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乙烯脅迫下橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜蛋白質(zhì)組分析

發(fā)布時(shí)間:2021-11-06 08:49
  天然橡膠產(chǎn)生的部位主要是橡膠樹(shù)(Hevea brasiliensis Muell.Arg)樹(shù)皮,乙烯(ethylene)脅迫會(huì)促進(jìn)橡膠樹(shù)樹(shù)皮產(chǎn)排膠的過(guò)程,目前已有多種乙烯促進(jìn)橡膠樹(shù)增產(chǎn)的機(jī)制和假說(shuō)被提出,但是鮮有在質(zhì)膜蛋白質(zhì)組水平上闡明乙烯作用機(jī)制的報(bào)道。本研究以2年生芽接無(wú)性系’熱研7-33-97’橡膠樹(shù)樹(shù)皮為材料,采用兩相分配法提取橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜,通過(guò)標(biāo)志酶活性檢測(cè)、電鏡檢測(cè)和蛋白濃度檢測(cè),對(duì)不同兩相體系純化質(zhì)膜效果進(jìn)行比較,確立了橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜的最適提取方法。質(zhì)膜提取物經(jīng)Brij58翻轉(zhuǎn)洗脫液處理后,使用SDS裂解緩沖液、尿素裂解緩沖液、甲醇裂解緩沖液,對(duì)質(zhì)膜蛋白進(jìn)行裂解,運(yùn)用液相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)對(duì)橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜蛋白進(jìn)行鑒定,比較不同裂解方法鑒定的質(zhì)膜蛋白數(shù)量,篩選最適合橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜蛋白溶解的裂解方法;運(yùn)用非標(biāo)記定量技術(shù)(label free quantitative technology,LFQ)對(duì)乙烯脅迫橡膠樹(shù)樹(shù)皮后表達(dá)差異的質(zhì)膜蛋白進(jìn)行定量,分析其參與的代謝過(guò)程和信號(hào)途徑,在質(zhì)膜蛋白質(zhì)組水平上,揭示乙烯脅迫促進(jìn)橡膠樹(shù)增產(chǎn)的相關(guān)機(jī)制。采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù),對(duì)乙烯... 

【文章來(lái)源】:海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

乙烯脅迫下橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜蛋白質(zhì)組分析


圖1.3技術(shù)路線圖??Fig?1.3?The?technology?roadmap??

乙烯脅迫下橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜蛋白質(zhì)組分析


圖2.1兩相分配法純化質(zhì)膜??Fig.?2.1?The?purification?of?plasma?membrane?by?aqueous?two-phase?partition??

乙烯脅迫下橡膠樹(shù)樹(shù)皮質(zhì)膜蛋白質(zhì)組分析


圖3.2不同kci濃度對(duì)質(zhì)膜純化效率的影響??Fig?3.2?The?effect?of?(liferent?KCl?concentration?on?purification?efficiency?of?plasma??membrane??:96.4?%?(W/W)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]非生物脅迫下植物水通道蛋白的應(yīng)答與調(diào)控[J]. 孫琳琳,辛士超,強(qiáng)曉晶,程憲國(guó).  植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào). 2015(04)
[2]橡膠樹(shù)水通道蛋白基因HbPIP1和HbPIP2的功能鑒定及其表達(dá)分析[J]. 王進(jìn),安鋒,蔡秀清,鄒智,張薇,林位夫.  林業(yè)科學(xué). 2014(01)
[3]ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白與巴西橡膠樹(shù)產(chǎn)膠代謝[J]. 聶智毅,黎瑜,曾日中.  熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(12)
[4]水通道蛋白基因OsPIP2;6的功能分析[J]. 李嶸,牛向麗,苗雁文,熊方杰,劉永勝.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(15)
[5]巴西橡膠樹(shù)膠乳表達(dá)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白HbGCN1的克隆與表達(dá)研究[J]. 聶智毅,黎瑜,李波,夏可燦,段翠芳.  熱帶作物學(xué)報(bào). 2012(09)
[6]水稻葉片質(zhì)膜的純化及質(zhì)膜蛋白質(zhì)雙向電泳分析[J]. 何磊,聶燕芳,高元媛,曹燕,李云鋒,王振中.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)
[7]橡膠樹(shù)一個(gè)膠乳高表達(dá)MDR型ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的克隆與表達(dá)研究[J]. 聶智毅,李波,白瑞璞,黎瑜.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2011(12)
[8]巴西橡膠樹(shù)水通道蛋白基因cDNA的克隆及序列分析[J]. 莊海燕,安鋒,何哲,丁璇,吳海平,徐智娟,張碩新.  西北植物學(xué)報(bào). 2010(05)
[9]植物中銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究進(jìn)展[J]. 駱媛媛,柳參奎.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2009(02)
[10]巴西橡膠樹(shù)4-羥基-3-甲基-2-(E)-丁烯基-4-磷酸還原酶基因(HbHDR)的克隆及表達(dá)分析[J]. 李輝亮,雷美玉,彭世清.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2009(01)

博士論文
[1]水稻種子萌發(fā)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 韓超.中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢植物園) 2014

碩士論文
[1]巴西橡膠樹(shù)HbCDPK1基因的克隆與功能分析[D]. 陳鑫.海南大學(xué) 2011



本文編號(hào):3479531

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