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擬南芥/大豆錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)及細(xì)胞周期對(duì)鎘脅迫的響應(yīng)機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-01-21 09:43
  鎘(cadmium,Cd)是一種廣泛應(yīng)用于工業(yè)和普遍存在于自然界(水、空氣、土壤)的重金屬元素,也是食品污染物和致癌物之一,Cd污染不僅會(huì)影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量,還可通過(guò)食物鏈或直接暴露進(jìn)入機(jī)體,對(duì)機(jī)體的健康造成危害甚至誘發(fā)癌癥。目前,多數(shù)Cd毒理研究集中于Cd對(duì)生物體損傷方式及機(jī)制上,其中著重關(guān)注Cd誘導(dǎo)的DNA損傷及細(xì)胞周期阻滯。但是,在DNA損傷修復(fù)(DNA damage repair,DDR)和DNA錯(cuò)配修復(fù)(DNA mismatch repair,MMR)對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)機(jī)制上卻研究較少。而且,DNA MMR系統(tǒng)中MLH1、MSH2和MSH6是否參與Cd脅迫下DNA損傷誘導(dǎo)的G2期阻滯調(diào)控,目前在國(guó)內(nèi)外還沒有相關(guān)的報(bào)道。因此,本研究選取擬南芥(Arabidopsis thaliana)和大豆(Glycine max)為供試植物,通過(guò)對(duì)Cd脅迫下擬南芥DNA損傷、細(xì)胞周期阻滯及相關(guān)基因表達(dá)的變化的研究,明確植物MMR系統(tǒng)對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)機(jī)制。在大豆中利用同源基因進(jìn)行MMR系統(tǒng)對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)機(jī)制的對(duì)比研究,發(fā)現(xiàn)大豆同樣存在該毒理機(jī)制,利用此差異可以為Cd敏感型和抗性大豆的品種... 

【文章來(lái)源】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】:106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

擬南芥/大豆錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)及細(xì)胞周期對(duì)鎘脅迫的響應(yīng)機(jī)制


擬南芥種子經(jīng)Cd處理5d后幼苗生長(zhǎng)情況,Cd的濃度分別為0(A)、1.25(B)、2.5(C)和4.0mg·L-1(D)

細(xì)胞分布,根尖細(xì)胞,擬南芥,顯著性差異


野生型(WT)經(jīng) Cd(0、1.25、2.5 和 4.0 mg·L-1)處理 5d 后幼苗根尖細(xì)胞 期中細(xì)胞分布比例,*表示與對(duì)照相比達(dá)到顯著性差異(P< 0.05)ercent distribution of cells in G0/G1,S and G2/M phases in root tips of Arabidop and 4.0 mg·L-1)Significantly statistical difference from the control,respective 脅迫對(duì)擬南芥 3 個(gè)突變體 mlh1、msh2 和 msh6-deficient 根尖細(xì)胞一步研究mlh1、msh2 和msh6基因是哪個(gè)基因參與了Cd誘導(dǎo)細(xì)胞控,我們采用 T-DNA 插入敲除 mlh1、msh2 和 msh6 基因。如圖 WT 對(duì)照相比 T-DNA 插入敲除突變體在 mRNA 水平相對(duì)表達(dá)量MSH6 基因的表達(dá)量顯著性降低,且達(dá)到了極顯著性差異(P<0.01示,A-D 分別是 WT、mlh1-、msh2 和 msh6-deficient 在倍性水平量分布比例,研究表明,擬南芥 mlh1-deficient 根尖細(xì)胞 2C、4C核 DNA 含量分布的變化趨勢(shì)與 WT 變化相似,在 2C 細(xì)胞核 DN增加呈遞減變化,4C 細(xì)胞核 DNA 含量呈遞增變化,與對(duì)照相比 含量在 2.5 mg·L-1達(dá)到顯著性差異(P< 0.05),4.0 mg·L-1達(dá)到極顯 8C+16C 沒有顯著性變化;如圖 3(B)所示,與 WT 相比,m

細(xì)胞分布,流式細(xì)胞術(shù),擬南芥,根尖細(xì)胞


流式細(xì)胞術(shù)對(duì) Cd 處理 5d 后的擬南芥 WT (A),mlh1 (B),msh2 (C) 和 msh6 (D 含量的分析。與對(duì)照相比 2C,4C 和 8C+16C 中細(xì)胞分布比例,數(shù)值為三次重復(fù)在 A-D 中 *表示與對(duì)照比達(dá)到顯著性差異(P < 0.05),在 C-D 中 # 表示與 WT 對(duì)差異(P < 0.05)M analysis on the nuclear DNA contents of WT (A), mlh1 (B), msh2 (C) and msis roots exposed to 0-4.0 mg·L-1Cd for 5 d. The percent distribution of cells in 2 was calculated and compared with the control. Each point represents the mean ± SDent experiments. *Significantly different from the control in A-D, respectively (P < 0ntly different from the WT under the corresponding Cd stress in C-D (P < 0.05).

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本文編號(hào):2990927

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