【摘要】：亞麻芥[Camelina sativa(L.)Crantz]是一種具有優(yōu)良性狀的油料作物。亞麻芥種子中富含多種不飽和脂肪酸,并且因?yàn)槠渲舅峤M成適宜人體健康,所以人體長(zhǎng)期食用亞麻芥油制品可以降低血液中的膽固醇含量及一些低密度的脂蛋白,保證心血管健康,具有廣闊的前景與發(fā)展?jié)摿ΑＶ舅崦摎涿?fatty acid desat urase-2,FAD2)是植物脂肪酸生物合成代謝過程中催化油酸及亞油酸向亞麻酸轉(zhuǎn)化的主效酶基因,植物中不飽和脂肪酸的含量與比例都由其直接控制。并且油脂品質(zhì)取決于植物油脂中脂肪酸的不飽和程度,因此FAD2基因受到科學(xué)家的廣泛關(guān)注。對(duì)FAD2進(jìn)行基因工程操作,進(jìn)而調(diào)整植物種子中油酸和亞油酸的比例,對(duì)改變植物油脂的品質(zhì)具有主要意義。本研究為探究亞麻芥CsFAD2基因功能,發(fā)掘FAD2基因調(diào)控不飽和脂肪酸合成的機(jī)制,從亞麻芥種子中克隆了CsFAD2基因,該基因具有完整的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄本,長(zhǎng)度為1155bp。構(gòu)建酵母表達(dá)載體pPICZalphaA-CsFAD2,并轉(zhuǎn)化到畢赤酵母X33中,誘導(dǎo)表達(dá)后對(duì)其脂肪酸進(jìn)行氣相色譜(GC)分析。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)Cs FAD2基因與轉(zhuǎn)空載對(duì)照相比較,多種飽和脂肪酸及不飽和脂肪酸含量大幅度升高,而部分脂肪酸含量明顯降低。其中,γ-亞麻酸(C18.3N6)的含量由38.87mg/kg升高到了73.02 mg/kg,提升了53.02%。而油酸(C18.19C)的含量由251.96 mg/kg降低到了30.22 mg/kg。這證明CsFAD2可以促進(jìn)油酸生成亞麻酸并催化多種脂肪酸的合成,對(duì)于揭示亞麻芥脂肪酸合成代謝機(jī)理,改善其油脂品質(zhì),培育亞麻芥新種質(zhì)具有重要作用。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S565.9
【圖文】：

圖 3.2 含有 T 載體的大腸桿菌培養(yǎng)Fig 3.2 Culture of E. coli with T-vecto碼區(qū)轉(zhuǎn)錄本，長(zhǎng)度為 1155 bp，經(jīng)M 1 2圖 3.3 CsFAD2 基因擴(kuò)增片段凝膠電泳L2000 DNA Marker 1-2:CsFAD2 RT-PCR

21CsFAD2 基因擴(kuò)增片段凝A Marker 1-2:CsFAD2e amplification fragme Marker 1-2:CsFAD2 分析idopsis thaliana）中AhFAD2（AF272950油菜（Brassica napa）中的 BjFAD2（H芥 CsFAD2 與同屬花生的同源性最低與油菜 BnFAD2 及芥

CsFAD2 基因的氨基酸序列在數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行保守結(jié)構(gòu)域分析，結(jié)果見該基因含 FA-desaturase 的多功能結(jié)構(gòu)域，可結(jié)合在細(xì)胞膜上的脂肪結(jié)構(gòu)域，維持膜的結(jié)構(gòu)與功能。

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