發(fā)布時間：2021-01-14 16:01

　　甘蔗是世界上最重要的農(nóng)作物之一,生產(chǎn)約世界70%的糖。割手密被認為是現(xiàn)代栽培甘蔗的抗逆性、適應性基因的重要來源。割手密染色體數(shù)目眾多（2n = 40-128）,且染色體較小,形態(tài)相似。因此,根據(jù)傳統(tǒng)的細胞遺傳學方法來區(qū)分不同的染色體是非常困難的,這阻礙了割手密在細胞學方面研究工作的開展。本研究主要是利用甘蔗與高粱的良好共線性,借助比較基因組學的手段,篩選割手密單低拷貝序列,開發(fā)割手密染色體特異的細胞學標記。主要研究結(jié)果如下:（1）通過比較基因?qū)W手段,將割手密單倍體材料AP85-441（2n =4x = 32）的BAC文庫序列與高粱基因組序列進行比對,共獲得了164個低拷貝的BAC序列,這些序列均勻地分布在高粱10條染色體的長臂和短臂上。采用PCR方法對所構(gòu)建的兩維BAC混合池進行篩選,準確篩選到84個所需的陽性克隆。（2）將所篩選到的84個陽性克隆的DNA標記為探針,進行BAC-FISH分析,共鑒定了 42個探針可在割手密AP85-441染色體上獲得特異信號,信號數(shù)從1到4不等。42個特異探針,高粱的2號、5號、9號和10號染色體各有2個,4號和8號染色體各有4個,1號染色體有5個,7... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學福建省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?ＡＰ８５－４４１?ＢＡＣ文庫的１６４個單低拷貝序列在高粱１－１０號染色體的分布情況

１?ＯＯｂｐ?二Ｉ??圖２－３?ＰＣＲ篩選文庫的引物特異性驗證（部分數(shù)據(jù)）。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?Ｔｈｅ?ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｉｍｅｒ?ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ?ｆｏｒ?ＰＣＲ?ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｔｈｅ?ｌｉｂｒａｒｙ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｄａｔａ）．??注：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；２１－３５?代表相應的?ＢＡＣ?編號??Ｎｏｔｅ：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；?２１－３５?ｔｈｅ?ＢＡＣ－?ｎｕｍｂｅｒ．??＇＜０ｌ：）＾＾ＰＢＫ３ＨＩＩ＾３ＨＳ９［＾３Ｖｒ９ｗ！＾Ｐ９ＢＲＲ?！，＂＇：，ｈ：＞￣，Ｃ３??ｆ｛?；：ｂ?－＾－＾Ｓ?—?？＇?」１?：?ｙ＇．？’Ｋ；ｉ??ｌＯＯｂｐ?－ｉ＊ｎ－＂?；／?＾?—??圖２－４?ＰＣＲ篩選ｓｕｐｅｒ－ｐｏｏｌ混合池，陽性板號的確定（部分數(shù)據(jù)）。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?ＰＣＲ?ｓｃｒｅｅｎ?ｔｈｅ?ｓｕｐｅｒ－ｐｏｏｌｓ，?ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ?ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｐｌａｔｅ?ｎｕｍｂｅｒ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｄａｔａ）．??注：Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ，?ＤＬ２０００）?；?０代表以割手密基因組為模板的陽性對照；５－１２表示３８４??孔板板號；紅色箭頭表示無陽性條帶，綠色箭頭表示多條陽性條帶。??Ｎｏｔｅ：?Ｍ－Ｍａｒｋｅｒ?（ＤＮＡ?ｌａｄｄｅｒ

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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2977139