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功能性內(nèi)生菌的篩選及其對水稻幼苗生長的影響

發(fā)布時間:2020-05-22 23:08
【摘要】:在我國南方,水稻一直是人們維持生計的重要的糧食作物,想要解決人們的溫飽問題就要盡可能的提高水稻的產(chǎn)量并實現(xiàn)豐收,但是,單純的依靠過度使用化肥農(nóng)藥來盲目提高單產(chǎn)往往是盲目的,可能不會短時間的造成各種損害,但是隨著時間的推移所造成的弊端也會越來越顯現(xiàn),土壤結(jié)構(gòu)被破壞,農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)和結(jié)實率下降,而且水稻在種植過程中也會滋生各種病害,嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量。而微生物肥料在一定程度上能夠降低化肥農(nóng)藥所帶來的風(fēng)險,并且還能促進(jìn)水稻生長,改善品質(zhì)。本研究以中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院庫藏的46株菌種為材料,依據(jù)菌種的生長特性,分別采用TSA、YMA和R_2A三種培養(yǎng)基對其進(jìn)行活化,通過16S rRNA基因序列分析進(jìn)行復(fù)核鑒定,同時開展溶磷、產(chǎn)IAA、產(chǎn)鐵載體及ACC-脫氨酶、拮抗等的功能性試驗,并對功能菌株進(jìn)行溶血檢測,篩選出具有促生、抗病功能、且安全的菌株;對篩選出的功能菌株進(jìn)行盆栽試驗,獲得對水稻幼苗促生效果優(yōu)良的菌株;進(jìn)一步對優(yōu)良菌株進(jìn)行發(fā)酵試驗,優(yōu)化發(fā)酵條件;最后制成微生物菌劑,并進(jìn)行大田育苗試驗,從而為水稻特用的微生物肥料的生產(chǎn)提供理論依據(jù)和優(yōu)良的菌株資源,對提高水稻產(chǎn)量和質(zhì)量具有重要意義。研究結(jié)果如下:(1)通過功能性試驗,篩選出對水稻的生長有益的菌株,其中21株具有產(chǎn)鐵能力的菌株,2株既能溶解有機(jī)磷又能溶解無機(jī)磷的菌株,12株對番茄青枯病菌有拮抗作用,4株對丁香假單胞菌有拮抗作用,18株對稻瘟病原菌有拮抗作用,2株對煙草疫霉有拮抗作用,24株菌能較好的產(chǎn)生IAA,另有7株菌具有ACC脫氨酶活性。(2)通過血平板試驗對篩選出的水稻促生功能菌株做安全性評價試驗,其中15株菌有溶血現(xiàn)象,會對動物的安全產(chǎn)生影響;31株菌株無溶血現(xiàn)象,在水稻生產(chǎn)過程中是安全的。(3)將10株綜合功能較好的菌株進(jìn)行盆栽試驗,編號為ACCC11025、HMC50、YC37和YC41的4株菌對水稻苗的根長、莖長、根重以及總鮮重上都優(yōu)于空白對照,并存在顯著差異。(4)對選出的4株菌進(jìn)行發(fā)酵試驗,確定發(fā)酵的最優(yōu)條件表現(xiàn)為:YC41的最適鹽濃度為1.0%,最適pH值為6,最適生長溫度為30℃;ACCC11025的最適鹽濃度為0.5%,最適pH值為8,最適生長溫度為25℃;HMC50的最適鹽濃度為0.2%,最適pH值為8,最適生長溫度為35℃;YC37的最適鹽濃度為0%,最適pH值為9,最適生長溫度為30℃。(5)將制成的微生物菌劑應(yīng)用于大田育秧試驗,通過對根長、莖長、根重和單株重的測量分析表明,微生物菌劑對水稻幼苗的生長起到了一定的促進(jìn)作用,尤其是施加了菌劑的水稻幼苗根重與不施加菌劑的幼苗根重相比具有顯著差異,且須根較發(fā)達(dá)。本文中對菌種保藏中心的46株菌進(jìn)行功能評價以及安全性評價后共篩選出10株菌進(jìn)行盆栽試驗。最終的結(jié)果表明ACCC11025、YC37、YC41和HMC50這四株菌的促生效果較好。對這四株菌進(jìn)行發(fā)酵條件的優(yōu)化,其中包括溫度、pH值和鹽濃度這三個方面,將這四株菌制成菌劑后施加到黑龍江省哈爾濱市農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗基地,發(fā)現(xiàn)在施加了本試驗中制成的菌劑后同時配合施用一定的壯秧劑后水稻幼苗在根重以及須根的數(shù)量上明顯比僅使用壯秧劑的水稻幼苗的生長狀況要好。
【圖文】:

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,無水乙醇


不同濃度的 IAA 配置如下:度定量: 250mg/L:0.025gIAA+100ml 無水乙醇200mg/L:8.0ml 250mg/L IAA+2.0ml 無水乙醇150mg/L:6.0ml 250mg/L IAA+4.0ml 無水乙醇100mg/L:4.0ml 250mg/L IAA+6.0ml 無水乙醇50mg/L: 2.0ml 250mg/L IAA+8.0ml 無水乙醇35mg/L: 1.4ml 250mg/L IAA+8.6ml 無水乙醇30mg/L: 1.2ml 250mg/L IAA+8.8ml 無水乙醇25mg/L: 1.0ml 250mg/L IAA+9.0ml 無水乙醇0.0mg/L: 10.0ml 無水乙醇準(zhǔn)曲線如下:表 2-3 純 3-IAA 數(shù)據(jù)統(tǒng)計Tab.2-3 3-IAAdata statistics) 0 25 30 35 50 100 150 200.048 0.338 0.351 0.587 0.64 1.135 1.574 2.0

標(biāo)準(zhǔn)曲線,丁酸,標(biāo)準(zhǔn)曲線,總蛋白質(zhì)


80 0.59 0.57 0.56 0.57100 0.66 0.66 0.68 0.67如圖2-2為上述平均值減去0.11所繪的α㧟酮丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖2-2 α㧟酮丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2-2 Standard curve of α-keto-butyric acid(ul)(min)(ul)(mg)α-(umol)(U/mg)測酶活時所用的體積酶活反應(yīng)時間測總蛋白質(zhì)時所取的體積總蛋白質(zhì)含量生成丁酮酸物質(zhì)的量酶比活力××=
【學(xué)位授予單位】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S511

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本文編號:2676756

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