【摘要】：天麻(Gastrodia elata Bl.)的干燥塊莖,是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材之一,其主要分布在貴州、云南、四川、陜西、湖北等地。天麻通常劃分為5個(gè)變型,即紅天麻(G.elata Bl.f.elata)、烏天麻(G.elata Bl.f.glauca S.Chow)、綠天麻(G.elata.Bl.f.viridis Malkino)、黃天麻(G.elata Bl.f.flavida S.Chow)和松天麻(G.elata Bl.f.alba S.Chow)。西南地區(qū)作為天麻的主產(chǎn)區(qū),栽培上主要以紅天麻、烏天麻和綠天麻為主,該地區(qū)不同天麻變型間化學(xué)成分差異情況未見(jiàn)系統(tǒng)研究。目前天麻生產(chǎn)以無(wú)性繁殖為主,但長(zhǎng)期無(wú)性繁殖會(huì)引起天麻產(chǎn)量質(zhì)量下降,通常幾代無(wú)性繁殖后會(huì)采用有性繁殖更替,或采用不同變型天麻進(jìn)行雜交以利用雜種優(yōu)勢(shì)。迄今為止,西南地區(qū)不同天麻變型間的開(kāi)花特點(diǎn),花粉活力和柱頭可授性,尚未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)道。本試驗(yàn)一方面對(duì)該地區(qū)天麻不同變型的花粉活力和柱頭可授性進(jìn)行研究,另一方面對(duì)三種天麻變型的多糖、游離氨基酸、總多酚、天麻素、對(duì)羥基苯甲醇以及4種巴利森苷類成分等進(jìn)行分析,以期為該地區(qū)天麻資源進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用和評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量提供理論依據(jù),并弄清不同變型天麻適宜的授粉時(shí)期,為進(jìn)一步開(kāi)展天麻新品種選育和良種繁育提供科學(xué)理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.采用過(guò)氧化物酶法測(cè)定花粉活力及壽命,聯(lián)苯胺-過(guò)氧化氫法測(cè)定柱頭可授性。結(jié)果表明,烏天麻、紅天麻與綠天麻在花粉活力上表現(xiàn)出相同的趨勢(shì),先上升后下降,其花粉活力均在第2天,即花朵剛完全開(kāi)放時(shí)最高;貯藏時(shí)間與貯藏溫度對(duì)天麻花粉活力存在顯著的影響,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),花粉活力降低,-20℃冰箱貯藏可適當(dāng)延長(zhǎng)花粉活力。天麻柱頭于開(kāi)花當(dāng)天即具可授性,其中烏天麻第2天最強(qiáng),第7天不具有可授性,紅天麻與綠天麻均在第3天柱頭可授性最強(qiáng),第8天其柱頭可授性消失。進(jìn)行人工授粉時(shí),建議選開(kāi)花第2天的花粉,分別對(duì)開(kāi)花第2天的烏天麻、開(kāi)花第3天的紅天麻與綠天麻柱頭授粉。2.對(duì)西南地區(qū)三種天麻變型的主要化學(xué)成分含量進(jìn)行比較和主成分分析。結(jié)果表明西南地區(qū)不同天麻變型主要化學(xué)成分含量間差異較大,變異系數(shù)(CV)以天麻多糖含量最小為18.025%,巴利森苷B含量的CV最高,為62.045%。其中,四川北川烏天麻游離氨基酸、總多酚、天麻素以及巴利森苷B、E含量均最高,分別為2.873%、0.805%、0.862%、1.146%和2.101%,與其他材料間差異均極顯著;貴州大方綠天麻多糖含量最高,為29.225%,顯著高于北川烏天麻,并極顯著高于其余天麻材料;對(duì)羥基苯甲醇含量最高為云南昭通烏天麻,其次為四川廣元紅天麻,兩者間差異不顯著;四川廣元紅天麻巴利森苷A、C含量最高,分別為0.877%、0.383%,顯著高于其他天麻材料。四川地區(qū)3種天麻變型天麻素含量與云南地區(qū)天麻變型差異不顯著,均與貴州地區(qū)天麻變型差異極顯著。此外,四川地區(qū)3種天麻變型巴利森苷B、E含量均顯著高于云南、貴州地區(qū)天麻變型,其余各主要化學(xué)成分含量在3地區(qū)間差異均不顯著。綜合來(lái)看,西南地區(qū)天麻變型主要化學(xué)成分含量整體差異較大,其中主要化學(xué)成分含量以四川地區(qū)較高,其含量與天麻變型種類無(wú)關(guān),總體上以四川北川的烏天麻藥材質(zhì)量最好。3.本試驗(yàn)還建立了同時(shí)測(cè)定天麻中巴利森苷A、B、C和E等4種巴利森苷類成分的HPLC分析方法。采用Agilent1200高效液相系統(tǒng),Agilent TC-C_(18)色譜柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈(A)—0.1%磷酸水溶液(B),線性梯度洗脫:0~10 min,10%A;10~20 min,10%~25%A;20~30 min,25%A;體積流量1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)270 nm;柱溫30℃;進(jìn)樣量20μL。測(cè)定的4種巴利森苷類成分在線性范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系(r≥0.9990);精密度試驗(yàn)RSD值在0.306%~1.205%之間,穩(wěn)定性試驗(yàn)RSD值在1.007%~2.142%之間,重復(fù)性試驗(yàn)RSD值在1.067%~2.162%之間,平均加樣回收率在96.322%~103.105%之間,RSD值在1.713%~2.797%之間,所有結(jié)果顯示RSD值均小于3.0%,表明整個(gè)試驗(yàn)進(jìn)樣精密度良好,樣品溶液穩(wěn)定性良好,試驗(yàn)重復(fù)性和準(zhǔn)確度均較高。4.分別采用熱水浸提、超聲輔助提取和酶法提取對(duì)四川平武烏天麻多糖進(jìn)行提取,并對(duì)天麻多糖提取率及其抗氧化活性進(jìn)行比較。結(jié)果表明,3種提取方法對(duì)天麻多糖提取率及其抗氧化活性影響較大,其中酶法提取天麻多糖提取率最高(50.315%),與其他2種提取方法見(jiàn)差異達(dá)極顯著水平(P0.01);在DPPH和FRAP法抗氧化評(píng)價(jià)體系中,多糖抗氧化活性表現(xiàn)為超聲輔助提取酶法提取熱水浸提法,而在ABTS抗氧化評(píng)價(jià)體系中,其活性順序是酶法提取超聲輔助提取熱水浸提。綜合分析,酶法提取有利于天麻多糖提取,且能保持其良好的抗氧化活性。
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S567.239
【圖文】：

同開(kāi)花時(shí)期的花粉活力開(kāi)花時(shí)期天麻的花粉活性存在顯著差異，從整體看，烏天麻、紅天出先上升后下降的趨勢(shì)（如圖 2-1）。其中，烏天麻在開(kāi)花當(dāng)天花隨著雄蕊的發(fā)育，花粉活力逐漸增強(qiáng)，到第二天最高，達(dá)到 86.8%速下降，第 10 天僅為 7.4%。紅天麻和綠天麻在花粉活力上表現(xiàn)出勢(shì)，在開(kāi)花當(dāng)天紅天麻花粉活力為 36.7%，綠天麻為 45.7% ，與麻較低，綠天麻較高，第二天活性紅天麻最強(qiáng)僅為 71.9%，綠天麻麻低，隨后花粉活力下降，但下降幅度較小，第 10 天花粉活力分。

圖 2-2 不同貯藏條件下烏天麻花粉活力Fig. 2-2 Pollen viability of G. elata f. glauca under different storage圖 2-3 不同貯藏條件下紅天麻花粉活力Fig. 2-3 Pollen viability ofG. elata f.elata under differentstorage

藏的烏天麻花粉活力僅為30% 左右，紅天麻為28%，綠天麻僅麻花粉活性保持度高于紅天麻和綠天麻。圖 2-2 不同貯藏條件下烏天麻花粉活力Fig. 2-2 Pollen viability of G. elata f. glauca under different storage

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本文編號(hào)：2767335