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黃淮稻區(qū)粳稻種質(zhì)資源品質(zhì)相關(guān)性狀篩查及品質(zhì)差異機理初步研究

發(fā)布時間:2020-04-18 16:13
【摘要】:稻米品質(zhì)包括加工品質(zhì)、外觀品質(zhì)、蒸煮與食味品質(zhì)和營養(yǎng)品質(zhì)。品質(zhì)性狀大多是由多基因控制的數(shù)量性狀,遺傳較為復(fù)雜,而且很大程度上受到外界環(huán)境條件的影響,闡明品種間品質(zhì)差異形成的機理,能為稻米品質(zhì)改良提供理論指導(dǎo)。本研究首先對208份黃淮稻區(qū)粳稻種質(zhì)資源加工品質(zhì)、外觀品質(zhì)、蒸煮食味品質(zhì)、RVA粘度特性等各個品質(zhì)性狀進行測定,對208份種質(zhì)資源品質(zhì)進行系統(tǒng)評價并對其品質(zhì)性狀相關(guān)性進行分析,然后篩選出品質(zhì)性狀差異較大的2個種質(zhì)材料拉木加和水晶3號,通過高通量測序技術(shù)對拉木加和水晶3號開花后7天、14天籽粒中的基因表達進行差異分析,找出可能影響品質(zhì)差異的調(diào)控途徑。主要結(jié)果如下:1.208份種質(zhì)資源材料在主要品質(zhì)性狀上具有較大變異系數(shù),來源廣泛、遺傳多樣性豐富。各品質(zhì)指標之間存在顯著的相關(guān)關(guān)系,其中兩個堊白指標(堊白粒率和堊白度)與長寬比、堿消值和食味值存在極顯著相關(guān)關(guān)系;堿消值分別與其它品質(zhì)指標都存在極顯著相關(guān)關(guān)系。根據(jù)農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準《食用稻品種品質(zhì)》NY/T-593-2013對種質(zhì)資源品質(zhì)評價發(fā)現(xiàn)日本晴、新豐6號、水晶3號等品質(zhì)綜合表現(xiàn)較好,半節(jié)芒、黃殼早甘、立新粳等品質(zhì)綜合表現(xiàn)較差。2.RVA譜特征值與其它品質(zhì)指標的相關(guān)性分析表明:直鏈淀粉含量、膠稠度、糊化溫度和食味值都與RVA特征值存在較強的相關(guān)性;RVA特征值中HPV、CPV、SBV、CSV與精米率和整精米率呈極顯著負相關(guān)性;BDV、PeT、PKV、PaT與堊白粒率和堊白度存在顯著負相關(guān)性;PaT與糙米率存在極顯著負相關(guān)性,而與堊白粒率和堊白度存在極顯著正相關(guān)性。3.通過對兩個品質(zhì)性狀存在顯著差異的品種拉木加(Lamujia)和水晶3號(Shuijing3)高通量測序,并對轉(zhuǎn)錄組結(jié)果進行分析;ê7天籽粒樣品中共發(fā)現(xiàn)3376個差異表達基因,其中包括1670個基因表達上調(diào)和1706個基因表達下調(diào);在花后14天籽粒樣品中共發(fā)現(xiàn)1559個差異表達基因,包括618個基因表達上調(diào)和941個基因表達下調(diào)。GO富集分析結(jié)果表明,花后7天籽粒差異表達基因的生物過程主要富集在對溫度刺激響應(yīng)、海藻糖合成及代謝過程、激素介導(dǎo)及信號傳導(dǎo)途徑;差異基因參與的分子功能主要富集在一些轉(zhuǎn)錄因子活性和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活動等;細胞組成富集在細胞核。花后14天籽粒差異表達基因的生物過程主要富集在果實和種子發(fā)育、對溫度刺激響應(yīng)等;差異基因參與的分子功能富集在木葡糖基轉(zhuǎn)移酶活性、水解酶活性、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活動;與花后7天籽粒差異表達基因不同,花后14天籽粒差異表達基因的細胞組成富集在質(zhì)膜和細胞壁。KEGG富集分析結(jié)果表明:花后7天和花后14天籽粒的差異表達基因分別位于114個和109個KEGG Pathway代謝途徑中。其中花后7天籽粒DEGs主要富集在核糖體、植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的加工、淀粉和蔗糖代謝等過程;花后14天籽粒DEGs富集在碳代謝、氨基酸的生物合成、植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、核糖體等過程,富集于以上通路的差異基因很可能參與拉木加和水晶3號差異品質(zhì)性狀的形成。
【圖文】:

貯藏蛋白基因,賴氨酸含量,貯藏蛋白,谷蛋白


圖 1-1 ECQ 相關(guān)基因調(diào)控關(guān)系[67]Fig1-1ECQ-related gene regulatory network 營養(yǎng)品質(zhì)藏蛋白與稻米營養(yǎng)品質(zhì)關(guān)系密切,包括谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白、球蛋白等 4 大谷蛋白首先在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成谷蛋白的前體,,然后被運送到蛋白質(zhì)儲存囊泡加工成成OsRab5A 對貯藏蛋白向蛋白體 II(PBII)的運輸中發(fā)揮著重要作用[69]。OsVPS9A 與 Os節(jié)水稻中貯藏蛋白轉(zhuǎn)運到胚乳細胞[70]。RISBZ1 和 RPBF 是水稻種子貯藏蛋白基因的,雙敲除抑制(KD)突變體(KD-RISBZ1 / KD-RPBF)導(dǎo)致大多數(shù)貯藏蛋白基因表顯著減少,貯藏脂質(zhì)也以降低的水平積累[71]。Peng 等發(fā)現(xiàn) qPC1 編碼一個氨基酸通P6 是一個控制水稻種子蛋白質(zhì)含量的正調(diào)控因子,同時也對氨基酸組成具有重要影響氨酸(Lys)和甲硫氨酸(Met)是谷物中最缺乏的必需氨基酸,雙功能賴氨酸降解酶 LK物中控制游離賴氨酸含量的主要調(diào)節(jié)子[73]。在水稻中高表達兩個內(nèi)源富含賴氨酸的1 和 RLRH2,測定種子中賴氨酸含量提高了 35%[74]。YANG 等[75]通過表達反饋抑制

曲線,直鏈淀粉含量,測定標準,曲線


用馬鈴薯直鏈淀粉標準品(sigma 公司)和支鏈淀粉標準品(Solarbio 公司)光光度計 720nm 比色測定吸光度(OD)值,根據(jù)直鏈淀粉含量和對應(yīng) OD3-1;備樣品溶液。準確稱取 50.00mg 樣品米粉小心放入 50ml 離心管底部,加入 5米粉充分分散。加入 4.5ml 的 1mol/L 的 NaOH 溶液,搖晃均勻,迅速放入沸取出,冷卻至室溫加水定容至 50ml。蓋好離心管蓋,上下顛倒、震蕩充分備待測樣品。移液器準確移取 1000μl 樣品溶液,加入 20ml 離心管中。再加 的乙酸溶液,使樣品酸化。加入 300μl 碘液,蒸餾水定容,室溫下靜置 20minl/L 的 NaOH 溶液替代樣品制備空白溶液;空白溶液在分光光度計 720nm 處比色并調(diào)零,待測樣品比色測定吸光度值,;據(jù)標準曲線求出測試樣品直鏈淀粉含量;復(fù)(3)、(4)、(5)步驟,保證試驗結(jié)果相對相差小于 1%,并保證每個效重復(fù)。
【學(xué)位授予單位】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S511.22

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10 班俊,褚孟Z

本文編號:2632275


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