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小麥根表菲降解菌生物膜的構(gòu)建及其阻控菲的效果研究

發(fā)布時間:2020-05-30 07:15
【摘要】:近年來,我國耕地土壤中持久性有機污染物多環(huán)芳烴(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)的污染狀況日益加重。PAHs可以被植物吸收積累,并經(jīng)食物鏈和食物網(wǎng)逐級傳遞,威脅人類健康和生態(tài)系統(tǒng)安全。微生物具有明確的有機污染物降解功能,是目前生物修復(fù)領(lǐng)域中最具研究價值和應(yīng)用前景的主體。本論文基于自然界中微生物易于形成細菌生物膜,并借此增強自身生物功能和抗逆性的現(xiàn)象,人為的在植物根表構(gòu)建外源降解菌生物膜,以此強化降解菌的降解功能并阻止污染物進入植物體內(nèi),以期實現(xiàn)良好、持續(xù)的阻控效果。本論文以菲為PAHs代表污染物,實驗室篩選馴化的菲降解菌Pseudomonas sp.JM2為成膜細菌,首先探究了小麥對不同濃度菲的毒性反應(yīng)。然后利用蘸根培養(yǎng)的生物強化方法,在小麥根表構(gòu)建了菲降解菌生物膜并進行形態(tài)結(jié)構(gòu)的表征。最后綜合評價了根表菲降解菌生物膜對小麥體內(nèi)菲富集以及對小麥生長、生理狀況的影響。主要結(jié)果如下:(1)隨著菲污染濃度的增加,小麥的根長、株高和生物量逐漸降低,小麥體內(nèi)的菲積累量、SOD和POD活性、葉綠素含量呈先增后減趨勢,在菲濃度為250 mg·L~(-1)時達到最大值。(2)利用三親轉(zhuǎn)化法對菲降解菌Pseudomonas sp.JM2進行GFP標(biāo)記。將小麥根部培養(yǎng)在JM2-gfp菌懸液中,4 d便可在根表形成穩(wěn)定的菲降解菌生物膜。生物膜形態(tài)表征結(jié)果表明,細菌通過自身分泌的絲狀的物質(zhì)與根表皮細胞緊密結(jié)合,且其在根系分泌物含量豐富、生長狀態(tài)穩(wěn)定的根部成熟區(qū)、伸長區(qū)、根毛上菌體密度更大。建立的根表生物膜活性至少可以保持15 d,此外,生物膜中的菲降解菌能進一步定殖到小麥根和莖葉內(nèi)。(3)溫室水培實驗結(jié)果證明:根表菲降解菌生物膜能顯著降低小麥根、莖葉內(nèi)菲積累量,效果分別為71.96%和89.01%;并且顯著降低小麥體內(nèi)菲的傳導(dǎo)系數(shù)TF,效果達61.77%;還能夠促進小麥的生長,提高葉片內(nèi)POD、SOD酶活以及葉綠素含量。基于以上研究,可以證實根表菲降解菌生物膜能夠有效阻控菲在小麥體內(nèi)的富集,降低小麥污染風(fēng)險,這在污染土壤中生產(chǎn)安全的農(nóng)產(chǎn)品及污染農(nóng)田土壤的生物修復(fù)領(lǐng)域具備一定的應(yīng)用前景,也為植物-微生物的互作理論研究提供了有效的模型體系。
【學(xué)位授予單位】:大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S512.1

【參考文獻】

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本文編號:2687781

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