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聚苯丙氨酸修飾低分子量聚乙烯亞胺制備高效基因載體

發(fā)布時(shí)間:2017-09-30 01:31

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【摘要】:分別制備了以支化小分子量聚乙烯亞胺(PEI-1.8k)為引發(fā)劑,引發(fā)苯丙氨酸-NCA開環(huán)聚合得到聚乙烯亞胺-聚苯丙氨酸(PEI1.8k-g-PPhe)以及聚乙烯亞胺接枝苯丙氨酸單體(PEI1.8k-g-Phe)的系列基因載體材料.利用核磁、粒度、zeta電位儀、熒光光度計(jì)、流式細(xì)胞儀以及激光共聚焦顯微鏡對PEI1.8k-g-PPhe,PEI1.8k-g-Phe以及PEI1.8k-g-PPhe/DNA和PEI1.8k-g-Phe/DNA復(fù)合物顆粒進(jìn)行了系統(tǒng)的表征.研究結(jié)果表明,最佳轉(zhuǎn)染條件下,PEI1.8k-g-PPhe10/DNA復(fù)合物顆粒的粒徑約為150 nm,表面電位約為16 m V.在人源宮頸癌(He La)和人源乳腺癌(MCF-7)2種細(xì)胞系中均具有較高的基因轉(zhuǎn)染效率,且最佳轉(zhuǎn)染效率可達(dá)到PEI-25k的12倍.MTT細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)分別比較了PEI1.8k-g-PPhe和PEI1.8k-g-Phe對He La細(xì)胞毒性的大小.從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見,苯丙氨酸引入的方式及數(shù)量決定著其細(xì)胞毒性的大小.PEI1.8k-g-PPhe和PEI1.8k-g-Phe都具有較低的細(xì)胞毒性(材料在較高濃度1 mg/m L時(shí)的細(xì)胞存活率大于70%).內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PEI1.8k-g-PPhe由于接入了具有規(guī)則聚合鏈的聚苯丙氨酸,而易于被He La細(xì)胞內(nèi)吞.PEI1.8k-g-PPhe10/DNA復(fù)合物顆粒相比于PEI-25k/DNA,PEI-1.8k/DNA和PEI1.8k-g-PPhe/DNA具有更高的細(xì)胞內(nèi)吞效率.
【作者單位】: 中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境高分子材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】聚苯丙氨酸 低分子量聚乙烯亞胺 基因載體 基因轉(zhuǎn)染
【基金】:國家自然科學(xué)基金(基金號21474104,51233004,51520105004,51390484) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃(項(xiàng)目號20160204032GX) 中共中央組織部“萬人計(jì)劃”青年拔尖人才項(xiàng)目資助
【分類號】:O631.5;R450
【正文快照】: **通訊聯(lián)系人,E-mail:thy@ciac.ac.cn;xschen@ciac.ac.cn目前癌癥已成為威脅人類健康的重要疾病.傳統(tǒng)的癌癥治療手段主要有手術(shù)治療、放射治療和化學(xué)治療[1].手術(shù)治療給患者帶來極大的痛苦,且腫瘤切除后容易復(fù)發(fā);放射治療在對腫瘤進(jìn)行治療的同時(shí)又可能誘發(fā)不可控的其它疾病;而

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