油棕（Elaeis guineensis Jacg）,屬棕櫚科油棕,多年生常綠喬木,為典型的熱帶油料植物。油棕中果皮是目前所報(bào)道的含油率最高的植物組織類型。在我國,油棕主要分布在海南地區(qū),是海南最具特色的熱帶經(jīng)濟(jì)作物之一。MicroRNA（miRNAs）是一類內(nèi)源性、非編碼的單鏈小RNA,在植物生長發(fā)育過程中起重要的調(diào)控作用。本實(shí)驗(yàn)以前期大規(guī)模轉(zhuǎn)錄組測序中篩選得到的油棕microRNA5179（Eg-miR5179）作為研究對象,通過表達(dá)載體的構(gòu)建、轉(zhuǎn)基因、轉(zhuǎn)錄組測序、生物信息學(xué)分析和代謝產(chǎn)物含量分析的方法深入解析了 Eg-miR5179在植物中的分子作用機(jī)制,取得的主要研究結(jié)果如下:1.以野生型擬南芥miR319前體（pre-miR319a）為骨架,通過置換PCR將Eg-miR5179的成熟體及星號序列成功替換到擬南芥miR319骨架中,通過擬南芥中對其miR319的自身切割作用,從而獲得成熟體Eg-miR5179;構(gòu)建植物表達(dá)載體35S:pHQSN-miR5179,并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中;對獲得的轉(zhuǎn)基因植株中Eg-miR5179的表達(dá)分析表明:與對照相比Eg-miR517... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ｍｉＲＮＡ在植物和動物體內(nèi)的生物合成（Ｍｉｌｌａｒ?ｅｔ?ａｌ．，２００５）??Ｆｉｇ．１－１?ｍｉＲＮＡ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｉｎ?ｐｌａｎｔｓ?ａｎｄ?ａｎｉｍａｌｓ?（Ｍｉｌｌａｒ?ｅｔ?ａｌ．，?２００５）??２．２植物ｍｉＲＮＡ的生物學(xué)功能??

沉默現(xiàn)象相關(guān)。Ｃａｒｒｉｎｇｔｏｎ等人首次成功地在擬南芥中克隆出ｍｉＲＮＡ之后，研究者們相繼發(fā)??現(xiàn)ｍｉＲＮＡ可以調(diào)節(jié)植物的多種生理活動。ｍｉＲＮＡ的功能及作用主要有三個方面：生長發(fā)育相??關(guān)、環(huán)境脅迫調(diào)控相關(guān)和激素分泌調(diào)節(jié)相關(guān)。圖１－２中列舉出一些與植物各器官發(fā)育相關(guān)的??ｍｉＲＮＡ，可以看出植物中各個器官均由不同的ｍｉＲＮＡ來調(diào)控。如ｍｉＲ１６５、ｍｉＲ１６６在植物根、??莖、花的發(fā)育過程中均有調(diào)節(jié)作用，而ｍｉＲ１５６也可以同時調(diào)控莖、葉、花的生長發(fā)育。這些??ｍｉＲＮＡ在植物生長發(fā)育過程中發(fā)揮著調(diào)節(jié)細(xì)胞早期發(fā)育、參與細(xì)胞分化和組織發(fā)育等作用??（Ｌｅｌａｎｄａｉｓ－Ｂｒｉｅｒｅ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１０；?Ｌｖ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１３?）〇??Ｚ?ｍｉＲ１５６，?ｍｉＲＩ７２，??ｍｉＲ１５９，?ｍｉＲ３�。梗�??ｍｉＲ！６４．??ｍｉＲｌ?６５／１６６??■?／?ｆｉ???＾?ｍｉＲｌ?５６，?ｍｉＲｌ６６??ｍｉＲ１５６－．?ｍｉＲｌ６４，??ｍｉＲ３１９

ａｐ－ｍ圖２－１置換ＰＣＲ示意圖??Ｆｉｇ．?２－１?Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ＰＣＲ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ??表２－５人工構(gòu)建ｍｉＲＮＡ用到的引物序列??ａｂｌｅ?２－５?Ｄｅｓｉｇｎｅｄ?ｐｒｉｍｅｒｓ?ｏｆ?ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ?ｍｉＲＮＡ?ｕｓｅｄ?ｉｎ?ｔｈｉｓ?ｓｔｕｄ引物?序列（５，－３，）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物microRNA的研究進(jìn)展[J]. 呂帝瑾,趙佳媛,陳婧,鐘揚(yáng),南蓬.  植物生理學(xué)報(bào). 2013(09)



本文編號：3510209