本研究通過查閱相關(guān)數(shù)據(jù)庫中轉(zhuǎn)基因玉米品系中的常用遺傳轉(zhuǎn)化載體中含有的調(diào)控元件和標(biāo)記基因,并結(jié)合目前國內(nèi)外現(xiàn)有轉(zhuǎn)基因檢測標(biāo)準(zhǔn)方法,建立了基于P-CaMV 35S、T-NOS、Bar基因、Pat基因、Cp4-epsps基因、NPTⅡ基因、cry1A基因、P-Rice actin、phy結(jié)構(gòu)特異性片段等9種元件/基因?qū)崟r(shí)熒光PCR方法的玉米轉(zhuǎn)基因篩查策略,并對32種轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行篩查實(shí)驗(yàn)測試,結(jié)果表明本篩查策略可覆蓋30種獨(dú)立性狀轉(zhuǎn)化體。同時(shí)還構(gòu)建了包含玉米內(nèi)標(biāo)基因及9種目標(biāo)元件/基因序列的質(zhì)粒分子,經(jīng)過驗(yàn)證該質(zhì)粒分子具有良好的可替代性,可作為陽性對照與本檢測方法配套使用。 

【文章來源】：生物技術(shù)通報(bào). 2020,36(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

玉米轉(zhuǎn)基因成分篩查陽性質(zhì)粒pYMSC-1905圖譜

截止2019年11月,我國對植酸酶玉米BVLA430101發(fā)放了生產(chǎn)用安全證書,并且對20種國外玉米轉(zhuǎn)化體發(fā)放了進(jìn)口用作加工原料安全證書,其中包括本次實(shí)驗(yàn)未參與驗(yàn)證的Bt11 X GA21,這21種轉(zhuǎn)化體中除DAS-40278-9外均可以被本方法覆蓋。圖3 陽性質(zhì)粒分子實(shí)時(shí)熒光PCR驗(yàn)證信號

圖2 陽性質(zhì)粒分子3D-d PCR驗(yàn)證熒光信號在轉(zhuǎn)基因作物的研發(fā)過程中,為使外源基因適合在宿主植物中進(jìn)行表達(dá),經(jīng)常需要根據(jù)宿主密碼子的偏好對目標(biāo)元件的密碼子進(jìn)行修飾,從而造成相同名稱的基因不一定具有完全相同的核苷酸序列。因此,在設(shè)計(jì)檢測方法時(shí)必須考慮同名的基因元件其DNA序列是否有差異,檢測靶標(biāo)在不同轉(zhuǎn)化事件中是否一致,能否用同樣的引物進(jìn)行檢測。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3071046