常壓室溫等離子體(Atmospheric and Room Temperature Plasma,ARTP)是在常壓下產(chǎn)生的具有高活性粒子的等離子體射流,作為一種新型安全高效的生物誘變育種手段,已成功應(yīng)用于微生物的育種研究,但在植物上的應(yīng)用剛剛起步。本研究首次以懷牛膝(Achyranthes bidentate)和昆侖雪菊(Coreopsis tinctoria)種子為實(shí)驗(yàn)材料,采用ARTP誘變技術(shù),探究其不同輻照時(shí)間對種子萌發(fā)、幼苗生長、大田表現(xiàn)、產(chǎn)量或花形花色及有效成分的影響,以期篩選出ARTP輻照植物的最佳條件,獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)或觀賞價(jià)值大的輻照株系,為進(jìn)一步開發(fā)利用ARTP這一新的植物誘變育種技術(shù)提供參考。研究結(jié)果如下:1、ARTP對懷牛膝種子的誘變效應(yīng)(1)種子萌發(fā):一定時(shí)間(22.5、45、60 min)的ARTP處理可以提高懷牛膝種子的發(fā)芽勢和萌發(fā)率,但長時(shí)間(90 min)的ARTP輻照反而降低種子的萌發(fā)效率,輻照22.5分鐘的種子的發(fā)芽勢和萌發(fā)率均達(dá)到最大值,分別為83.3%和90%。(2)形態(tài):一定時(shí)間(22.5、45、60 min)的ARTP輻照促進(jìn)了懷牛膝的生長,與對照相比,株高、最大冠幅、最大葉長、最大葉寬均有所增加。(3)生理:將輻照過的懷牛膝種子播入大田,在8、9、10三個月葉綠體色素、可溶性糖和可溶性蛋白含量與對照相比沒有明顯的差異。(4)產(chǎn)量:ARTP的輻照可以提高懷牛膝的產(chǎn)量。所有處理的單株干重均大于對照株系,其中,22.5 min和45 min輻照的株系單株最大根粗、根長、分根數(shù)、單株根鮮重和干重均為最大,且與對照差異顯著。(5)品質(zhì):22.5、45、60和90 min的ARTP輻照均可顯著地提高懷牛膝有效藥用成分β-蛻皮甾酮的含量。2、ARTP對昆侖雪菊種子的誘變效應(yīng)(1)種子萌發(fā):不同時(shí)間(7.5~37.5 min)的ARTP輻照提高了昆侖雪菊種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率,輻照22.5 min時(shí)其發(fā)芽勢(80%)和發(fā)芽率(86.7%)達(dá)最大;(2)幼苗生長:不同時(shí)間的ARTP輻照不同程度地增加了幼苗的最大冠幅、葉片數(shù)量、葉柄長度、葉面積,以22.5 min的輻照效果最好。(3)花型花色:與對照相比,ARTP輻照種子22.5 min后,大部分植株最大花徑明顯增加、舌狀花紅褐色區(qū)域明顯增大,少數(shù)植株舌狀花瓣數(shù)增多、雄蕊瓣化及舌狀花管狀化(似喇叭狀)。(4)花的品質(zhì):ARTP輻照后,部分植株花朵總黃酮、綠原酸和木犀草苷含量增加,其中舌狀花管狀化株系不僅花型發(fā)生變化且活性成分也有所提高。綜上所述,適宜時(shí)間的ARTP輻照可促進(jìn)種子萌發(fā)、幼苗生長、提高產(chǎn)量、改善品質(zhì)、增加花的觀賞性,ARTP誘變有望成為植物誘變育種的新途徑。
【學(xué)位單位】：河南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S567.239
【部分圖文】：

將除去主葉脈的葉片剪碎，稱取 0.2 g 置于試管中，放入預(yù)冷的研缽中，的磷酸緩沖液（pH=7），分三次加入，在冰盒上研磨至勻漿，以 12000 r/in，取上清液，加入考馬斯亮藍(lán)（100mg 考馬斯亮藍(lán)+50ml 90%乙醇+100m加水定容到 1L）5ml，搖勻靜置 5min，在分光光度計(jì) A595nm處測量其 OD 準(zhǔn)曲線（圖 2-2）得可溶性蛋白含量。

圖 2-3 葡萄糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig2-3 Standard curve of glucose-蛻皮甾酮含量的測定[64]確稱量樣品 0.5 g（每樣 3 份），加甲醇 10 ml，超聲波提取 40 min，過濾去滌容器和殘?jiān)鼣?shù)次，旋轉(zhuǎn)蒸干（40℃），加甲醇溶解定容至 3 mL。進(jìn)行量，將過濾液上機(jī)。流動相為，甲醇：水：冰醋酸=45:55:0.05（稀釋冰醋），流速為 0.9 ml·min-1，柱溫 25℃，進(jìn)樣量 20 μL，檢測波長為 248 nm黃酮含量的測定準(zhǔn)溶液母液配制：精密稱取蘆丁對照品 10mg，加入甲醇使其溶解，轉(zhuǎn)移至中，并用甲醇定容，搖勻即得蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液（0.4 mg/mL)。準(zhǔn)曲線制作：分別精密吸取上述蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液 0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL 于

圖 2-4 總黃酮含量濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 2-4 The standard curve of flavonoid concen tration）綠原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸含量的測定含量測定：參照中國藥典 2015 年版高效液相色譜法（通則 0512）測定。相 A ，以 0.1 % 磷酸溶液為流動相 B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；348 nm。時(shí)間Time（min）流動相 AMobile phase A（%）流動相 BMobile phase B（%）0-11 10—18 90—8211-30 18—20 82—8030-40 20—80 80—20
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本文編號：2843240