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鹽脅迫下彎曲芽孢桿菌KLBMP 4941對中華補(bǔ)血草的促生效應(yīng)及其根際互作機(jī)理初步研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 20:08
  土壤鹽漬化嚴(yán)重影響了植物的正常生長,危害了我國的生態(tài)環(huán)境及農(nóng)業(yè)的發(fā)展,嚴(yán)重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量。前期課題組發(fā)現(xiàn)一株鹽生植物中華補(bǔ)血草內(nèi)生彎曲芽孢桿菌KLBMP 4941,通過組培方式能促進(jìn)宿主植物生長。因此本論文圍繞鹽脅迫下內(nèi)生細(xì)菌KLBMP 4941如何促進(jìn)宿主植物中華補(bǔ)血草生長以及根際定殖相互作用的機(jī)理進(jìn)行研究,開展盆栽實(shí)驗(yàn),對補(bǔ)血草生理特征的影響及KLBMP494全基因組的解析,以及鹽脅迫下根系分泌物介導(dǎo)的中華補(bǔ)血草與KLBMP4941相互作用的研究,取得了以下的結(jié)果:1、我們采用了前期驗(yàn)證的對植物促生效果較好的內(nèi)生菌KLBMP 4941為研究對象,用200 mM NaCl對接菌KLBMP 4941和未接菌的中華補(bǔ)血草處理,研究KLBMP 4941對中華補(bǔ)血草促生作用與相關(guān)機(jī)制。結(jié)果表明在鹽脅迫下,接菌的中華補(bǔ)血草在根長、莖長及鮮重上比未接菌的要明顯提高;對離子含量測定,接菌后的葉片中Na+濃度比對照組降低,提高了K+/Na+比;且KLBMP 4941能夠促進(jìn)植物葉片內(nèi)脯氨酸的含量;接菌后的植物體內(nèi)抗氧化酶活性如SOD... 

【文章來源】:江蘇師范大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:101 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 土壤鹽漬化及鹽生植物
        1.1.1 土壤鹽漬化的影響
        1.1.2 土壤鹽漬化改良
        1.1.3 中華補(bǔ)血草
    1.2 植物根際促生菌的研究
        1.2.1 PGPR的作用
        1.2.2 PGPR類群
        1.2.3 耐鹽植物的PGPR
    1.3 PGPR提高植物耐鹽性的主要機(jī)理
        1.3.1 影響植物的滲透調(diào)節(jié)
        1.3.2 影響植物的光合作用
        1.3.3 抗氧化系統(tǒng)的改變
+/Na+比值">        1.3.4 改變離子含量及K+/Na+比值
    1.4 植物促生菌的根際定殖及其與植物的根際相互作用
        1.4.1 根際定殖及影響因素
        1.4.2 根際定殖的檢測手段
    1.5 根系分泌物
        1.5.1 根系分泌物的概念與種類
        1.5.2 根系分泌物對微生物的影響
        1.5.3 根系分泌物介導(dǎo)的植物-微生物互作的的分子機(jī)理
        1.5.4 微生物對植物根系分泌物的影響
    1.6 研究內(nèi)容、意義及創(chuàng)新點(diǎn)
        1.6.1 研究內(nèi)容
        1.6.2 研究意義
        1.6.3 創(chuàng)新點(diǎn)
        1.6.4 技術(shù)路線路線圖路線圖
第二章 鹽脅迫下彎曲芽孢桿菌KLBMP4941對中華補(bǔ)血草的促生作用的研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.1.3 生理指標(biāo)的測量
        2.1.4 丙二醛(MDA)含量的測定
        2.1.5 葉綠素含量的提取
        2.1.6 抗氧化酶含量的測定
        2.1.7 脯氨酸含量測定
        2.1.8 離子含量測定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 生理指標(biāo)測定結(jié)果
        2.2.2 丙二醛(MDA)測定結(jié)果
        2.2.3 葉綠素含量測定結(jié)果
        2.2.4 抗氧化酶活性測定結(jié)果
        2.2.5 脯氨酸含量測定
        2.2.6 離子含量測定結(jié)果
    2.3 本章小結(jié)
第三章 彎曲芽孢桿菌KLBMP4941的全基因組解析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 菌株來源
        3.1.2 主要設(shè)備
        3.1.3 基因組DNA提取
        3.1.4 16SrRNA基因PCR擴(kuò)增
        3.1.5 構(gòu)建菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹
        3.1.6 測序及拼接組裝
        3.1.7 基因組組分分析及基因注釋
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 KLBMP4941系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建結(jié)果
        3.2.2 基因組拼接組裝及分析
        3.2.3 基因功能注釋
    3.3 本章小結(jié)
第四章 菌株KLBMP4941在宿主根際的定殖研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 主要試劑與儀器
        4.1.2 試驗(yàn)材料
        4.1.3 PHT43-GFP載體制備
        4.1.4 PHT43-GFP轉(zhuǎn)化到大腸桿菌DH5α
        4.1.5 菌落PCR
        4.1.6 篩選陽性克隆送樣測序及酶切驗(yàn)證
        4.1.7 菌株KLBMP4941原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法
        4.1.8 菌落觀察及GFP基因檢測
        4.1.9 菌株4941-GFP的質(zhì)粒穩(wěn)定性檢測
        4.1.10 野生菌株KLBMP4941與4941-GFP生長曲線的比較
        4.1.11 菌株4941-GFP在補(bǔ)血草根際定殖的觀察
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 PHT43-GFP構(gòu)建的結(jié)果
        4.2.2 4941-GFP構(gòu)建的結(jié)果
        4.2.3 4941-GFP中的質(zhì)粒穩(wěn)定性測定
        4.2.4 野生型KLBMP4941和4941-GFP的生長曲線比較
        4.2.5 4941-GFP在中華補(bǔ)血草根部的定殖研究
    4.3 本章小結(jié)
第五章 鹽脅迫下中華補(bǔ)血草根系分泌物與菌株KLBMP4941互作機(jī)理
    5.1 材料與方法
        5.1.1 主要試劑與儀器
        5.1.2 試驗(yàn)材料
        5.1.3 鹽脅迫下中華補(bǔ)血草根系分泌物的收集
        5.1.4 根系分泌物的鑒定及分析
        5.1.5 根系分泌物粗提物及主要成分單體對KLBMP4941生長量的影響
        5.1.6 根系分泌物及主要成分單體對KLBMP4941趨化作用的影響
        5.1.7 根系分泌物主要成分單品對KLBMP4941游動的影響
        5.1.8 根系分泌物及主要成分對KLBMP4941根際定殖的影響
        5.1.9 樣品處理和菌株RNA提取
        5.1.10 轉(zhuǎn)錄組測序
        5.1.11 表達(dá)差異基因分析及功能注釋
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 根系分泌物粗提物對KLBMP4941生長量的影響
        5.2.2 根系分泌物粗提物對KLBMP4941趨化作用的影響結(jié)果分析
        5.2.3 鹽脅迫下中華補(bǔ)血草根系分泌物成分的分析
        5.2.4 根系分泌物主要單體成分對KLBMP4941生長量的影響
        5.2.5 根系分泌物主要單體成分對KLBMP4941趨化作用的影響結(jié)果分析
        5.2.6 根系分泌物主要成分單品對KLBMP4941游動作用的結(jié)果分析
        5.2.7 根系分泌物及主要成分單品對KLBMP4941根際定殖的影響
        5.2.8 測序數(shù)據(jù)及其質(zhì)量控制的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.9 差異表達(dá)分析
        5.2.10 兩組顯著性差異表達(dá)基因的整體分類
        5.2.11 兩組顯著性差異表達(dá)基因具體分析
        5.2.12 GO功能分類
        5.2.13 KEGG代謝途徑分類
        5.2.14 QRT-PCR結(jié)果
    5.3 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[5]遼寧堿蓬營養(yǎng)成分分析及有益內(nèi)生菌篩選[D]. 鄭音.遼寧師范大學(xué) 2011
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本文編號:2973466

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