條帶大小為 1080 bp，3’-RACE 擴增條帶測序結(jié)bp(見圖 2.9 A)。5’-RACE 擴增產(chǎn)物與 3’-RACE 擴增產(chǎn)物產(chǎn)物有 603 bp 重復(fù)區(qū)region)，與設(shè)計相符。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3102626