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煙草谷草轉氨酶基因的克隆與酶學分析

發(fā)布時間:2021-03-05 18:59
  人體需要的重要維生素有很多種,維生素B6就是其中之一,它是吡啶一類的化合物,游離形式分別為:吡哆醇(Pyridoxine,PN)、吡哆胺(Pyridoxamine,PM)以及吡哆醛(Pyridoxal,PL),它們相對應的磷酸酯形式則分別為磷酸吡哆醇(Pyridoxine-5’-phosphate,PNP)、磷酸吡哆胺(Pyridoxamine-5’-phosphate,PMP)還有磷酸吡哆醛(Pyridoxal-5’-phosphate,PLP)。在VB6的六種不同形式中,PLP是它的主要輔酶形式,參加了催化涉及氨基酸的很多反應,在多種其他物質的合成、代謝過程中也發(fā)揮了重要作用。自然界中,維生素B6存在從頭合成途徑和代謝轉換途徑兩種代謝途徑。它們中代謝轉換途徑涉及到不同構型VB6之間的轉化;并且有很多酶參與其中的各種轉換反應,其中就包含了吡哆醛還原酶(PLR)、吡哆醇氧化酶(PNPO)、吡哆醛激酶(PLK)以及磷酸酶等。谷草轉氨酶(GOT)是存在于幾乎所有真核生物體內的一種胞內酶,是生物體內眾多轉氨酶中很重要的一個。目前已經有人研究谷草轉氨酶與維生素B6代謝的關系,證明在動物和微生物... 

【文章來源】:安徽農業(yè)大學安徽省

【文章頁數】:54 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

煙草谷草轉氨酶基因的克隆與酶學分析


維生素B6的六種不同形式

維生素B6,生物合成,磷酸,途徑


其中一條從頭合成途徑是與 PdxJ 和 PdxA 相關的 DXP 依賴途徑。PdxA 和 PdxJ催化 4-羥基磷酸-L-蘇氨酸(4PHT)和 5-磷酸-1-脫氧-D-木酮糖(DXP)合成 PNP[5],PNP又可以被氧化形成PLP[6], 之后在轉氨酶作用下 PLP 又生成 PMP[7]。關于PdxJ和PdxA相關的 DXP 依賴途徑在大腸桿菌中已經研究的很透徹。關于 VB6 生物合成的另外一條從頭合成途徑是 Pdx1 和 Pdx2 相關的 DXP 非依賴途徑(圖 1-2):谷氨酰胺(Glutamine)經過 Pdx2 催化生成氨(NH3)之后和 5-磷酸-核糖(Ribose-5-phosphate)[8][或者 5-磷酸-核酮糖(Ribulose-5-phosp-hate)與 3-磷酸甘油醛(Glyce-raldehyde-3-phosphat e)[或者磷酸二羥基丙酮(Dihy-droxyacetonephosph- ate)]經過 Pdx1 催化之后合成 PLP[9]。DXP 非依賴途徑最先是在酵母中發(fā)現的,在古細菌、部分真細菌中普遍存在[10]。

維生素B6,層析技術,醇基,氧化酶


圖 1-3 維生素 B6 的代謝轉換Fig. 1-3 metabolic conversion of vitamin B6PNP 和 PMP 上的醇基和氨基將會被 PNP 氧化酶(PNPO,Pyridoxine 5’-phoase,EC1.4.3.5)氧化成醛基形成 PLP。 Pogell 在 1958 年首次從兔的肝臟中出 PNPO,發(fā)現其能夠將 PMP 氧化生成 PLP[14]。1975 年,Kazarinoff 等[15膠過濾和離子交換層析技術,從兔肝臟中純化得到分子量大小為54kDa的P

【參考文獻】:
期刊論文
[1]采用高效液相色譜技術分析煙草體內的維生素B6化合物[J]. 曾海彬,張劍韻,黃龍全.  廣西植物. 2011(05)
[2]抗逆鍛煉與植物的抗逆性[J]. 耶興元,仝勝利,馬鋒旺.  信陽農業(yè)高等專科學校學報. 2005(02)
[3]植物轉氨酶(GOT和GPT)活度比色測定方法及其應用[J]. 吳良歡,蔣式洪,陶勤南.  土壤通報. 1998(03)



本文編號:3065697

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