【摘要】：紅豆杉葉枯病是紅豆杉生產(chǎn)上的重要病害,該病一旦發(fā)生則很難防治。明確病原菌種類及其生物學(xué)特性是控制紅豆杉葉枯病的前提。目前紅豆杉葉枯病病原菌尚不明確,相應(yīng)防治技術(shù)也有待于進(jìn)一步研發(fā)。本論文針對(duì)紅豆杉葉枯病,開展了病原菌鑒定、生物學(xué)特性及防治藥劑篩選研究。主要研究成果如下:1福建省紅豆杉葉枯病病原菌種類的鑒定本研究采集福建省紅豆杉葉枯病病樣,采用常規(guī)方法對(duì)病原菌進(jìn)行分離純化,該病菌在PDA培養(yǎng)基上生長的菌落為白色,其上有許多棉絮狀氣生菌絲,分生孢子盤黑色,不明顯;分生孢子外部形態(tài)呈現(xiàn)紡錘形,有的形態(tài)略微彎曲,其上有4個(gè)隔膜,分隔處的縊縮不明顯,每個(gè)分生孢子有5個(gè)細(xì)胞,分生孢子大小20.1～24.8×5.9～7.1μm,中間的三個(gè)細(xì)胞有著色,上面兩個(gè)著色胞呈灰褐色,第三個(gè)著色胞顏色略淺,呈淡褐色狀,色胞長度13.0～16.5μm,尾胞上著生沒有顏色的附屬絲,多數(shù)為2~3根,少數(shù)有4根,頂端的附屬絲長度為8.3～16.5μm,尾胞的上面著生著一根基部的附屬絲,長度為2.4～5.9μm。人工接種的紅豆杉植株與田間自然發(fā)病植株癥狀相同,通過對(duì)接種植株的再分離、病原培養(yǎng)性狀觀察和形態(tài)特征鏡檢表明,再分離獲得的病原菌與接種病原菌完全一致。用真菌rDNA-ITS區(qū)段通用引物ITS1和ITS4對(duì)分離的病原菌基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,得到近800bp的擴(kuò)增條帶,序列比對(duì)結(jié)果顯示該病原菌與小孢擬盤多毛孢(Pestalotiopsis的 microspora)ITS 序列同源性最高,達(dá)到 99%以上。綜合病原菌的形態(tài)特征、致病性測(cè)定及ITS序列同源性分析結(jié)果,最后將引起紅豆杉葉枯病的病原菌鑒定為小孢擬盤多毛孢(Pestalotiopsis microspora)。2紅豆杉葉枯病病原菌(Pestalotiopsis microspora)生物學(xué)特性研究紅豆杉葉枯病病原菌菌絲在13～37℃范圍內(nèi)均能生長,以24～28℃較為適宜,最適生長溫度為28℃,12℃以下和36℃以上菌絲均不能正常生長;分生孢子萌發(fā)的溫度范圍是12～36 ℃,最適萌發(fā)溫度為28 ℃,12℃以下和36℃以上分生孢子萌發(fā)明顯受到抑制甚至不萌發(fā);菌絲的生長對(duì)pH值的要求不高,在pH值為4～12的范圍內(nèi)都能正常生長,而以pH值6.0～7.0為較適宜,最適的pH值為7.5;在pH值為4～12的范圍內(nèi)分生孢子都可萌發(fā),以pH值為6時(shí)萌發(fā)率最高,說明偏酸性條件下更有利于病菌分生孢子的萌發(fā);供試的5種碳源中,蔗糖、葡萄糖均有利于病菌菌絲的生長,而麥芽糖、甘露醇和乳糖都不利于病菌的生長;葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和甘露醇均可顯著促進(jìn)分生孢子萌發(fā),其中葡萄糖最有利于分生孢子萌發(fā);供試的5種氮源中,硝酸鉀對(duì)菌絲生長最好;氯化銨、硫酸銨、硝酸鈉、硝酸銨、硝酸鉀均可顯著的促進(jìn)分生孢子萌發(fā);測(cè)試的全光照,全黑暗,12 h光暗交替3種處理中,全光照最有利于菌絲的生長和分生孢子萌發(fā);病原菌菌絲體的致死溫度為55℃,10分鐘,分生孢子的致死溫度為57℃,10分鐘。3紅豆杉葉枯病室內(nèi)防治藥劑篩選采用菌絲生長速率法測(cè)定8類12種殺菌劑對(duì)紅豆杉葉枯病病原菌菌絲生長的抑制效果,結(jié)果表明,12種藥劑對(duì)紅豆杉葉枯病均有不同程度的抑制效果,且所有供試藥劑的抑制作用均隨各藥劑濃度的增加而增強(qiáng),其中12.5%苯醚甲環(huán)唑懸浮劑的抑菌效果最好,其EC50值為0.16mg/L,其次為百泰混合藥劑、25%阿米西達(dá)懸浮劑、25%咪鮮胺乳油、25%異菌脲懸浮劑、25%丙環(huán)唑乳油,EC50值分別為0.875、1.43、1.45、1.48、2.4mg/L。上述藥劑可作為紅豆杉葉枯病的首選防治藥劑。本研究通過形態(tài)學(xué)特征并結(jié)合分子生物學(xué)方法,明確了福建省紅豆杉葉枯病病原菌,并進(jìn)行該病原菌生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑毒力測(cè)定,為紅豆杉葉枯病的準(zhǔn)確診斷和有效防治提供了理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S763.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2708511