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兩種蕓薹屬植物遺傳多樣性及一種抗除草劑油菜的育種利用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-09 20:24
【摘要】:油菜是我國種植的最主要油料作物,具有顯著的雜種優(yōu)勢(shì)。化學(xué)殺雄是油菜雜種優(yōu)勢(shì)利用的重要途徑之一。在化學(xué)殺雄制種中,將具有抗化學(xué)殺雄劑(主要有效成分是除草劑)的油菜材料作為父本,父本無需遮擋,可以簡化制種程序;同時(shí),該類雜交種可以使用除草劑進(jìn)行化學(xué)除草。因此,抗除草劑油菜的選育具有非常重要的意義。種質(zhì)資源遺傳多樣性評(píng)價(jià)是資源保護(hù)和育種的重要基礎(chǔ)工作。本課題組前期利用甲基磺酸乙酯(EMS)誘變甘藍(lán)型油菜(Brassica napus L.)“中雙9號(hào)”,創(chuàng)造了一個(gè)變異類型豐富的突變體庫,M_2代噴施苯磺隆(TBM)篩選到一個(gè)抗TBM的突變體(K5)。本研究將以該突變體后代純合抗性株系為核心材料,進(jìn)行以下研究:1)以100份蕓薹屬材料,主要是甘藍(lán)型油菜和芥菜型油菜,利用SSR(Simple Sequence Repeats)、SRAP(Sequence-related Amplified Polymorphism)和ISJ(Intron-exon Splice Junctions)分子標(biāo)記,對(duì)其進(jìn)行遺傳多樣性評(píng)價(jià),并利用本課題組發(fā)明的一步多重PCR技術(shù)鑒定這些材料的細(xì)胞質(zhì)類型;2)化殺劑對(duì)不同品系油菜的花器官形態(tài)特征、花粉育性、制種產(chǎn)量的影響。研究所得結(jié)果如下:1、對(duì)100份蕓薹屬植物材料,其中包括50份芥菜型油菜、31份甘藍(lán)型油菜、5份白菜型油菜、5份埃塞俄比亞芥、4份甘藍(lán)、3份炓芥、1份蕓芥和1份板藍(lán)根,利用SSR、SRAP及ISJ分子標(biāo)記對(duì)其遺傳多樣性進(jìn)行了分析。結(jié)果表明,23對(duì)SSR引物共擴(kuò)增出87個(gè)多態(tài)性條帶,不同引物擴(kuò)增出1-6個(gè)多態(tài)性條帶,平均PIC值(Polymorphic information content)為0.64;27對(duì)SRAP引物共擴(kuò)增出218個(gè)多態(tài)性條帶,平均PIC值為0.85;8個(gè)ISJ引物共擴(kuò)增出72個(gè)多態(tài)性條帶,不同引物擴(kuò)增出6-13個(gè)多態(tài)性條帶,平均PIC值為0.81。基于所有的377個(gè)多態(tài)性分子標(biāo)記(SSR、SRAP和ISJ標(biāo)記),聚類分析將參試的100份材料聚為6大類,所有參試的31份甘藍(lán)型油菜被聚為一類,所有參試的50份芥菜型油菜被聚在一起,其他類型材料也根據(jù)類型被聚在一起,聚類結(jié)果與材料類型、系譜關(guān)系、地理來源一致。主成分分析及群體結(jié)構(gòu)分析結(jié)果,與聚類分析結(jié)果基本一致。一步多重PCR分析結(jié)果顯示,參試的100份蕓薹屬植物材料中,50份芥菜型油菜中,49份材料為Cam類型,1份為Nap類型;31份甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)類型相對(duì)豐富,11份Pol類型,3份Cam類型,15份Nap類型,2份混合類型。說明參試芥菜型材料細(xì)胞質(zhì)類型單一,甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)類型相對(duì)豐富。2、以甘藍(lán)型油菜突變體K5和12個(gè)核心親本為材料,進(jìn)行化學(xué)殺雄處理,配置化殺雜交種。噴施0.1%化殺劑CHA-XN01后,發(fā)現(xiàn)12個(gè)核心親本均表現(xiàn)出花絲變短、雄蕊干癟,花粉失活,而噴施化殺劑的K5和未噴化殺劑的對(duì)照品種ZS09花器官正常,花粉活性不受影響。K5制種產(chǎn)量達(dá)109.72 Kg/667m~2,為參試材料最高,說明化殺劑對(duì)K5產(chǎn)量影響最小,其余12個(gè)親本材料的制種產(chǎn)量介于21.01-83.65kg/667m~2,說明除個(gè)別親本外,大多數(shù)親本的制種產(chǎn)量結(jié)果可以接受。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S565.4
【圖文】:

聚類圖,分子標(biāo)記,材料


20圖 2-1 基于 SSR、SRAP 和 ISJ 分子標(biāo)記的參試材料聚類圖Fig2-1Cluster dendrogram of the 100 tested Brassica accessions constructed by simple sequence repeat,sequence related amplified polymorphism and intron-exon splice junctions molecular markers

主成份,分子標(biāo)記,主成分,芥菜型油菜


第二章 芥菜型油菜及甘藍(lán)型油菜遺傳多樣性及細(xì)胞質(zhì)雄性不育類型鑒定2.2.3 主成分分析根據(jù) SSR、SRAP 和 ISJ 分子標(biāo)記數(shù)據(jù),進(jìn)行主成份分析。第一主成份解釋中遺傳變異的 18.24%,第二主成份解釋中遺傳變異的 7.05%。根據(jù)前兩個(gè)主成份結(jié)果,可將100 份參試材料主要分為 4 大類(圖 2-2)。芥菜型油菜分為一組、甘藍(lán)型油菜分為一組、甘藍(lán)和云芥和板藍(lán)根分為一組、其余材料分為一組。通過對(duì)比發(fā)現(xiàn),主成分結(jié)果與聚類圖大致相同。

群體結(jié)構(gòu),材料,細(xì)胞質(zhì)類型,顏色


圖 2-3 100 份材料群體結(jié)構(gòu)圖(K=7)Fig2-3 Population structure of the 100 materials suggested by structure analysis(K=7)注:7 種顏色代表 7 個(gè)不同的組(G I~GVII)。每一個(gè)長方形柱代表一個(gè)材料。每個(gè)柱中不同顏色所占柱的百分比代表該材料遺傳物質(zhì)在該顏色所示組中的比例。每一個(gè)長方形柱下的數(shù)字為材料編號(hào),同表 2-1Note: Seven colors represent seven inferred groups (G I~G VII). Each bar represents each accession. The estimated geneticfraction of each accession of each inferred group was indicated in different colors. The numbers under each bar is the sameaccession numbers in Table 2-12.2.5 細(xì)胞質(zhì)類型分析利用一步多重 PCR 方法(Zhao et al. 2010),對(duì) 100 份參試材料的細(xì)胞質(zhì)類型進(jìn)行分析。結(jié)果表明(圖 2-4),1200bp2000bp500bp800bpM 54 85

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