轉(zhuǎn)基因糧食作物的食用安全性問題一直是公眾爭議的熱點(diǎn),也是轉(zhuǎn)基因糧食作物迄今為止在全國乃至全球范圍內(nèi)尚未能得以商業(yè)化或廣泛商業(yè)化種植的重要原因。2012-2016年期間,本課題組利用水稻綠色組織特異性表達(dá)啟動(dòng)子rbcS、位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)Cre/loxP、核定位信號(hào)krp2和終止子nosT等組件,致力開發(fā)了一種“基因開關(guān)”系統(tǒng),使其控制的外源基因只在除種子外的綠色組織部位精確表達(dá),為轉(zhuǎn)基因作物食用安全性問題提供了全新和可行的解決途徑。為了成功將“基因開關(guān)”系統(tǒng)由基礎(chǔ)研究推向農(nóng)業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用,本文以“基因開關(guān)”系統(tǒng)為核心,圍繞胚乳零表達(dá)型兩系抗蟲及抗除草劑雜交水稻親本種質(zhì)創(chuàng)造及其組合選育工作展開研究,所獲得的主要研究結(jié)果如下:一、“基因開關(guān)”系統(tǒng)在兩系雜交水稻上的工作狀況被證實(shí)是可行的:選用實(shí)驗(yàn)室已有的基因開關(guān)轉(zhuǎn)化的兩系親本材料配制了 5個(gè)不同的抗蟲雜交組合201S-K1/ZR6-LB2、201S-K4/ZR6-LB2、201S-K17/ZR6-LB2、201S-K17/551-LB6和604S-K5/ZR6-LB2,并分別于.水稻分蘗、抽穗和灌漿三個(gè)時(shí)期檢測其葉片、莖稈以及灌漿完熟期糙米和精... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１轉(zhuǎn)基因雜交組合葉片及莖稈中ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ蛋白含量測定

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文?基因開關(guān)系統(tǒng)在兩系抗蟲雜交稻中的效果驗(yàn)證??各雜交組合糙米及精米中蛋白含量測定結(jié)果如圖２．２所示，在陽性對照浙優(yōu)??３號(hào)的糙米及精米中均能檢測到相當(dāng)高量的ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ蛋白，分別為４５０ｎｇ／ｇ??和２０４ｎｇ／ｇ，而在所有轉(zhuǎn)基因雜交組合的糙米及精米中則都檢測不到ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ??蛋白的表達(dá)，其檢測值經(jīng)ＳＰＳＳ單因素ＡＮＯＶＡ的事后多重比較Ｄｕｎｎｅｔｔ－ｔ測驗(yàn)??顯示與陰性對照無顯著差異（表２．１）。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明“基因開關(guān)”系統(tǒng)在??兩系抗蟲雜交組合中工作正常，像所預(yù)期的一樣，抗蟲蛋白只在除種子外的綠色??組織表達(dá)，在種子部位完全不表迗。??５００?１????丁?Ｂｒｃｙｗｎｉｉｃｅ??ｒ￣￣１?Ｗｈｉｔｅ?ｒｉｃｅ??＾?４００?－??ｔ??／－ｉ?ｓ?ｉ??■ＳＩ??Ｉ＜?３００?？?Ｉ??ｉｉ??２００?－?Ｐｉ??＜?－?Ｉｊ??Ｉ??°?ｉ?Ｉ??ｆ?１００?－?ｊ??〇?￣￣１?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ??Ｚ?Ｚ?＾?／??圖２．２轉(zhuǎn)基因雜交組合糙米及精米中ＣｒｙｌＡｂ／ｌＡｃ蛋白含量測定。??ＮＴ：非轉(zhuǎn)基因雜交組合陰性對照。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｔｈｅ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?Ｃｒｙｌ?Ａｂ／１?Ａｃ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｔ

?基因開關(guān)系統(tǒng)在兩系抗蟲雜交稻中的效果驗(yàn)證??亡率從５５％－６８．３３％不等，抗蟲性比陽性對照浙優(yōu)３號(hào)要差一些，但極顯著優(yōu)于??非轉(zhuǎn)基因的陰性對照（圖２．３ａ）。莖稈室內(nèi)接蟲二化螟處理的典型表現(xiàn)如圖２．３ｂ??所示。陽性對照浙優(yōu)３號(hào)及５個(gè)轉(zhuǎn)基因雜交組合和非轉(zhuǎn)基因陰性對照中，均有一??定數(shù)量的活蟲，且存活活蟲的體態(tài)、發(fā)育程度及行動(dòng)力呈現(xiàn)差異。所有的轉(zhuǎn)基因??雜交組合中的活蟲與陰性對照中的活蟲相比較，均表現(xiàn)出發(fā)育滯緩、體形偏小和??活動(dòng)力弱，其對莖稈的危害也極��；而在５個(gè)轉(zhuǎn)基因雜交組合中，組合??２０１Ｓ－Ｋ１／ＺＲ６－ＬＢ２及２０１Ｓ－Ｋ４／ＺＲ６－ＬＢ２中存活的活蟲的體型較大，其余３個(gè)組??合?２０１Ｓ－Ｋ１７／ＺＲ６－ＬＢ２、２０１Ｓ－Ｋ１７／５５１－ＬＢ６?和?６０４Ｓ－Ｋ４／ＺＲ６－ＬＢ２?中存活的活蟲看??起來與一齡幼蟲相近；并且，我們對莖稈中的存活的二化螟進(jìn)行了稱重，結(jié)果發(fā)??現(xiàn)，所有雜交組合中存活的幼蟲的重量都極顯著低于陰性對照，且其體重大小規(guī)??律

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3011638