大麻二酚抗氧化活性研究及不同環(huán)境差異下轉(zhuǎn)錄組分析
發(fā)布時(shí)間:2021-03-09 21:45
工業(yè)大麻作為一種重要的藥用和纖維用植物,其化學(xué)成分復(fù)雜,用途廣泛。國內(nèi)外文獻(xiàn)都報(bào)道大麻具有很高的藥用價(jià)值。利用現(xiàn)代研究手段已經(jīng)從大麻里分離得到大麻酚類、黃酮類、有機(jī)酸、萜類等化學(xué)成分,其中大麻二酚(CBD)作為活性成分具有抗菌、抗炎以及抗腫瘤等多種藥用。本研究基于對(duì)大麻中CBD不同提取方法工藝的優(yōu)化、抗氧化活性以及挖掘CBD合成相關(guān)基因?yàn)槟康?優(yōu)化提取和鑒定CBD的的方法,評(píng)價(jià)CBD抗氧化活性,并初步篩選可能合成CBD的差異表達(dá)基因,F(xiàn)將本論文工作總結(jié)如下:1.采用單因素優(yōu)化法和響應(yīng)面試驗(yàn),從溶劑種類、超聲時(shí)間、料液比、提取次數(shù)對(duì)CBD提取方法進(jìn)行優(yōu)化;設(shè)置大麻葉片在溫度為65℃、75℃、85℃、95℃、105℃、115℃烘烤下研究CBDA的脫羧反應(yīng),結(jié)果表明:甲醇為提取溶劑、提取2次、超聲10min、料液比1∶35(g/mL)為最佳提取條件;CBD在85℃、95℃時(shí)脫羧效果最好,脫羧轉(zhuǎn)化率最高79.7%。建立超臨界提取優(yōu)化法,采用不同溫度、壓力下對(duì)兩組不同處理下的大麻花葉下中CBD指提取量來考察最佳提取條件,結(jié)果顯示:在不同的溫度壓力下對(duì)大麻素的提取效果有著明顯的差異,其中在壓力為4...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【圖文】:
CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章大麻二酚提取工藝優(yōu)化10范圍),使用了內(nèi)部泵。自動(dòng)壓力調(diào)節(jié)器控制整個(gè)系統(tǒng)的壓力。系統(tǒng)在動(dòng)態(tài)模式下運(yùn)行,其中流體二氧化碳被允許流入收集容器。采用29g/min的液體CO2流量。設(shè)置提取時(shí)間為2小時(shí),分別進(jìn)行熱處理材料和未熱處理材料進(jìn)行萃齲當(dāng)萃取結(jié)束時(shí),系統(tǒng)的減壓過程持續(xù)45分鐘。從10mL的試管中收集大麻提取物;旌暇鶆蚝,準(zhǔn)確稱量不同溫度和壓力下采集的0.2g提取物。采用甲醇10mL和超聲輔助溶解并過有機(jī)濾膜進(jìn)行HPLC分析。2.3結(jié)果2.3.1CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線以CBD質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線,見圖2-1。由圖可知:CBD濃度與峰面積在10~100g/mL之間存在良好的線性關(guān)系,標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=44.814x+14.125(R2=0.9995)。圖2-2為工業(yè)大麻花葉中大麻酚類物質(zhì)的HPLC分離圖譜。圖2-1CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2-1StandardcurveofCBD圖2-2CBD標(biāo)準(zhǔn)溶液系列色譜圖Fig.2-2HPLCofCBDseries
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章大麻二酚提取工藝優(yōu)化112.3.2初始提取條件下CBD的提取利用公式計(jì)算大麻葉中提取CBD含量發(fā)現(xiàn):初始提取條件(料液比1:35、提取溶劑甲醇、提取1次、超聲時(shí)間3min)下,CBD含量為0.15%0.001%。2.3.3溶劑種類對(duì)CBD得率的影響在料液比為1∶35(g/mL),提取次數(shù)2次,提取時(shí)間5min條件下,觀察不同溶劑對(duì)CBD提取得率的影響。圖2-3所示,結(jié)果發(fā)現(xiàn):正己烷、乙酸乙酯、乙醇的提取效果略低于甲醇,綜合考慮色譜基線穩(wěn)定、試劑毒性影響、試劑成本、總提取效率和環(huán)境保護(hù)等因素,我們選擇甲醇作為CBD提取的最佳溶劑。圖2-3不同提取溶劑對(duì)CBD含量的影響Fig.2-3EffectsofdifferentsolventsonthecontentofCBD2.3.4提取時(shí)間對(duì)CBD得率的影響用甲醇作為提取溶劑,在料液比1∶35(g/mL)條件下提取2次,考察提取時(shí)間(3min、5min、10min、15min)對(duì)CBD含量的影響。由2-4可知,不同超聲時(shí)間對(duì)CBD含量的影響較大,超聲10min時(shí)CBD的提取效率最佳,含量最高。繼續(xù)延長超聲時(shí)間反而降低了CBD的含量。因此,超聲10min為CBD提取的最佳條件。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大麻化學(xué)成分及其種屬差異研究進(jìn)展[J]. 楊柳秀,李超然,高雯. 中國中藥雜志. 2020(15)
[2]轉(zhuǎn)錄組學(xué)主要研究技術(shù)及其應(yīng)用概述[J]. 劉偉,郭光艷,秘彩莉. 生物學(xué)教學(xué). 2019(10)
[3]藥用植物中黃嘌呤氧化酶抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 張晨輝,謝雄雄,曾金祥,謝晶,李敏,鐘國躍. 中成藥. 2018(10)
[4]蝦青素清除ABTS自由基的紫外-可見吸收光譜研究[J]. 莫鏡池,李曉芬,熊華斌,高云濤,速敏,郭秋爽. 食品工業(yè). 2018(03)
[5]亞臨界萃取技術(shù)在天然產(chǎn)物提取中的應(yīng)用[J]. 楊志空,韓偉. 機(jī)電信息. 2018(08)
[6]天然植物中有效成分的提取、分離技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 周佳儒,李久明,徐寧,春英,敖亮亮. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(01)
[7]工業(yè)大麻葉中大麻二酚含量分析研究[J]. 高寶昌,孫宇峰,張旭,石雨,田媛,崔寶玉. 黑龍江科學(xué). 2018(01)
[8]亞臨界水萃取技術(shù)及其在有效成分提取和分析領(lǐng)域中的應(yīng)用[J]. 蔡錦源,王萌璇,唐念,許芬,韋坤華. 應(yīng)用化工. 2017(06)
[9]大麻化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 弓佩含,楊洋,劉玉婷,吳程彥,嚴(yán)銘銘,邵帥,徐東銘. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2017(13)
[10]大麻二酚對(duì)急性腦出血小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制[J]. 高兵兵,吳月奎,馬建華,易波,戴宜武. 山東醫(yī)藥. 2017(04)
碩士論文
[1]野菊花超臨界二氧化碳萃取物的抗炎活性及其機(jī)理研究[D]. 吳曉麗.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2014
本文編號(hào):3073526
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【圖文】:
CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章大麻二酚提取工藝優(yōu)化10范圍),使用了內(nèi)部泵。自動(dòng)壓力調(diào)節(jié)器控制整個(gè)系統(tǒng)的壓力。系統(tǒng)在動(dòng)態(tài)模式下運(yùn)行,其中流體二氧化碳被允許流入收集容器。采用29g/min的液體CO2流量。設(shè)置提取時(shí)間為2小時(shí),分別進(jìn)行熱處理材料和未熱處理材料進(jìn)行萃齲當(dāng)萃取結(jié)束時(shí),系統(tǒng)的減壓過程持續(xù)45分鐘。從10mL的試管中收集大麻提取物;旌暇鶆蚝,準(zhǔn)確稱量不同溫度和壓力下采集的0.2g提取物。采用甲醇10mL和超聲輔助溶解并過有機(jī)濾膜進(jìn)行HPLC分析。2.3結(jié)果2.3.1CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線以CBD質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線,見圖2-1。由圖可知:CBD濃度與峰面積在10~100g/mL之間存在良好的線性關(guān)系,標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=44.814x+14.125(R2=0.9995)。圖2-2為工業(yè)大麻花葉中大麻酚類物質(zhì)的HPLC分離圖譜。圖2-1CBD標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2-1StandardcurveofCBD圖2-2CBD標(biāo)準(zhǔn)溶液系列色譜圖Fig.2-2HPLCofCBDseries
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章大麻二酚提取工藝優(yōu)化112.3.2初始提取條件下CBD的提取利用公式計(jì)算大麻葉中提取CBD含量發(fā)現(xiàn):初始提取條件(料液比1:35、提取溶劑甲醇、提取1次、超聲時(shí)間3min)下,CBD含量為0.15%0.001%。2.3.3溶劑種類對(duì)CBD得率的影響在料液比為1∶35(g/mL),提取次數(shù)2次,提取時(shí)間5min條件下,觀察不同溶劑對(duì)CBD提取得率的影響。圖2-3所示,結(jié)果發(fā)現(xiàn):正己烷、乙酸乙酯、乙醇的提取效果略低于甲醇,綜合考慮色譜基線穩(wěn)定、試劑毒性影響、試劑成本、總提取效率和環(huán)境保護(hù)等因素,我們選擇甲醇作為CBD提取的最佳溶劑。圖2-3不同提取溶劑對(duì)CBD含量的影響Fig.2-3EffectsofdifferentsolventsonthecontentofCBD2.3.4提取時(shí)間對(duì)CBD得率的影響用甲醇作為提取溶劑,在料液比1∶35(g/mL)條件下提取2次,考察提取時(shí)間(3min、5min、10min、15min)對(duì)CBD含量的影響。由2-4可知,不同超聲時(shí)間對(duì)CBD含量的影響較大,超聲10min時(shí)CBD的提取效率最佳,含量最高。繼續(xù)延長超聲時(shí)間反而降低了CBD的含量。因此,超聲10min為CBD提取的最佳條件。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[6]天然植物中有效成分的提取、分離技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 周佳儒,李久明,徐寧,春英,敖亮亮. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(01)
[7]工業(yè)大麻葉中大麻二酚含量分析研究[J]. 高寶昌,孫宇峰,張旭,石雨,田媛,崔寶玉. 黑龍江科學(xué). 2018(01)
[8]亞臨界水萃取技術(shù)及其在有效成分提取和分析領(lǐng)域中的應(yīng)用[J]. 蔡錦源,王萌璇,唐念,許芬,韋坤華. 應(yīng)用化工. 2017(06)
[9]大麻化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 弓佩含,楊洋,劉玉婷,吳程彥,嚴(yán)銘銘,邵帥,徐東銘. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2017(13)
[10]大麻二酚對(duì)急性腦出血小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制[J]. 高兵兵,吳月奎,馬建華,易波,戴宜武. 山東醫(yī)藥. 2017(04)
碩士論文
[1]野菊花超臨界二氧化碳萃取物的抗炎活性及其機(jī)理研究[D]. 吳曉麗.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2014
本文編號(hào):3073526
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