水稻原位轉(zhuǎn)化引起的白化苗的特征特性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-02 00:28
水稻白化現(xiàn)象普遍存在于植物界中,其白化機(jī)理十分復(fù)雜。研究表明,水稻白化現(xiàn)象受光照、溫度和礦質(zhì)元素等環(huán)境因素的影響,同時(shí)也與遺傳突變、核-質(zhì)互作以及葉綠體、葉綠素合成相關(guān)基因的表達(dá)有關(guān)。近年來,對(duì)水稻白化機(jī)理的研究越來越深入。水稻白化突變體材料的來源主要有自然突變、化學(xué)誘變劑甲磺酸乙酯(Ethylmethanesulfonate,EMS)誘變、60CO輻照等。然而,目前以農(nóng)桿菌侵染過程引起的白化苗為研究材料的報(bào)道極少。本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻原位轉(zhuǎn)化技術(shù)獲取的秈稻品種“桂禾豐”白化苗及其正常幼苗為樣品,分別對(duì)它們的形態(tài)特征、超微結(jié)構(gòu)、生理指標(biāo)、葉綠素含量進(jìn)行分析;然后通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù),對(duì)參與葉綠體合成、光和色素合成及光合作用等相關(guān)代謝途徑的差異表達(dá)基因作了探究。初步研究結(jié)果如下:1.農(nóng)桿菌侵染水稻種子原位轉(zhuǎn)化過程中,出現(xiàn)的白化苗率大于69%。2.對(duì)水稻白化苗和正常苗的生長(zhǎng)狀況進(jìn)行分析,結(jié)果表明,水稻白化苗生長(zhǎng)速度慢、根系不發(fā)達(dá)。3.通過對(duì)水稻白化葉片和正常葉片超微結(jié)構(gòu)的觀察表明,水稻葉片白化與葉綠體缺失有關(guān)。4.分別對(duì)水稻葉片和根的抗氧化酶活性及MDA含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),抗氧化酶...
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖3-4水稻白化苗(BH)與正常苗(CK)根部的差異??Fig.3-4?Differences?in?roots?between?albino?(BH)?and?normal?(CK)?rice?seedlings??
3.3水稻白化葉片的超微結(jié)構(gòu)觀察??通過對(duì)水稻葉片透射電鏡超微結(jié)構(gòu)的觀察,發(fā)現(xiàn)水稻白化葉片中部分細(xì)胞出現(xiàn)空??泡,部分細(xì)胞有大量線粒體,高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),但未發(fā)現(xiàn)葉綠體(圖3-5?A,B);正??常水稻葉片細(xì)胞內(nèi)存在液泡、線粒體和葉綠體,并且葉綠體形態(tài)完整(圖3-5?C,D)。??這一結(jié)果觀察表明,該試驗(yàn)中造成水稻白化苗的原因是水稻葉片葉綠體生物合成過程受??阻。在同等放大倍數(shù)視野下,白化葉片的細(xì)胞數(shù)目比正常葉片細(xì)胞數(shù)目多,也就是說白??化葉片的細(xì)胞要小于正常葉片細(xì)胞。??參*?1??'■ii-?s?r—.—????一心-入。浚保?[?????71.?.?jn?\?|??1.?...?—1?/??i?13?..?——I?4?????.?I??ltlr?,i?t???????'?,?<?\?*?-?.?■?.?.?”?I__?????T'.'.??.?.??I.???J..-3?.??—?f\?l-?I?">?,-<i?—?l-.—??圖3-5水稻白化葉片(BH)與正常葉片(CK)葉綠體結(jié)構(gòu)的透射電鏡??Fig.3-5?TEM?of?chloroplast?structure?in?albino?and?normal?rice?leaves??注:A,水稻白化葉片(10000X):?B,水稻白化葉片(30000X);?C,水稻正常葉片(10000X);?D,水??稻正常葉片(30000X);?Mt
?chi?b?Car??圖3-7水稻葉片色素含量??Fig.3-7?Pigment?content?in?rice?leaves??3.5水稻葉片基因組DNA和RNA的質(zhì)量檢測(cè)??(1)取2|iLDNA用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)(圖3-8),所得結(jié)果表明DNA條??帶清晰,無降解現(xiàn)象,經(jīng)紫外核酸分析儀(Agilent?2100)測(cè)定DNA的0D湖/OD280為??2.14,可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);??M?1?:?M?bp??MV15000??圖3-8水稻總DNA檢測(cè)??Fig.3-8?Detection?of?DNA?in?rice??注:泳道?1-2,DNA;泳道?M,?BM15000DNAmarker??Notes:?Lane?1-2,?DNA;?Lane?M,?BM15000?DNA?marker??30??
本文編號(hào):3058249
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖3-4水稻白化苗(BH)與正常苗(CK)根部的差異??Fig.3-4?Differences?in?roots?between?albino?(BH)?and?normal?(CK)?rice?seedlings??
3.3水稻白化葉片的超微結(jié)構(gòu)觀察??通過對(duì)水稻葉片透射電鏡超微結(jié)構(gòu)的觀察,發(fā)現(xiàn)水稻白化葉片中部分細(xì)胞出現(xiàn)空??泡,部分細(xì)胞有大量線粒體,高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),但未發(fā)現(xiàn)葉綠體(圖3-5?A,B);正??常水稻葉片細(xì)胞內(nèi)存在液泡、線粒體和葉綠體,并且葉綠體形態(tài)完整(圖3-5?C,D)。??這一結(jié)果觀察表明,該試驗(yàn)中造成水稻白化苗的原因是水稻葉片葉綠體生物合成過程受??阻。在同等放大倍數(shù)視野下,白化葉片的細(xì)胞數(shù)目比正常葉片細(xì)胞數(shù)目多,也就是說白??化葉片的細(xì)胞要小于正常葉片細(xì)胞。??參*?1??'■ii-?s?r—.—????一心-入。浚保?[?????71.?.?jn?\?|??1.?...?—1?/??i?13?..?——I?4?????.?I??ltlr?,i?t???????'?,?<?\?*?-?.?■?.?.?”?I__?????T'.'.??.?.??I.???J..-3?.??—?f\?l-?I?">?,-<i?—?l-.—??圖3-5水稻白化葉片(BH)與正常葉片(CK)葉綠體結(jié)構(gòu)的透射電鏡??Fig.3-5?TEM?of?chloroplast?structure?in?albino?and?normal?rice?leaves??注:A,水稻白化葉片(10000X):?B,水稻白化葉片(30000X);?C,水稻正常葉片(10000X);?D,水??稻正常葉片(30000X);?Mt
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本文編號(hào):3058249
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