小麥抗逆相關(guān)基因TaCIPK2、TaCIPK10及TaCIPK27功能分析
發(fā)布時間:2021-03-04 00:09
植物在整個生命周期中常常遭受干旱、鹽堿、低溫及紫外線照射等非生物逆境的影響,由于受到外界逆境環(huán)境的影響,植株在成長過程中受到一定程度的抑制,結(jié)果導(dǎo)致植物的產(chǎn)量和品質(zhì)降低。在響應(yīng)外界逆境信號中,作為第二信使的鈣離子發(fā)揮不可替代的作用。作為植物特有的鈣離子信號感受器之一,鈣調(diào)磷酸酶-B類似蛋白(CalcineurinB-like protein,CBL),在感受到特異的鈣信號后,CBL與細(xì)胞內(nèi)Ca2+結(jié)合,激活的CBL與其相互作用的蛋白激酶(CBL-interacting protein kinase,CIPK)互作,使CIPK蛋白活化,激活的CIPK可以磷酸化下游脅迫相關(guān)的靶分子,啟動相關(guān)的植物抗逆響應(yīng)。小麥?zhǔn)侵匾募Z食作物,我們前期通過對小麥基因組中CIPK基因家族系統(tǒng)分析,共鑒定79個CIPKs基因家族成員,在中國春小麥中分離出了 22個TaCIPK基因,并對部分成員的生物學(xué)功能開展了研究。本文重點對下麥CIPKs基因家族的三個成員TaCIPK2、TaaCIPK10和TaCIPK27的生物學(xué)功能開展了研究工作。主要研究內(nèi)容和研究結(jié)果如下:1)脅迫處理下的表達(dá)模式分析發(fā)現(xiàn),TaCIPK...
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:130 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
TaCIPK2亞細(xì)胞定位分析
具有潛在的功能。選。粗荦g長勢一致的煙草幼苗進(jìn)行控水(干旱)處理3周后,??發(fā)現(xiàn)賢生型和空載對照煙草株系大部分的葉片變得枯黃,雖然扣轉(zhuǎn)基因煙草??的葉片變得萎幕,但大多數(shù)的煙草葉片呈綠色,只有少部分變枯黃(圖3.7?A)。復(fù)??水一周后,野生型煙草和空載對照煙草葉片沒有伸展且大部分死亡,而0E1、OE2??和0E4萎慧的葉片伸展開來,大多數(shù)的過表達(dá)扣C/f。煙草正常成長。在干旱處理??下過表達(dá)raC/餅煙草和對照煙草的存活率分析表明,超表達(dá)扣C/餅:2陽性煙草的??存活率在70%左右,顯著離于WT和VC的煙草(圖3.7?B)。表明TaCIPK2在提高??煙草的抗旱性中發(fā)揮重要的作用。??(A)?WT?VC?OE1?OE2?OE4?巧)誦"?"畫…回?oe;回??-I?曲??bought?I?I??3weeks?I?説;??Recovery畫面騎巧巧E;?UM??1?week?olJBHILLL??圖3.7扔燈P肪過表達(dá)煙草和對照煙草在干旱作用下的^檢測??(A)對照株系(WT和VC)和扔C/PK2過表達(dá)煙草株系在未干旱處理、干旱3周后及復(fù)水1??周后的表型分析。(B)在干旱作用下,對照株系和過表達(dá)扔C7/X2煙草葉片存活率分析。圖中??統(tǒng)計結(jié)果為3次獨立重復(fù)試驗的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差
相同的表現(xiàn)。此外,我們測定了在干旱脅迫作用下,對照煙草和轉(zhuǎn)扣C/尸口基因陽??性煙草的生理指標(biāo)包括總抗氧化能力和哲自由基清除能力,結(jié)果指出,過表達(dá)??扔0巧[2煙草比WT和VC煙草有更高的抗氧化功能及姪自由基清除比率(圖3.8?B),??說明扣CZP口轉(zhuǎn)基因煙草的葉片中積累更少的過氧化氨和超氧陰離子,即扣C/尸。??轉(zhuǎn)基因煙草能夠有效網(wǎng)除細(xì)胞內(nèi)積累的過氧化氨和超氧陰離子,使植物細(xì)胞免受氧??化脅迫的損傷,因此增強(qiáng)煙草植株的抗旱性。??3.4.7?巧U過表達(dá)煙草干旱作用下的基因表達(dá)量的檢測??為了進(jìn)一步了解TaCIPK2在響應(yīng)干旱脅迫下的分子機(jī)制,我么檢測了脅迫相關(guān)??基因包括民OS清除相關(guān)基因(MC4J7),干旱應(yīng)答元件結(jié)合蛋白基因、??ABA信號通路相關(guān)基因(7VM公仍和和脅迫響應(yīng)相關(guān)的基因(M巧???和公)在正常環(huán)境和干旱脅迫處理下的表法變化。在正常生長環(huán)境下,除了??7V近基因的表達(dá)量在轉(zhuǎn)基因煙草中顯著增加外,其他被檢測的基因在所有煙草??的煙草株系中表達(dá)量沒有顯著差異(圖3.9)。在干旱脅迫下
本文編號:3062196
【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:130 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
TaCIPK2亞細(xì)胞定位分析
具有潛在的功能。選。粗荦g長勢一致的煙草幼苗進(jìn)行控水(干旱)處理3周后,??發(fā)現(xiàn)賢生型和空載對照煙草株系大部分的葉片變得枯黃,雖然扣轉(zhuǎn)基因煙草??的葉片變得萎幕,但大多數(shù)的煙草葉片呈綠色,只有少部分變枯黃(圖3.7?A)。復(fù)??水一周后,野生型煙草和空載對照煙草葉片沒有伸展且大部分死亡,而0E1、OE2??和0E4萎慧的葉片伸展開來,大多數(shù)的過表達(dá)扣C/f。煙草正常成長。在干旱處理??下過表達(dá)raC/餅煙草和對照煙草的存活率分析表明,超表達(dá)扣C/餅:2陽性煙草的??存活率在70%左右,顯著離于WT和VC的煙草(圖3.7?B)。表明TaCIPK2在提高??煙草的抗旱性中發(fā)揮重要的作用。??(A)?WT?VC?OE1?OE2?OE4?巧)誦"?"畫…回?oe;回??-I?曲??bought?I?I??3weeks?I?説;??Recovery畫面騎巧巧E;?UM??1?week?olJBHILLL??圖3.7扔燈P肪過表達(dá)煙草和對照煙草在干旱作用下的^檢測??(A)對照株系(WT和VC)和扔C/PK2過表達(dá)煙草株系在未干旱處理、干旱3周后及復(fù)水1??周后的表型分析。(B)在干旱作用下,對照株系和過表達(dá)扔C7/X2煙草葉片存活率分析。圖中??統(tǒng)計結(jié)果為3次獨立重復(fù)試驗的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差
相同的表現(xiàn)。此外,我們測定了在干旱脅迫作用下,對照煙草和轉(zhuǎn)扣C/尸口基因陽??性煙草的生理指標(biāo)包括總抗氧化能力和哲自由基清除能力,結(jié)果指出,過表達(dá)??扔0巧[2煙草比WT和VC煙草有更高的抗氧化功能及姪自由基清除比率(圖3.8?B),??說明扣CZP口轉(zhuǎn)基因煙草的葉片中積累更少的過氧化氨和超氧陰離子,即扣C/尸。??轉(zhuǎn)基因煙草能夠有效網(wǎng)除細(xì)胞內(nèi)積累的過氧化氨和超氧陰離子,使植物細(xì)胞免受氧??化脅迫的損傷,因此增強(qiáng)煙草植株的抗旱性。??3.4.7?巧U過表達(dá)煙草干旱作用下的基因表達(dá)量的檢測??為了進(jìn)一步了解TaCIPK2在響應(yīng)干旱脅迫下的分子機(jī)制,我么檢測了脅迫相關(guān)??基因包括民OS清除相關(guān)基因(MC4J7),干旱應(yīng)答元件結(jié)合蛋白基因、??ABA信號通路相關(guān)基因(7VM公仍和和脅迫響應(yīng)相關(guān)的基因(M巧???和公)在正常環(huán)境和干旱脅迫處理下的表法變化。在正常生長環(huán)境下,除了??7V近基因的表達(dá)量在轉(zhuǎn)基因煙草中顯著增加外,其他被檢測的基因在所有煙草??的煙草株系中表達(dá)量沒有顯著差異(圖3.9)。在干旱脅迫下
本文編號:3062196
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