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甘藍(lán)型油菜花青素易誘導(dǎo)突變體as的鑒定及對(duì)逆境脅迫的響應(yīng)

發(fā)布時(shí)間:2020-04-12 13:33
【摘要】:花青素作為植物中最重要的天然色素之一,不僅有利于植物傳粉和種子傳播,也有益于人體健康,而且在植物逆境脅迫方面也發(fā)揮重要作用。本研究以前期獲得的甘藍(lán)型油菜花青素易誘導(dǎo)突變體as(anthocyanin-susceptible)為研究對(duì)象,采用突變體性狀變化調(diào)查和蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法,探討花青素易誘導(dǎo)突變體as突變的分子機(jī)制和生理變化;ㄇ嗨匾渍T導(dǎo)突變體as為甘藍(lán)型油菜中雙11的自然突變體,其在苗期、抽薹期和成熟期均易產(chǎn)生花青素,在植株不同部位呈現(xiàn)紫色,野生型則無(wú)此表型。運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)分析自然生長(zhǎng)環(huán)境下突變體和野生型幼苗葉片的蛋白表達(dá)譜,共檢測(cè)到32個(gè)在兩種材料中至少表現(xiàn)出1.5倍的差異蛋白點(diǎn),經(jīng)鑒定分析這些差異蛋白與花青素合成以及與植物應(yīng)對(duì)冷、鹽、水分、重金屬離子等非生物脅迫和病原菌侵染的生物脅迫響應(yīng)有關(guān)。根據(jù)質(zhì)譜分析結(jié)果對(duì)突變體應(yīng)對(duì)漬水和核盤(pán)菌侵染等逆境響應(yīng)進(jìn)行了初步研究。研究結(jié)果表明在發(fā)芽期和苗期漬水脅迫,花青素易誘導(dǎo)突變體as植株出現(xiàn)紫色表型,花青素合成早于野生型。對(duì)發(fā)芽期漬水24h后生長(zhǎng)8d幼苗葉片進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析,結(jié)果顯示差異基因與植物超敏反應(yīng)、激酶活性、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑以及能量代謝等有關(guān)。苗期測(cè)定漬水12d野生型和突變體葉片相關(guān)生理指標(biāo),結(jié)果表明與野生型相比,花青素易誘導(dǎo)突變體as葉綠素含量明顯下降,花青素和丙二醛含量顯著提高,可溶性糖和可溶性蛋白含量也呈現(xiàn)差異。此外,苗期菌核病抗性實(shí)驗(yàn)顯示核盤(pán)菌在侵染花青素易誘導(dǎo)突變體葉片時(shí)菌絲生長(zhǎng)緩慢,被限制在接菌部位附近,且突變體葉片的細(xì)胞損傷或細(xì)胞死亡明顯輕于野生型,這表明花青素易誘導(dǎo)突變體as可以抵御核盤(pán)菌的侵染。這些結(jié)果為我們下一步克隆突變基因和研究突變的分子機(jī)理提供證據(jù)。
【圖文】:

示意圖,花青素,生物合成途徑,擬南芥


圖 1.1 擬南芥花青素生物合成途徑示意圖[60]ematic diagram of the anthocyanin biosynthetic pathway in Arabid素的合成與調(diào)控網(wǎng)絡(luò)十分復(fù)雜,外界環(huán)境因子(如紫外植物激素(如生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、ABA、茉莉酸以及6、miR165 /166 和 miR778 等)以及營(yíng)養(yǎng)條件(如蔗糖,花青素合成積累[62-69]。許多編碼花青素的生物合成酶主要通過(guò)調(diào)節(jié)不同結(jié)構(gòu)基因在轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平素如光,溫度,糖和激素等也會(huì)對(duì)其表達(dá)產(chǎn)生影響。細(xì)胞分裂素、乙烯、茉莉酸、脫落酸和赤霉酸)與蛋白合成過(guò)程中的作用[70]。幾個(gè)遺傳突變體已被分離,,這青素生物合成的影響。例如,ein2 突變體中高水平的 A累較高的原因[71],多種外界刺激激活擬南芥 icx1 突變類(lèi)基因可能受到非光誘導(dǎo)途徑調(diào)控進(jìn)而影響花青素的合

示意圖,花青素,生物合成基因,蔗糖


江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文YB-bHLH-WD40 轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合物不穩(wěn)定,進(jìn)而直接抑制花青素生物合成基因的表調(diào)控花青素積累。在缺磷條件下,miR828 通過(guò) TAS4 介導(dǎo)調(diào)控 PAP1/MYB75、/MYB90和MYB113的表達(dá)進(jìn)而調(diào)節(jié)花青素的生物合成。miR858通過(guò)靶向MYB1花青素合成。miR165/166 負(fù)調(diào)控花青素的合成。在缺磷條件下過(guò)表達(dá) miR778 也進(jìn)花青素的積累[63-66]。
【學(xué)位授予單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:S565.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2624775

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