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光質(zhì)和油菜素內(nèi)酯對(duì)棉花胚性愈傷組織影響初析

發(fā)布時(shí)間:2020-07-15 10:50
【摘要】:本文以中棉所24為研究材料,從光質(zhì)和油菜素內(nèi)酯兩個(gè)角度對(duì)棉花胚性愈傷組織誘導(dǎo)的影響進(jìn)行了研究,通過生理生化和分子生物學(xué)角度進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),旨在提高棉花組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化的效率,為棉花生物技術(shù)提供一定的理論基礎(chǔ)。本文的主要結(jié)論是:1紅光較白光比愈傷組織黃褐色體積適中,能明顯促進(jìn)胚性愈傷組織的分化,表現(xiàn)為分化時(shí)間縮短,10天-20天左右即可,分化率為白光的1.5x-3x,EC分化狀態(tài)良好。愈傷組織鮮重:藍(lán)光紅光白光黑暗;酶活:藍(lán)光下POD、SOD活性最高,其活性越高,愈傷組織增殖越大,其酶活性與愈傷組織增殖成正比關(guān)系,CAT活性最低,紅光下三種酶活性居中。藍(lán)光下可溶性糖和蛋白含量較低。多胺和激素含量:紅光處理下腐胺含量較少,總胺含量、精胺和亞精胺含量較高。激素含量,紅光處理下生長(zhǎng)素較高,且差異顯著IAA/ZT比值對(duì)胚性愈傷組織發(fā)生有正效應(yīng);ABA適中水平,可能有利于胚性細(xì)胞發(fā)生,而較高ABA含量可能不利于胚性細(xì)胞的發(fā)生。紅光下體胚基因AGL15、LEC2、WUS表達(dá)量上調(diào),紅光處理下的愈傷組織開始具有了胚性細(xì)胞的特征,標(biāo)記基因已明顯上調(diào)表達(dá)。2不同濃度BRZ外施于培養(yǎng)基中,棉花胚性愈傷組織分化率出現(xiàn)顯著差異,隨著BRZ濃度0-60nm增加,EC分化率逐漸增加;當(dāng)BRZ濃度為60nm時(shí),EC分化率最高,可以達(dá)到89.6%。轉(zhuǎn)錄組學(xué)、生理生化結(jié)合轉(zhuǎn)基因株系實(shí)驗(yàn)表明:BR對(duì)于棉花胚性愈傷組織分化是必須的,適當(dāng)濃度的BR能夠明顯促進(jìn)胚性愈傷組織的分化,可能原因是由于BRZ抑制作用,使得BRX上調(diào),AUX升高,生長(zhǎng)素濃度升高,導(dǎo)致BR合成基因上調(diào),BR濃度適當(dāng)升高;由于BRZ的作用,導(dǎo)致乙烯相關(guān)信號(hào)基因ETR1、CTR1、EBF1、ERN3和ERF1/2明顯下調(diào),相關(guān)不飽和脂肪酸基因ACC、FAD和KCS明顯上調(diào),乙烯水平的降低和脂肪酸含量的增加,都促進(jìn)胚性愈傷組織分化率升高。
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:博士后
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S562
【圖文】:

生物合成途徑,突變體,鯊烯,酮基


分析代謝產(chǎn)物,證實(shí)了邋BR生物合成途徑中鯊烯(squalene)最終轉(zhuǎn)化成為BL的逡逑大量反應(yīng)步驟。從鯊烯還原到Campestanol后,在留醇體和側(cè)鏈上發(fā)生一系列羥逡逑化和氧化步驟的同時(shí)伴隨著C-6位置的酮基化(這種酮基化發(fā)生在C-22、C-23、逡逑C-3和C-2位置的修飾前和后)。這兩種分支途徑分別被稱為C-6氧化前途徑和逡逑C-6氧化后途徑。在煙草、水稻和百合等植物中發(fā)現(xiàn)了與此相似的途徑,其修飾逡逑和不同步驟之間的關(guān)系還有待進(jìn)一步證實(shí),而且由于許多不同類似物(側(cè)鏈結(jié)構(gòu)逡逑不同)的出現(xiàn)可能導(dǎo)致情況更為復(fù)雜(同種植物中不同類似物的出現(xiàn)表明可能存逡逑在其他的合成途徑)。逡逑

模式圖,模式圖,光處理


圖2-1光處理模式圖逡逑Figure邋2-1邋Pattern邋of邋light邋treatments逡逑)邋BL邋indicates邋blue邋light-emitting邋diode邋light;邋(B)邋RL:BL=3:1邋indicates邋that邋the邋proportiootosynthetic邋photon邋flux邋density邋of邋red邋and邋blue邋LED邋is邋3:1;邐(C)邋RL:BL=1:3邋indicates邋thaportion邋of邋photosynthetic邋photon邋flux邋density邋of邋red邋and邋blue邋LED邋is邋1:3;邐(D)邋RL邋indicate19逡逑

可溶性糖,可溶性蛋白,光處理,抗氧化酶


2.2.2可溶性糖和蛋白逡逑根據(jù)圖2-3可知,不同光處理下,可溶性糖和蛋白黑暗處理下含量最高,紅逡逑光處理下含量居中。逡逑a邋1&0邐a邐b邋303邐a逡逑1S-5邋b邐200邐I邐.逡逑a財(cái)4邐I逡逑lllillil逡逑wiwi?邐M邐Blue邐CMrt邐M邐6luc逡逑IgtA邋quality邐itglil逡逑圖2-3不同光質(zhì)條件下可溶性糖(A)和可溶性蛋白(B)含量逡逑Figure邋2-3邋Soluble邋sugar邋(A)邋and邋soluble邋protein邋(B)邋content邋in邋calli邋grown邋under邋different邋light逡逑treatments逡逑Data邋represent邋the邋means邋of邋three邋replicates士SDs邋(n=3)邋?邋Bars邋with邋different邋letter邋(s)邋are逡逑significantly邋different邋based邋on邋Tukey9邋s邋HSD邋test邋(P<0.05)逡逑2.2.3抗氧化酶逡逑CAT活性黑暗下活性最高,紅光、白光居中,藍(lán)光下活性最低;POD活性藍(lán)逡逑光下活性最高

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2756392

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