小麥麩皮水浸提液中抑藻物質分離與鑒定
發(fā)布時間:2021-12-24 23:10
前期研究表明小麥麩皮水浸提液(WBL)具有很好的抑藻作用。但是,由于小麥麩皮中含有豐富的氮、磷,直接投入水體會加重水體富營養(yǎng)化。因此,將小麥麩皮中的有效抑藻物質進行分離尤其重要。本文針對小麥麩皮水浸提液中有效抑藻物質的分離與鑒定展開研究,主要研究結果歸納如下:通過用萃取、大孔吸附樹脂、葡聚糖凝膠逐步對小麥麩皮水浸提液有效抑藻組分進行分離,逐步縮小有效抑藻組分的范圍。通過用三氯甲烷萃取并進行抑藻試驗,初步分離的有效抑藻組分分別存在于水相和有機相中。再將水相部分用大孔吸附樹脂進行分離,用乙醇進行梯度洗脫并進行抑藻實驗,結果表明有效抑藻組分存在于水洗溶液部分。進一步將水洗溶液部分用葡聚糖凝膠進行分離,30%乙醇進行洗脫并進行抑藻實驗,確定有效抑藻組分存在于樣品NO.5、樣品NO.7和樣品NO.8中。將分離的各個有效抑藻組分進行HPLC-MS檢測,并將檢測結果與已知物質進行比對,查閱文獻,用標準物質進行抑藻實驗,現已確定了油酸酰胺和L-纈氨酸的抑藻效果,兩者的EC50濃度分別為6.00mg/L和19.25mg/L。對油酸酰胺的抑藻機理進行初步探討后發(fā)現,油酸酰胺脅迫能顯著降低細胞中Chla的含...
【文章來源】:湖南農業(yè)大學湖南省
【文章頁數】:85 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 前言
1.1 水體富營養(yǎng)化的現狀和危害
1.2 藍藻和藍藻水華
1.3 微囊藻屬及其主要種類
1.4 藍藻水華的控制
1.5 生化除藻的應用
1.6 生物源抑藻物質國內外研究進展
1.7 研究目的和意義
第二章 小麥麩皮水浸提液中有效抑藻組分的分離與鑒定
2.1 材料與方法
2.1.1 實驗材料
2.1.2 主要儀器設備
2.1.3 小麥麩皮水浸提液(WBL)的制備
2.1.4 小麥麩皮水浸提液(WBL)的萃取
2.1.5 藻種培養(yǎng)液的配制
2.1.6 D101大孔吸附樹脂洗脫樣品
2.1.7 葡聚糖凝膠洗脫樣品
2.1.8 藻種培養(yǎng)與實驗處理
2.1.9 HPLC洗脫條件
2.1.10 MS檢測條件
2.1.11 對M aeruginosa NIES-843生長的影響
2.1.12 葉綠素a(Chla)和類胡蘿卜素(Car)含量的測定
2.1.13 相對抑制率的計算
2.1.14 統(tǒng)計與分析
2.2 結果
2.2.1 WBL萃取各相抑藻實驗結果
2.2.2 大孔吸附樹脂分離樣品抑藻實驗結果
2.2.3 葡聚糖凝膠分離樣品抑藻實驗結果
2.2.4 HPLC-MS鑒定結果
2.3 討論
第三章 兩種從WBL中分離物質的抑藻效果研究
3.1 材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 油酸酰胺和L-纈氨酸母液的制備
3.1.3 藻種培養(yǎng)與實驗處理
3.1.4 對M.aeruginosa NIES-843生長的影響
3.1.5 Chla和Car含量的測定
3.1.6 相對抑制率的計算
3.1.7 葉綠素光誘導熒光多相瞬態(tài)上升動力學的測定
3.1.8 葉綠素熒光多相瞬態(tài)上升動力學參數分析
3.1.9 油酸酰胺對M.aeruginosa NIES-843超微結構的影響
3.1.10 RNA提取
3.1.11 統(tǒng)計與分析
3.2 結果
3.2.1 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843生長的影響
3.2.2 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843細胞色素含量的影響
3.2.3 油酸酰胺脅迫下M.aeruginosa NIES-843葉綠素光誘導熒光動力學特
3.2.4 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843葉綠素最小熒光F_0值的影響
3.2.5 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843 PS Ⅱ單位反應中心能量流比活性能參數的影響
3.2.6 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843 PS Ⅱ能量流動分配比率的影響
3.2.7 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843超微結構的影響
3.2.8 RNA抽提及逆轉錄
3.2.9 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843脂肪酸合成基因表達的影響
3.2.10 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843不飽和脂肪酸合成基因表達的影響
3.2.11 L-纈氨酸對M.aeruginosa NIES-843的抑制效果
3.3 討論
3.3.1 油酸酰胺抑藻實驗結果討論
3.3.2 L-纈氨酸抑藻實驗結果討論
第四章 幾種物質的抑藻效果研究
4.1 材料與方法
4.1.1 實驗材料
4.1.2 母液的制備
4.1.3 藻種培養(yǎng)與實驗處理
4.1.4 Chla和Car含量的測定方法
4.1.5 槲皮素對M.aeruginosa NIES-843生長的影響
4.1.6 相對抑制率的計算
4.1.7 統(tǒng)計與分析
4.2 結果
4.2.1 丁香酸抑藻實驗結果
4.2.2 丹寧酸抑藻實驗結果
4.2.3 槲皮素抑藻實驗結果
4.2.4 L-苯丙氨酸抑藻實驗結果
4.3 討論
4.3.1 丁香酸抑藻實驗結果討論
4.3.2 丹寧酸抑藻實驗結果討論
4.3.3 槲皮素抑藻實驗結果討論
4.3.4 L-苯丙氨酸抑藻實驗結果討論
第五章 結語
5.1 總結
5.2 主要創(chuàng)新點
5.3 研究展望
參考文獻
致謝
在讀期間科研學術成果目錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]成都市郫縣地區(qū)景觀水體水質調查與營養(yǎng)狀態(tài)評價[J]. 稅永紅,蔣學軍,周宇,李巧巧,宋紅艷. 四川師范大學學報(自然科學版). 2009(06)
[2]上海市10個城市公園景觀水體富營養(yǎng)化評價[J]. 程婧蕾,王麗卿,季高華,張瑞雷,范志鋒. 上海海洋大學學報. 2009(04)
[3]兩種沉水植物浸提液對斜生柵藻的化感效應[J]. 楊琳,吳偉,胡庚東,瞿建宏,陳家長,李成君. 農業(yè)環(huán)境科學學報. 2008(04)
[4]蘆葦化感物質對藻類細胞膜選擇透性的影響[J]. 李鋒民,胡洪營,種云霄,郭美婷,門玉潔. 環(huán)境科學. 2007(11)
[5]蘆葦化感物質EMA對銅綠微囊藻生長及藻毒素產生和釋放的影響[J]. 門玉潔,胡洪營. 環(huán)境科學. 2007(09)
[6]中國淡水微囊藻屬常見種類的分類學討論——以滇池為例[J]. 虞功亮,宋立榮,李仁輝. 植物分類學報. 2007(05)
[7]2-甲基乙酰乙酸乙酯對藻細胞膜和亞顯微結構的影響[J]. 李鋒民,胡洪營,種云霄,門玉潔,郭美婷. 環(huán)境科學. 2007(07)
[8]蘆葦化感物質EMA對銅綠微囊藻生理特性的影響[J]. 李鋒民,胡洪營,種云霄,門玉潔,郭美婷. 中國環(huán)境科學. 2007(03)
[9]滇池水環(huán)境退化與區(qū)域內物種多樣性的喪失[J]. 羅民波,段昌群,沈新強,楊良. 海洋漁業(yè). 2006(01)
[10]小麥麩皮的功能成分及加工利用現狀[J]. 王旭峰,何計國,陶純潔,單秀峰. 糧食與食品工業(yè). 2006(01)
本文編號:3551362
【文章來源】:湖南農業(yè)大學湖南省
【文章頁數】:85 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 前言
1.1 水體富營養(yǎng)化的現狀和危害
1.2 藍藻和藍藻水華
1.3 微囊藻屬及其主要種類
1.4 藍藻水華的控制
1.5 生化除藻的應用
1.6 生物源抑藻物質國內外研究進展
1.7 研究目的和意義
第二章 小麥麩皮水浸提液中有效抑藻組分的分離與鑒定
2.1 材料與方法
2.1.1 實驗材料
2.1.2 主要儀器設備
2.1.3 小麥麩皮水浸提液(WBL)的制備
2.1.4 小麥麩皮水浸提液(WBL)的萃取
2.1.5 藻種培養(yǎng)液的配制
2.1.6 D101大孔吸附樹脂洗脫樣品
2.1.7 葡聚糖凝膠洗脫樣品
2.1.8 藻種培養(yǎng)與實驗處理
2.1.9 HPLC洗脫條件
2.1.10 MS檢測條件
2.1.11 對M aeruginosa NIES-843生長的影響
2.1.12 葉綠素a(Chla)和類胡蘿卜素(Car)含量的測定
2.1.13 相對抑制率的計算
2.1.14 統(tǒng)計與分析
2.2 結果
2.2.1 WBL萃取各相抑藻實驗結果
2.2.2 大孔吸附樹脂分離樣品抑藻實驗結果
2.2.3 葡聚糖凝膠分離樣品抑藻實驗結果
2.2.4 HPLC-MS鑒定結果
2.3 討論
第三章 兩種從WBL中分離物質的抑藻效果研究
3.1 材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 油酸酰胺和L-纈氨酸母液的制備
3.1.3 藻種培養(yǎng)與實驗處理
3.1.4 對M.aeruginosa NIES-843生長的影響
3.1.5 Chla和Car含量的測定
3.1.6 相對抑制率的計算
3.1.7 葉綠素光誘導熒光多相瞬態(tài)上升動力學的測定
3.1.8 葉綠素熒光多相瞬態(tài)上升動力學參數分析
3.1.9 油酸酰胺對M.aeruginosa NIES-843超微結構的影響
3.1.10 RNA提取
3.1.11 統(tǒng)計與分析
3.2 結果
3.2.1 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843生長的影響
3.2.2 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843細胞色素含量的影響
3.2.3 油酸酰胺脅迫下M.aeruginosa NIES-843葉綠素光誘導熒光動力學特
3.2.4 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843葉綠素最小熒光F_0值的影響
3.2.5 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843 PS Ⅱ單位反應中心能量流比活性能參數的影響
3.2.6 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843 PS Ⅱ能量流動分配比率的影響
3.2.7 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843超微結構的影響
3.2.8 RNA抽提及逆轉錄
3.2.9 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843脂肪酸合成基因表達的影響
3.2.10 油酸酰胺脅迫對M.aeruginosa NIES-843不飽和脂肪酸合成基因表達的影響
3.2.11 L-纈氨酸對M.aeruginosa NIES-843的抑制效果
3.3 討論
3.3.1 油酸酰胺抑藻實驗結果討論
3.3.2 L-纈氨酸抑藻實驗結果討論
第四章 幾種物質的抑藻效果研究
4.1 材料與方法
4.1.1 實驗材料
4.1.2 母液的制備
4.1.3 藻種培養(yǎng)與實驗處理
4.1.4 Chla和Car含量的測定方法
4.1.5 槲皮素對M.aeruginosa NIES-843生長的影響
4.1.6 相對抑制率的計算
4.1.7 統(tǒng)計與分析
4.2 結果
4.2.1 丁香酸抑藻實驗結果
4.2.2 丹寧酸抑藻實驗結果
4.2.3 槲皮素抑藻實驗結果
4.2.4 L-苯丙氨酸抑藻實驗結果
4.3 討論
4.3.1 丁香酸抑藻實驗結果討論
4.3.2 丹寧酸抑藻實驗結果討論
4.3.3 槲皮素抑藻實驗結果討論
4.3.4 L-苯丙氨酸抑藻實驗結果討論
第五章 結語
5.1 總結
5.2 主要創(chuàng)新點
5.3 研究展望
參考文獻
致謝
在讀期間科研學術成果目錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]成都市郫縣地區(qū)景觀水體水質調查與營養(yǎng)狀態(tài)評價[J]. 稅永紅,蔣學軍,周宇,李巧巧,宋紅艷. 四川師范大學學報(自然科學版). 2009(06)
[2]上海市10個城市公園景觀水體富營養(yǎng)化評價[J]. 程婧蕾,王麗卿,季高華,張瑞雷,范志鋒. 上海海洋大學學報. 2009(04)
[3]兩種沉水植物浸提液對斜生柵藻的化感效應[J]. 楊琳,吳偉,胡庚東,瞿建宏,陳家長,李成君. 農業(yè)環(huán)境科學學報. 2008(04)
[4]蘆葦化感物質對藻類細胞膜選擇透性的影響[J]. 李鋒民,胡洪營,種云霄,郭美婷,門玉潔. 環(huán)境科學. 2007(11)
[5]蘆葦化感物質EMA對銅綠微囊藻生長及藻毒素產生和釋放的影響[J]. 門玉潔,胡洪營. 環(huán)境科學. 2007(09)
[6]中國淡水微囊藻屬常見種類的分類學討論——以滇池為例[J]. 虞功亮,宋立榮,李仁輝. 植物分類學報. 2007(05)
[7]2-甲基乙酰乙酸乙酯對藻細胞膜和亞顯微結構的影響[J]. 李鋒民,胡洪營,種云霄,門玉潔,郭美婷. 環(huán)境科學. 2007(07)
[8]蘆葦化感物質EMA對銅綠微囊藻生理特性的影響[J]. 李鋒民,胡洪營,種云霄,門玉潔,郭美婷. 中國環(huán)境科學. 2007(03)
[9]滇池水環(huán)境退化與區(qū)域內物種多樣性的喪失[J]. 羅民波,段昌群,沈新強,楊良. 海洋漁業(yè). 2006(01)
[10]小麥麩皮的功能成分及加工利用現狀[J]. 王旭峰,何計國,陶純潔,單秀峰. 糧食與食品工業(yè). 2006(01)
本文編號:3551362
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