本研究在白芨種子萌發(fā)、試管苗無菌培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,研究白芨試管球莖膨大技術(shù),以期探索促使白芨試管球莖膨大的方法,完善現(xiàn)有白芨組培快繁技術(shù),篩選出適宜白芨試管球莖膨大的培養(yǎng)基配方,進而用膨大試管球莖替代試管苗進行移栽,為白芨的離體快繁、育種和工業(yè)化生產(chǎn)提供參考依據(jù)。結(jié)論如下:(1)白芨試管苗無菌培養(yǎng)體系的建立白芨試管苗無菌培育體系是在白芨種子萌發(fā)的基礎(chǔ)上,采用“誘導(dǎo)原球莖→不定芽分化→不定芽增殖→生根壯苗”的快繁方式,以不定芽進行繼代增殖優(yōu)于用原球莖進行繼代。促使種子萌發(fā)及原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.01 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA;不定芽分化和增殖培養(yǎng)基均為MS+0.1 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;生根壯苗培養(yǎng)基為1/2MS+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L GA_3。(2)白芨試管球莖膨大技術(shù)上述生根培養(yǎng)基中的試管苗,培養(yǎng)40 d后切去其葉片及根系,將大小相似的球莖接種于各膨大培養(yǎng)基中,研究各因素對白芨試管球莖膨大的影響。正交試驗結(jié)果表明:NAA和基本培養(yǎng)基對白芨試管球莖膨大的影響大于6-BA,其中當NAA濃度為0.1 mg/L時,試管球莖膨大的各指標值均最大;以1/2MS為基本培養(yǎng)基更有利于白芨試管球莖生根和膨大;而6-BA對試管球莖膨大各指標值均無顯著影響。此外,蔗糖是影響白芨試管球莖膨大的重要因素,隨蔗糖含量的增加試管球莖逐漸膨大且根生長量及植株長勢漸好,當蔗糖濃度為20.0~40.0 g/L時試管球莖增殖效果較佳。因此,初步篩選出適宜白芨試管球莖膨大的培養(yǎng)基配方為1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L6-BA+20 g/L蔗糖。在此基礎(chǔ)上進一步研究發(fā)現(xiàn):添加0.5 g/L活性炭的白芨試管球莖鮮重增殖率最大,為33.41%;多效唑(PP_(333))的促進適宜濃度為10 mg/L;水楊酸(SA)對白芨試管球莖膨大的影響不明顯且不適于生根;光周期對白芨試管球莖膨大影響亦不顯著,短期暗培養(yǎng)不利于生根長葉,但促進白芨試管球莖的膨大;液體培養(yǎng)基更能促進試管球莖對養(yǎng)分的吸收;低濃度的NH_4~+(10 mmol/L)和H_2PO_4~-(0.625 mmol/L)適宜白芨試管球莖的膨大。相關(guān)性分析結(jié)果表明:生根對試管球莖膨大起促進作用,芽分化對試管球莖膨大起抑制效應(yīng);球莖膨大增殖率與試管球莖初始值呈反比,試管球莖各初始值越小,膨大增殖率越高。此外,在初步篩選出的膨大培養(yǎng)基配方上的白芨試管球莖膨大時間動態(tài)結(jié)果表明,試管球莖在膨大培養(yǎng)的前90 d呈緩慢增加的趨勢,并且球莖膨大各指標與剛接種時的相應(yīng)指標間差異不顯著。鮮重增殖率在第90~150 d時呈直線狀顯著增加,直徑和高度增殖率也在第90~120 d時增加最快,120~150 d時仍在明顯增大。因此,白芨試管球莖壯大培養(yǎng)時間建議時長至少120 d。(3)白芨試管球莖移栽將膨大培養(yǎng)后的試管球莖按直徑大小分為3級:3.5~5 mm,5~7 mm,7 mm以上,與生根試管苗對比移栽。結(jié)果表明,白芨試管球莖移栽成活率(80.00~98.33%)大于生根試管苗(66.67%),并且試管球莖越大,移栽成活率越高,球徑7 mm的試管球莖成活率可達98%以上。
【學(xué)位單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S567.239
【部分圖文】：

白友試管球莖膨大培養(yǎng)時間(d)

2白岌試管球莖膨大培養(yǎng)時間(d)

4.9 礦質(zhì)養(yǎng)分對白芨試管球莖膨大的影響試驗結(jié)果（表 3-12）表明，白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增隨培養(yǎng)基中 NH4+濃度的增加呈明顯的下降趨勢。當 NH4+濃度為 10 mmol/L（膨大增殖率各指標均明顯大于 NH4+濃度為 20、30、40 mmol/L 時的處理且與三度間差異顯著。因此，NH4+濃度為 10 mmol/L（CK）時最有利于白芨試管球莖（圖版 2-O），超過 10 mmol/L 則會阻礙試管球莖的增長。由表 3-13 分析得出，白芨試管球莖的鮮重增殖率、直徑增殖率和高度增殖率PO4-濃度的增加均呈下降趨勢，當 H2PO4-濃度為 0.625 mmol/L（CK）時達最大圖版 2-Q）。不同 H2PO4-濃度間鮮重增殖率和直徑增殖率差異不明顯，高度增在 H2PO4-濃度為 0.625~1.875 mmol/L 時差異不顯著，但濃度為 0.625 mmol/L 時度增殖率較 2.5 mmol/L 時提高 205.13%且差異顯著，表明在白芨試管球莖膨大過，不需另外添加 H2PO4-。對球莖膨大培養(yǎng)時間和礦質(zhì)養(yǎng)分中相同條件下白芨試管球莖初始值與膨大增各指標間的數(shù)據(jù)做相關(guān)性分析，結(jié)果（表 3-14）表明，試管球莖初始值與膨大增各指標間呈極顯著負相關(guān)（P<0.01）。說明白芨試管球莖切除葉片及根系后的膨

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本文編號：2807699