土壤鹽漬化是影響植物正常生長(zhǎng)和作物產(chǎn)量的重要因素。我國(guó)鹽堿土地面積很多,且由于干旱條件下灌溉帶來(lái)的次生鹽害,土地資源的鹽漬化呈現(xiàn)日趨加重的趨勢(shì)。鑒定耐鹽小麥種質(zhì),克隆耐鹽相關(guān)基因并鑒定其功能具有重要意義。本研究對(duì)從美國(guó)引進(jìn)的400余份小麥種質(zhì)進(jìn)行了芽期的耐鹽性鑒定,篩選出一些芽期耐鹽性較好的耐鹽小麥種質(zhì);同時(shí)克隆了一個(gè)NaCl誘導(dǎo)表達(dá)的小麥熱激蛋白基因,在生物信息學(xué)分析的基礎(chǔ)上,通過(guò)基因的表達(dá)分析和轉(zhuǎn)基因擬南芥分析鑒定了該基因的功能。主要研究結(jié)果如下:1.小麥芽期的耐鹽性鑒定對(duì)從美國(guó)引進(jìn)的400余份小麥種質(zhì)進(jìn)行芽期耐鹽性鑒定,從中篩選出了鹽害指數(shù)在20%以下的高耐鹽小麥品種及鹽害指數(shù)在40%以下的耐鹽品種共有35份;同時(shí)也統(tǒng)計(jì)了小麥在芽期的發(fā)芽數(shù)。發(fā)現(xiàn)其在2%NaCl處理下的發(fā)芽數(shù)即發(fā)芽率越高的那它的鹽害指數(shù)就會(huì)越低,兩者的關(guān)系成負(fù)相關(guān)。2.熱激蛋白基因的生物信息學(xué)分析生物信息學(xué)分析表明該基因含有一個(gè)保守的熱激蛋白功能結(jié)構(gòu)域,利用NCBI的網(wǎng)站確定出了ORF開放閱讀框其全長(zhǎng)為477bp,編碼158個(gè)氨基酸,無(wú)跨膜結(jié)構(gòu)域,通過(guò)Ex PAsy提供的Prot Paramtool工具分析了該氨... 

【文章來(lái)源】：濟(jì)南大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 國(guó)內(nèi)外耐鹽小麥種質(zhì)資源的研究
    1.2 植物耐鹽性的研究
        1.2.1 鹽脅迫對(duì)植物的影響
        1.2.2 植物對(duì)鹽脅迫的適應(yīng)機(jī)制
        1.2.3 植物鹽脅迫下的信號(hào)傳導(dǎo)途徑
    1.3 熱激蛋白研究進(jìn)展
        1.3.1 熱激蛋白的含義
        1.3.2 熱激蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
        1.3.3 植物熱激蛋白的分類及定位
        1.3.4 植物熱激蛋白的作用
        1.3.5 熱激蛋白的基因調(diào)控
    1.4 選題的目的及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株與質(zhì)粒
        2.1.3 試劑
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
        2.1.5 主要溶液配方
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 不同小麥品種耐鹽性鑒定
        2.2.2 目的基因的克隆
        2.2.3 基因的表達(dá)分析
        2.2.4 轉(zhuǎn)化擬南芥及單拷貝植株的篩選培養(yǎng)
        2.2.5 轉(zhuǎn)基因單拷貝純合擬南芥的抗逆性鑒定
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 不同品種小麥芽期耐鹽鑒定結(jié)果
    3.2 熱激蛋白基因的克隆和生物信息學(xué)分析
        3.2.1 熱激蛋白基因克隆
        3.2.2 熱激蛋白基因的生物信息學(xué)分析
    3.3 目標(biāo)基因的表達(dá)分析
        3.3.1 芯片雜交結(jié)果
        3.3.2 RT-RCR分析
    3.4 熱激蛋白基因的功能鑒定
        3.4.1 轉(zhuǎn)基因單拷貝擬南芥的獲得
        3.4.2 轉(zhuǎn)基因擬南芥的抗NaCl能力鑒定
        3.4.3 對(duì)照及轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的脯氨酸含量測(cè)定
        3.4.4 轉(zhuǎn)基因單拷貝純合擬南芥植株的POD酶活性測(cè)定
        3.4.5 轉(zhuǎn)基因單拷貝純合擬南芥植株的失水率測(cè)定
第四章 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號(hào)：3087943