天冬酰胺合成酶（Asparagine synthetase,AS）作為初級氮素同化過程關(guān)鍵酶之一,其產(chǎn)物天冬酰胺是植物氮素運(yùn)輸?shù)闹饕d體。本研究通過對過表達(dá)PnAS1的84K楊（Populus alba×Populus glandulosa）轉(zhuǎn)基因植株,采用qRT-PCR篩選出2個(gè)在地上部分及根組織中均高表達(dá)的試驗(yàn)材料。不同供氮水平下,測定了過表達(dá)PnAS1 84K楊植株及野生型WT的生長指標(biāo)及氮代謝相關(guān)的生理生化指標(biāo)。構(gòu)建AS1基因的RNAi植物抑制表達(dá)載體并獲得了抑制表達(dá)AS1基因的84K楊轉(zhuǎn)基因株系。此外,通過對楊樹基因組的搜索,鑒定出與天冬氨酸代謝密切相關(guān)的9個(gè)天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（其催化產(chǎn)物天冬氨酸,是天冬酰胺合成的唯一受體）家族基因并對其進(jìn)行生物信息學(xué)簡要分析,主要研究結(jié)果如下:（1）從楊樹基因組中鑒定了 9個(gè)天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶家族基因（PtASPAT）,其中7個(gè)真核型 ASPAT基因（PtASPAT1～PtSPAT7）及 2 個(gè)原核型 ASPAT基因（PtASPAT8～PtASPAT9）。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對9個(gè)PtASPAT家族基因表達(dá)水平檢測。結(jié)果顯示PtASPAT在根... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２楊樹家族基因結(jié)構(gòu)??ＭＥＭＥ工ＰｔＡＳＰＡＴ白

圖２－３，由圖可知，ＰｔＡＳＰＡＴ??

２．４小結(jié)與討論??ＡＳＰＡＴ作為催化谷氨酸生成天冬氨酸的重要轉(zhuǎn)氨酶，其產(chǎn)物天冬氨酸是天冬酰胺合??成的唯一受體。本研宄從楊樹基因組中鑒定天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（Ａｓｐａｒｔａｔｅ??ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＡＳＰＡＴ）家族基因（Ｐ／乂通過生物信息學(xué)分析其基因家族的功??能及表達(dá)特性，為研宄ＡＳＰＡＴ在楊樹初級氮素同化過程中行使的功能提供重要的參考??依據(jù)。以模式植物擬南芥ＡＳＰＡＴ為探針，在楊樹基因組中篩選并鑒定９個(gè)乂家族??基因，其中７個(gè)真核型基因（／＾５烈７７？Ｐ／ＡＳＰｄＴＶ）和２個(gè)原核型ＡＳｉＭｒ基因??（尸見４Ｆ９）。采用相鄰連接法（Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ，?ＮＪ）構(gòu)建擬南芥與楊樹??ＡＳＰＡＴ蛋白家族的系統(tǒng)進(jìn)化樹，結(jié)果顯示楊樹７個(gè)原核型ＡＳＰＡＴ蛋白被分為Ｉ類，２個(gè)??真核型ＡＳＰＡＴ被分為ＩＩ類；??采用生物信息學(xué)方法對楊樹家族基因的理化性質(zhì)及氨基酸序列進(jìn)行預(yù)測，結(jié)??果表明：９種楊樹基因編碼區(qū)長度為１２１５？１７９１?ｂｐ，編碼的氨基酸３０４？４８０??個(gè)，外顯子７？１２個(gè)；等電點(diǎn)為５．６６？８．９９，相對分子質(zhì)量為３３．１１？５３．３１ＫＤ，脂融指??數(shù)在７６．３６？９３．５４之間；除ＰｔＡＳＰＡＴ６和ＰｔＡＳＰＡＴ７為不穩(wěn)定蛋白，其它ＰｔＡＳＰＡＴ蛋白??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白研究進(jìn)展[J]. 張合瓊,張漢馬,梁永書,南文斌.  植物生理學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]容器苗出圃技術(shù)要點(diǎn)[J]. 李志宇.  現(xiàn)代農(nóng)村科技. 2015(06)
[3]氮素與植物生長相關(guān)研究進(jìn)展[J]. 陳雅君,閆慶偉,張璐,劉威,劉慧民,閆永慶.  東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(04)
[4]中國養(yǎng)分資源綜合管理研究的意義與重點(diǎn)[J]. 馬文奇,張福鎖,陳新平.  科技導(dǎo)報(bào). 2006(10)
[5]化肥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的作用和展望[J]. 金繼運(yùn),林葆.  作物雜志. 1997(02)



本文編號：3024172