本文關(guān)鍵詞：耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌Ⅰ類整合子和ISCR1耐藥性及流行病學(xué)分析

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【摘要】：目的探討臨床分離碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)Ⅰ類整合子及插入序列共同區(qū)(Insertion sequence common region,ISCR)分布情況和耐藥基因盒類型,分析我院CRKP耐藥機(jī)制與分子流行病學(xué)特征。方法運(yùn)用Vitek 2 compact全自動微生物分析儀對臨床分離的44株CRKP進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn),以改良Hodge試驗(yàn)檢測碳青霉烯酶,以乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)協(xié)同法分析金屬β-內(nèi)酰胺酶,運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)方法鑒定細(xì)菌攜帶的耐藥基因;以腸桿菌基因間重復(fù)性共有序列(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus,ERIC)PCR和多位點(diǎn)序列(multilocus sequence typing,MLST)分型技術(shù)分析耐藥菌株同源性。以PCR技術(shù)檢測CRKP中整合酶基因IntⅠ/Ⅱ/Ⅲ、Ⅰ類整合子可變區(qū)、ISCR1、ISCR1可變區(qū)及Ⅰ類整合子與ISCR1關(guān)系,并對可變區(qū)進(jìn)行測序分析。結(jié)果臨床44位CRKP感染者的平均年齡(65.3±25.6歲),且伴有基礎(chǔ)疾病如糖尿病、高血壓和顱腦外傷。44株CRKP中痰液標(biāo)本的占70.4%,分離自ICU和神經(jīng)外科的CRKP居多,其構(gòu)成比分別為22.7%(10/44)、29.5%(13/44)。分別有88.6%(39/44)和47.7%(21/44)的患者使用過β-內(nèi)酰胺酶類和碳青霉烯類藥物。體外藥敏實(shí)驗(yàn)顯示所有菌株對培南類藥物耐藥,95.0%以上菌株對頭孢類藥物耐藥。所有菌株均檢出KPC-2基因,未檢出NDM-1、SME、IMP、OXA-48、VIM和GES基因;40株攜帶CTX-M-9基因,36株攜帶TEM基因,10株攜帶SHV基因。通過ERIC-PCR將菌株分為13型,Ⅰ型為主要流行型(38.6%,17/44);MLST分型結(jié)果,CRKP被分為10個(gè)ST型,其中以ST11型為主(59.1%,26/44)。44株CRKP中Ⅰ類整合酶基因陽性32株,陽性率為72.7%,其中29株檢出可變區(qū)結(jié)構(gòu),陽性率65.9%,序列分析為耐藥基因盒aad A,未檢出Ⅱ/Ⅲ類整合酶基因。ISCR1陽性6株,1株檢出ISCR1可變區(qū),序列分析為耐藥基因盒sul1。1株CRKP中的ISCR1直接與Ⅰ類整合子3'保守區(qū)下游串聯(lián)。結(jié)論(1)臨床分離44株CRKP均為產(chǎn)KPC-2酶菌株,且攜帶其它耐藥基因。(2)我院CRKP同源性較高,可能與分子克隆有關(guān),臨床應(yīng)高度重視并采取有效措施阻止其傳播。(3)Ⅰ類整合子廣泛分布于CRKP中并攜帶add A耐藥基因盒;ISCR1分布較少,攜帶sul1耐藥基因盒;Ⅰ類整合子和ISCR1可以以串聯(lián)形式存在于CRKP中,可能介導(dǎo)了耐藥基因在不同CRKP克隆株間的水平傳播,導(dǎo)致CRKP耐藥性呈現(xiàn)復(fù)雜化和多樣化。
【關(guān)鍵詞】：CRKP KPC-2 ERIC-PCR MLST 整合子 ISCR1
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-8
• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 第一部分 碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌I類整合子和ISCR1的檢測及耐藥性分析12-42
• 1 前言12
• 2 材料與方法12-20
• 3 結(jié)果20-34
• 4 討論34-38
• 5 結(jié)論38
• 6 參考文獻(xiàn)38-42
• 第二部分 碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌流行病學(xué)分析42-55
• 1 前言42-43
• 2 材料與方法43-46
• 3 結(jié)果46-50
• 4 討論50-51
• 5 結(jié)論51-52
• 6 參考文獻(xiàn)52-55
• 附錄55-56
• 致謝56-57
• 綜述57-65
• 參考文獻(xiàn)62-65

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本文編號：727848