甘蔗原生質(zhì)體的融合及雜核細胞再生條件的優(yōu)化
發(fā)布時間:2021-02-22 00:44
蔗糖是我國食糖的主要來源。全國一半以上的糖產(chǎn)量來自于廣西,廣西甘蔗種植面積108.15萬公頃,占全國60%。寒害是是甘蔗面臨的災害之一,甘蔗受凍以后,出現(xiàn)大面積甘蔗葉片干枯、生長點死一亡、蔗莖呈水煮狀、側(cè)芽嚴重損傷、蔗糖分轉(zhuǎn)化、蔗汁純度下降,產(chǎn)糖率下降,品質(zhì)變劣,影響蔗糖產(chǎn)量,造成很大的經(jīng)濟損失。新臺糖22號作為廣西甘蔗的當家品種,具有高萌芽率、高分蘗率、高產(chǎn)高糖、耐旱等很好的農(nóng)藝性狀,但這個品種耐寒性差。桂糖28號具有高糖耐寒性等特性,可以在育種上作為一個很好的基因庫加以利用,用新臺糖22號和桂糖28號來進行細胞融合育種,把它們的優(yōu)良基因進行重組,可能會得出的優(yōu)良農(nóng)藝性狀和抗寒性更強的雜交后代。與其他育種方式相比,細胞融合具有不受種屬的局限,克服性細胞的不融合,可以轉(zhuǎn)移大量的基因,還可獲得多個數(shù)量遺傳性狀的表達,可同時轉(zhuǎn)錄細胞質(zhì)和細胞核基因等優(yōu)點。但在甘蔗育種上的應(yīng)用尚不多見。本文研究了(1)甘蔗原生質(zhì)體的凍存復蘇條件的優(yōu)化(2)互補抑制劑碘乙酰胺(IOA)和羅丹明6G(R-6G)的濃度的優(yōu)化(3)PEG融合和電融合條件的優(yōu)化(4)融合后原生質(zhì)體培養(yǎng)條件的優(yōu)化。研究結(jié)果表明:1.不同...
【文章來源】:廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2甘蔗不同部位凍存后活力??
protoplast?cryopreserved?recovery?Arrows?point?to?the?dead?cells?(Bar=?10?(im)??3.1.1.3不同凍存溫度對甘蔗原生質(zhì)體活力的影響??由圖3可看出,凍存7?d后復蘇,不同凍存溫度(4?°C、-80?°C、-196?°C)下原生??質(zhì)體活力差異不顯著;凍存30d和60d后復蘇,-80?°C和-196?°C的原生質(zhì)體活力差異??不顯著,但顯著高于4?°C處理,分別高40%和60%,達到顯著性差異;凍存90?d后復??蘇,-196?°C原生質(zhì)體活力最高,4?°C處理最低,-196?°C中復蘇的原生質(zhì)體活力較-??80?°C處理高22.81%,較4?°C處理高7L37%,差異顯著。處理時間對在液氮-196?°C中??凍存的原生質(zhì)體活力影響不顯著。??21??
于熒光顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)細胞周圍均無藍色熒光,說明培養(yǎng)1?d沒有形成細胞壁(圖??4A),培養(yǎng)2-3?d之后,在熒光顯微鏡下可看到由于VBL和細胞壁的纖維素結(jié)合而??在細胞周圍開始發(fā)出淡藍色的熒光(圖4?B),培養(yǎng)5-6?d左右,在熒光顯微鏡下觀??察到整個細胞邊緣藍色熒光均勻、強烈且明顯(圖4?C),表明細胞壁在逐漸形成,??5?d左右基本形成完整。??22??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]小鼠精子體外培養(yǎng)過程中Ca2+對微管蛋白乙;挠绊慬J]. 甄林青,楊強震,王立蕊,徐芳,張宇靜,謝碩,馮健,李新紅. 上海交通大學學報(農(nóng)業(yè)科學版). 2016(02)
[2]基于VBL增白劑細胞染色的水稻原生質(zhì)體細胞壁變化檢測[J]. 柳琳,陳越,陳玲,李維蛟,程在全. 貴州農(nóng)業(yè)科學. 2014(11)
[3]荔枝TPEC與龍眼EC的電融合參數(shù)研究[J]. 黃淺,賴鐘雄,賴呈純,顧金玲,吳金壽. 福建農(nóng)林大學學報(自然科學版). 2014(04)
[4]苜蓿原生質(zhì)體電融合適宜條件的篩選[J]. 張凌云,師尚禮. 草地學報. 2013(04)
[5]碘乙酰胺和羅丹明對苜蓿原生質(zhì)體失活效果的效應(yīng)[J]. 李玉珠,師尚禮,陶茸,張凌云. 草原與草坪. 2012(03)
[6]海帶染色體的DAPI染色及核型初步分析[J]. 劉宇,畢燕會,周志剛. 水產(chǎn)學報. 2012(01)
[7]草地早熟禾原生質(zhì)體培養(yǎng)與融合[J]. 趙小強,馬暉玲,周萬海,林棟. 核農(nóng)學報. 2010(04)
[8]棉花原生質(zhì)體“供-受體”雙失活融合產(chǎn)生種間雜種植株及其鑒定[J]. 付莉莉,楊細燕,張獻龍,王志偉,馮常輝,劉傳祥,江培勇,張金龍. 科學通報. 2009(15)
[9]割手密莖尖細胞有絲分裂過程中微管骨架的變化[J]. 李志剛,李素麗,張榮華,楊麗濤,李楊瑞. 廣西植物. 2009(04)
[10]蘆薈原生質(zhì)體的電融合研究[J]. 邢朝云,王劍文. 抗感染藥學. 2009(02)
博士論文
[1]苜蓿與百脈根原生質(zhì)體培養(yǎng)及體細胞雜交的研究[D]. 李玉珠.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2012
[2]棉花原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交研究[D]. 汪靜兒.浙江大學 2007
[3]柑橘原生質(zhì)體融合及體細胞雜種核質(zhì)遺傳研究[D]. 徐小勇.華中農(nóng)業(yè)大學 2006
[4]棉花原生質(zhì)體培養(yǎng)和原生質(zhì)體對稱融合研究[D]. 孫玉強.華中農(nóng)業(yè)大學 2005
[5]三種豆科牧草的原生質(zhì)體培養(yǎng)及體細胞雜交[D]. 金紅.西北大學 2002
碩士論文
[1]楊樹莖尖小RNA組學和種子萌發(fā)技術(shù)研究[D]. 陸維超.揚州大學 2017
[2]甘蔗離體培養(yǎng)的胚性細胞團誘導與分化研究[D]. 楊燕妮.廣西大學 2011
[3]二喬刺槐愈傷組織超低溫保存及植株再生[D]. 程斐.河南農(nóng)業(yè)大學 2009
[4]不同分生組織類型蔬菜根及邊緣細胞對鎘的響應(yīng)[D]. 張賢仕.四川農(nóng)業(yè)大學 2009
[5]影響甘蔗原生質(zhì)體分離、培養(yǎng)因素的研究[D]. 洪翠.福建農(nóng)林大學 2000
本文編號:3045170
【文章來源】:廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2甘蔗不同部位凍存后活力??
protoplast?cryopreserved?recovery?Arrows?point?to?the?dead?cells?(Bar=?10?(im)??3.1.1.3不同凍存溫度對甘蔗原生質(zhì)體活力的影響??由圖3可看出,凍存7?d后復蘇,不同凍存溫度(4?°C、-80?°C、-196?°C)下原生??質(zhì)體活力差異不顯著;凍存30d和60d后復蘇,-80?°C和-196?°C的原生質(zhì)體活力差異??不顯著,但顯著高于4?°C處理,分別高40%和60%,達到顯著性差異;凍存90?d后復??蘇,-196?°C原生質(zhì)體活力最高,4?°C處理最低,-196?°C中復蘇的原生質(zhì)體活力較-??80?°C處理高22.81%,較4?°C處理高7L37%,差異顯著。處理時間對在液氮-196?°C中??凍存的原生質(zhì)體活力影響不顯著。??21??
于熒光顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)細胞周圍均無藍色熒光,說明培養(yǎng)1?d沒有形成細胞壁(圖??4A),培養(yǎng)2-3?d之后,在熒光顯微鏡下可看到由于VBL和細胞壁的纖維素結(jié)合而??在細胞周圍開始發(fā)出淡藍色的熒光(圖4?B),培養(yǎng)5-6?d左右,在熒光顯微鏡下觀??察到整個細胞邊緣藍色熒光均勻、強烈且明顯(圖4?C),表明細胞壁在逐漸形成,??5?d左右基本形成完整。??22??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]小鼠精子體外培養(yǎng)過程中Ca2+對微管蛋白乙;挠绊慬J]. 甄林青,楊強震,王立蕊,徐芳,張宇靜,謝碩,馮健,李新紅. 上海交通大學學報(農(nóng)業(yè)科學版). 2016(02)
[2]基于VBL增白劑細胞染色的水稻原生質(zhì)體細胞壁變化檢測[J]. 柳琳,陳越,陳玲,李維蛟,程在全. 貴州農(nóng)業(yè)科學. 2014(11)
[3]荔枝TPEC與龍眼EC的電融合參數(shù)研究[J]. 黃淺,賴鐘雄,賴呈純,顧金玲,吳金壽. 福建農(nóng)林大學學報(自然科學版). 2014(04)
[4]苜蓿原生質(zhì)體電融合適宜條件的篩選[J]. 張凌云,師尚禮. 草地學報. 2013(04)
[5]碘乙酰胺和羅丹明對苜蓿原生質(zhì)體失活效果的效應(yīng)[J]. 李玉珠,師尚禮,陶茸,張凌云. 草原與草坪. 2012(03)
[6]海帶染色體的DAPI染色及核型初步分析[J]. 劉宇,畢燕會,周志剛. 水產(chǎn)學報. 2012(01)
[7]草地早熟禾原生質(zhì)體培養(yǎng)與融合[J]. 趙小強,馬暉玲,周萬海,林棟. 核農(nóng)學報. 2010(04)
[8]棉花原生質(zhì)體“供-受體”雙失活融合產(chǎn)生種間雜種植株及其鑒定[J]. 付莉莉,楊細燕,張獻龍,王志偉,馮常輝,劉傳祥,江培勇,張金龍. 科學通報. 2009(15)
[9]割手密莖尖細胞有絲分裂過程中微管骨架的變化[J]. 李志剛,李素麗,張榮華,楊麗濤,李楊瑞. 廣西植物. 2009(04)
[10]蘆薈原生質(zhì)體的電融合研究[J]. 邢朝云,王劍文. 抗感染藥學. 2009(02)
博士論文
[1]苜蓿與百脈根原生質(zhì)體培養(yǎng)及體細胞雜交的研究[D]. 李玉珠.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2012
[2]棉花原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交研究[D]. 汪靜兒.浙江大學 2007
[3]柑橘原生質(zhì)體融合及體細胞雜種核質(zhì)遺傳研究[D]. 徐小勇.華中農(nóng)業(yè)大學 2006
[4]棉花原生質(zhì)體培養(yǎng)和原生質(zhì)體對稱融合研究[D]. 孫玉強.華中農(nóng)業(yè)大學 2005
[5]三種豆科牧草的原生質(zhì)體培養(yǎng)及體細胞雜交[D]. 金紅.西北大學 2002
碩士論文
[1]楊樹莖尖小RNA組學和種子萌發(fā)技術(shù)研究[D]. 陸維超.揚州大學 2017
[2]甘蔗離體培養(yǎng)的胚性細胞團誘導與分化研究[D]. 楊燕妮.廣西大學 2011
[3]二喬刺槐愈傷組織超低溫保存及植株再生[D]. 程斐.河南農(nóng)業(yè)大學 2009
[4]不同分生組織類型蔬菜根及邊緣細胞對鎘的響應(yīng)[D]. 張賢仕.四川農(nóng)業(yè)大學 2009
[5]影響甘蔗原生質(zhì)體分離、培養(yǎng)因素的研究[D]. 洪翠.福建農(nóng)林大學 2000
本文編號:3045170
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