甘蔗是世界上最重要的農(nóng)作物之一,生產(chǎn)約世界70%的糖。割手密被認(rèn)為是現(xiàn)代栽培甘蔗的抗逆性、適應(yīng)性基因的重要來(lái)源。割手密染色體數(shù)目眾多（2n = 40-128）,且染色體較小,形態(tài)相似。因此,根據(jù)傳統(tǒng)的細(xì)胞遺傳學(xué)方法來(lái)區(qū)分不同的染色體是非常困難的,這阻礙了割手密在細(xì)胞學(xué)方面研究工作的開(kāi)展。本研究主要是利用甘蔗與高粱的良好共線性,借助比較基因組學(xué)的手段,篩選割手密單低拷貝序列,開(kāi)發(fā)割手密染色體特異的細(xì)胞學(xué)標(biāo)記。主要研究結(jié)果如下:（1）通過(guò)比較基因?qū)W手段,將割手密單倍體材料AP85-441（2n =4x = 32）的BAC文庫(kù)序列與高粱基因組序列進(jìn)行比對(duì),共獲得了164個(gè)低拷貝的BAC序列,這些序列均勻地分布在高粱10條染色體的長(zhǎng)臂和短臂上。采用PCR方法對(duì)所構(gòu)建的兩維BAC混合池進(jìn)行篩選,準(zhǔn)確篩選到84個(gè)所需的陽(yáng)性克隆。（2）將所篩選到的84個(gè)陽(yáng)性克隆的DNA標(biāo)記為探針,進(jìn)行BAC-FISH分析,共鑒定了 42個(gè)探針可在割手密AP85-441染色體上獲得特異信號(hào),信號(hào)數(shù)從1到4不等。42個(gè)特異探針,高粱的2號(hào)、5號(hào)、9號(hào)和10號(hào)染色體各有2個(gè),4號(hào)和8號(hào)染色體各有4個(gè),1號(hào)染色體有5個(gè),7... 

【文章來(lái)源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?ＡＰ８５－４４１?ＢＡＣ文庫(kù)的１６４個(gè)單低拷貝序列在高粱１－１０號(hào)染色體的分布情況

１?ＯＯｂｐ?二Ｉ??圖２－３?ＰＣＲ篩選文庫(kù)的引物特異性驗(yàn)證（部分?jǐn)?shù)據(jù)）。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?Ｔｈｅ?ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｉｍｅｒ?ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ?ｆｏｒ?ＰＣＲ?ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｔｈｅ?ｌｉｂｒａｒｙ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｄａｔａ）．??注：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；２１－３５?代表相應(yīng)的?ＢＡＣ?編號(hào)??Ｎｏｔｅ：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；?２１－３５?ｔｈｅ?ＢＡＣ－?ｎｕｍｂｅｒ．??＇＜０ｌ：）＾＾ＰＢＫ３ＨＩＩ＾３ＨＳ９［＾３Ｖｒ９ｗ�。蓿校梗拢遥�?！，＂＇：，ｈ：＞￣，Ｃ３??ｆ｛?；：ｂ?－＾－＾Ｓ?—?？＇?」１?：?ｙ＇．？’Ｋ；ｉ??ｌＯＯｂｐ?－ｉ＊ｎ－＂?；／?＾?—??圖２－４?ＰＣＲ篩選ｓｕｐｅｒ－ｐｏｏｌ混合池，陽(yáng)性板號(hào)的確定（部分?jǐn)?shù)據(jù)）。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?ＰＣＲ?ｓｃｒｅｅｎ?ｔｈｅ?ｓｕｐｅｒ－ｐｏｏｌｓ，?ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ?ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｐｌａｔｅ?ｎｕｍｂｅｒ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｄａｔａ）．??注：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；?０代表以割手密基因組為模板的陽(yáng)性對(duì)照；５－１２表示３８４??孔板板號(hào)；紅色箭頭表示無(wú)陽(yáng)性條帶，綠色箭頭表示多條陽(yáng)性條帶。??Ｎｏｔｅ：?Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ

??圖２－４?ＰＣＲ篩選ｓｕｐｅｒ－ｐｏｏｌ混合池，陽(yáng)性板號(hào)的確定（部分?jǐn)?shù)據(jù)）。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?ＰＣＲ?ｓｃｒｅｅｎ?ｔｈｅ?ｓｕｐｅｒ－ｐｏｏｌｓ，?ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ?ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｐｌａｔｅ?ｎｕｍｂｅｒ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｄａｔａ）．??注：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；?０代表以割手密基因組為模板的陽(yáng)性對(duì)照；５－１２表示３８４??孔板板號(hào)；紅色箭頭表示無(wú)陽(yáng)性條帶，綠色箭頭表示多條陽(yáng)性條帶。??Ｎｏｔｅ：?Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；?０，?ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｔｅｍｐｌａｔｅ?ｆｒｏｍ?Ｓ．ｓｐｏｎｔｃｍｅｕｍ??ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ；?５－１２，?ｔｈｅ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?３８４－ｗｅｌｌ?ｐｌａｔｅ；?ｔｈｅ?ｒｅｄ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｎｏｎ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｂａｎｄ，?ｔｈｅ?ｇｒｅｅｎ??ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｍｏｒｅ?ｔｈａｎ?ｏｎｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｂａｎｄ．??２９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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