發(fā)布時(shí)間：2020-07-02 22:05

【摘要】：東鄉(xiāng)野生稻(Oryza rufipogon Griff.)是1978年在江西省東鄉(xiāng)縣所發(fā)現(xiàn)的目前世界上緯度最高的野生稻,具有抗寒、耐旱、耐瘠、抗蟲、免疫矮縮病等優(yōu)良抗逆品質(zhì)。本論文以實(shí)驗(yàn)室前期所獲得的東鄉(xiāng)野生稻內(nèi)生真菌L99和S108為研究對(duì)象,對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)分類鑒定,最終將菌株L99鑒定為Sarocladium oryzae,S108菌株鑒定為Chaetomium globosum。隨后采用固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)方式,獲得乙酸乙酯浸提物,再利用硅膠柱層析、葡萄糖凝膠柱層析(Sephadex LH-20)、薄層色譜分析(TLC)以及高效液相色譜分析等分離手段,追蹤分離獲得化合物。結(jié)合高分辨質(zhì)譜和核磁共振譜等現(xiàn)代色譜技術(shù)對(duì)分離純化得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析與鑒定,最后評(píng)價(jià)這些化合物對(duì)黑色素瘤B16細(xì)胞活力的影響,得到以下結(jié)論:從菌株L99乙酸乙酯粗提物中分離純化得到10個(gè)化合物,鑒定其分別為:脫氧胸腺嘧啶核苷(1)、2'-O-甲基腺苷(2)、2'-脫氧尿苷(3)、脲嘧啶核苷(4)、腺嘌呤核苷(5)、(E)-9-methyloctadec-9-enoic acid(6)、麥角甾醇過(guò)氧化物(7)、煙曲霉酸(8)、(9Z)-glycerin-1-monooleate(9)、酞酸二丁酯(10)。從菌株S108乙酸乙酯粗提物中分離純化得到7個(gè)化合物,鑒定其分別為:鄰苯二甲酸二辛酯(11)、6-Hydroxymellein(12)、Chaetomugilin D(13)、Chaetomugilin S(14)、Chaetoviridins A(15)、球毛殼素A(16)、6-O-demethyl-5-deoxyfusarubin(17)。在黑色素瘤B16細(xì)胞生存活力的試驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)化合物酞酸二丁酯(10)和6-Hydroxymellein(12)對(duì)黑色素瘤B16細(xì)胞活力影響較大,并在10μM時(shí)對(duì)黑色素瘤B16細(xì)胞的殺傷能力最強(qiáng)。
【學(xué)位授予單位】：江西科技師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S511.9
【圖文】：

12圖 1-2 化合物 6~90 的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1-2 The chemical structures of compounds 6~901.3 論文設(shè)計(jì)思路1.3.1 選題背景植物內(nèi)生真菌(Endophytic fungi)是在寄主植物體內(nèi)度過(guò)全部或近乎全部生活周期而不使寄主表現(xiàn)出任何癥狀的一類真菌，它們普遍存在于健康植物組織中，種類繁多，能夠產(chǎn)生豐富多樣的具有生物活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物[51-52]。目前世界上鑒定的約有 150 萬(wàn)種真菌[53]，其中約有 130 萬(wàn)種是內(nèi)生真菌[54]。內(nèi)生真菌具有很大的存在數(shù)量，且種類和次代謝產(chǎn)物具有多樣性。作為一類長(zhǎng)期存在于宿主植物體內(nèi)的微生物，與宿主植物協(xié)同進(jìn)化，形成了一種互利共生的關(guān)系，既可以產(chǎn)生與宿主植物相類似甚至相同的化合物又蘊(yùn)含豐富的天然化合物。近年來(lái)

TS rDNA 序列在 NCBI 的 GenBank 序列庫(kù)中進(jìn)行 BLAST 比對(duì)，申 Ge號(hào)。下載相關(guān)序列的 ITS rDNA 序列，使用 MEGA6.0 軟件 Clustal X 方 實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 內(nèi)生真菌 L99 和 S108 的形態(tài)觀察結(jié)果內(nèi)生真菌 L99 在 PDA 平板上菌落形態(tài)如圖 2-1 中 A 和 A’所示：采用點(diǎn)在 PDA 平板上，菌落為白色絲絨狀，中間明顯凸起，無(wú)皺褶，無(wú)滲出后期菌落表面由白色變成粉紅色，背面有粉紅色色素滲出。內(nèi)生真菌 S108 在 PDA 平板上菌落形態(tài)如圖 2-1 中 B 和 B’所示，菌落，顏色由最初的白色逐漸變?yōu)楹诨疑覠o(wú)滲出液。菌落的背面為黑色菌絲在培養(yǎng)基內(nèi)部生長(zhǎng)。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2738743