本文關(guān)鍵詞：基于microRNAs肺結(jié)核診斷模型的構(gòu)建及在肺結(jié)核診斷中的價值研究

  更多相關(guān)文章： 微小RNA 結(jié)核 肺 診斷 標記物

【摘要】：背景與目的肺結(jié)核(pulmonary tuberculosis,PTB)的快速準確診斷對結(jié)核病(tuberculosis,TB)防治工作至為關(guān)鍵,然而該問題至今仍然困擾著臨床醫(yī)務(wù)工作者。當前PTB的診斷策略是結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、影像學資料以及實驗室檢查結(jié)果等綜合作出判斷,但是現(xiàn)階段PTB的實驗室診斷方法尚存在著局限性,傳統(tǒng)微生物學方法如抗酸染色法、分離培養(yǎng)法是當前實驗室檢驗的主要手段,但存在著陽性率較低,或檢測周期長等缺陷;現(xiàn)代分子生物學方法如Xpert MTB/RIF法雖提高了診斷的陽性率,實現(xiàn)了對結(jié)核桿菌的快速檢測,但對儀器設(shè)備要求高、費用昂貴等。另外,PTB的臨床表現(xiàn)及影像學結(jié)果缺乏特異性,常常難以對肺結(jié)核與其他肺部疾病如肺炎及肺癌等作出鑒別診斷,因此研究者們一直在尋求更為理想的PTB診斷方法。micro RNA(mi RNA)與疾病發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),已作為腫瘤等疾病的診斷指標,為PTB實驗室診斷提供了一種新的思路。多項研究證據(jù)顯示TB患者體內(nèi)存在著mi RNAs表達失調(diào),表達變化的mi RNAs可用于PTB的輔助診斷。然而,現(xiàn)階段對mi RNAs診斷PTB的研究更多的還只是停留在篩選診斷指標的層面上,有必要在此基礎(chǔ)上繼續(xù)進行深入研究與探索。本研究即在現(xiàn)有研究資料的基礎(chǔ)上,選取多種已報道過的可用作PTB診斷標記物的mi RNAs,以qRT-PCR技術(shù)檢測并進行篩選,通過logistic回歸分析獲得回歸方程,并進一步采用獨立樣本驗證該方程的診斷效能,旨在建立一個基于mi RNAs的PTB診斷模型,以期能夠?qū)ΜF(xiàn)有的PTB診斷方法進行有效補充。方法實驗分為4組:健康組、肺炎組、肺癌組和PTB組,實驗設(shè)計為三大部分:mi RNAs篩選、診斷模型構(gòu)建和診斷模型驗證。(1)miRNAs篩選:共納入研究對象178例,其中PTB組70例,健康組、肺炎組和肺癌組各36例。首先選取8種文獻已報道過的在PTB患者中存在異常表達的mi RNAs,以qRT-PCR技術(shù)檢測它們在178例研究對象中的表達水平;然后對檢測結(jié)果進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學分析,選取符合篩選標準的mi RNAs進入后續(xù)研究。(2)診斷模型構(gòu)建:應(yīng)用mi RNAs篩選階段的檢測數(shù)據(jù),對符合篩選標準的mirnas進行多因素logistic回歸分析,采用向前逐步法篩選變量,建立回歸方程,并以roc曲線分析評價該方程的診斷效能。(3)診斷模型驗證:為更準確評價所構(gòu)建模型的診斷效能,采用獨立樣本進行roc曲線分析驗證,此階段納入共研究對象200例,其中ptb組80例,健康組、肺炎組和肺癌組各40例。結(jié)果1.mirnas篩選:篩選標準為ptb組與肺炎組、肺癌組及健康組分別進行兩兩比較,三對比較中至少有一對滿足mirna表達水平有差異且相對變化倍數(shù)≥2或≤0.5。8種mirnas(mir-21、mir-29a、mir-101、mir-146a、mir-223、mir-361-5p、mir-378和mir-424)中,mir-29a的表達水平差異雖有統(tǒng)計學意義,但因其在有表達差異的一對比較(ptb組vs肺炎組)中表達水平的變化倍數(shù)為0.7,不符合篩選標準而被排除,剩余7種mirnas均符合實驗要求。2.診斷模型構(gòu)建:采用向前逐步法:似然比法篩選變量,成功構(gòu)建了基于3種mirnas(mir-101、mir-223和mir-424)的診斷模型,其余4種mirnas被剔除。應(yīng)用mirnas篩選階段數(shù)據(jù),roc曲線分析證實了該模型對ptb具有良好的診斷效能,auc=0.92,95%ci:0.87~0.95,診斷靈敏性為90.0%,特異性為84.3%。3.診斷模型驗證:采用獨立樣本,roc曲線分析證實了該模型對ptb具有良好的診斷效能,auc=0.89,95%ci:0.84~0.93,診斷靈敏性為86.3%,特異性為80.8%。考慮到臨床上ptb經(jīng)常要與肺炎和肺癌進行鑒別,我們也分析了該模型對ptb與上述兩種疾病的鑒別能力。結(jié)果顯示:與肺炎鑒別,auc=0.91,95%ci:0.86~0.96,診斷靈敏性為90.0%,特異性為80.0%;與肺癌鑒別,auc=0.92,95%ci:0.86~0.96,診斷靈敏性為88.8%,特異性為85.0%。結(jié)論1.在文獻調(diào)研基礎(chǔ)上選擇了8種mirnas進行研究,經(jīng)qrt-pcr技術(shù)檢測,7種mirnas(mir-21、mir-101、mir-146a、mir-223、mir-361-5p、mir-378和mir-424)在肺結(jié)核、肺炎和肺部腫瘤組中差異明顯,確定該7種mirnas進入后續(xù)研究。2.對7種候選mirnas(mir-21、mir-101、mir-146a、mir-223、mir-361-5p、mir-378和mir-424)進行多因素logistic回歸分析,構(gòu)建成功了一個基于3種mirnas即mir-101、mir-223和mir-424的診斷模型:logit(患ptb概率p)=6.214-1.480*(mir-101)-0.002*(mir-223)-0.051*(mir-424)。該診斷模型對肺結(jié)核的診斷效能為:auc=0.92,95%ci:0.87~0.95,診斷靈敏性為90.0%,特異性為84.3%。3.采用獨立樣本(PTB組80例,健康組、肺炎組和肺癌組各40例)經(jīng)ROC曲線驗證,證實該模型對PTB具有潛在的診斷價值:AUC=0.89,95%CI:0.84~0.93,診斷靈敏性為86.3%,特異性為80.8%。
【關(guān)鍵詞】：微小RNA 結(jié)核 肺 診斷 標記物
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R521;R440
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-9
• 中文摘要9-12
• 1. 前言12-14
• 2. 材料和方法14-21
• 3. 結(jié)果21-30
• 4. 討論30-34
• 全文結(jié)論34-35
• 參考文獻35-41
• 文獻綜述 micro RNA:潛在的診斷結(jié)核病的新型生物標記物41-56
• 參考文獻50-56
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的文章56-57
• 致謝57

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 應(yīng)軍;趙靜;;四種方法檢測抗雙鏈DNA抗體診斷效能的對比分析[J];華西醫(yī)學;2014年07期

2 周濤;仿真內(nèi)鏡與纖維支氣管鏡對氣道狹窄的診斷效能比較[J];放射學實踐;2005年06期

3 卓蘭云;吳子安;黃憲章;莊俊華;吳煒霖;鄭智明;陳穎婷;;1型糖尿病自身免疫抗體診斷效能的Meta分析[J];實用醫(yī)學雜志;2013年23期

4 張麗;張建中;;中國檢驗幽門螺桿菌感染方法診斷效能的分析[J];世界華人消化雜志;2007年06期

5 吳士及;陳家逸;黃勁;何虹燕;段金玉;殷波濤;朱琴;孫自鏞;;5種結(jié)核桿菌抗體檢測試劑對肺結(jié)核的診斷效能評價[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年02期

6 黃明剛;王青;齊敏;吳曉紅;;低劑量螺旋CT篩查肺癌的診斷效能及價值[J];實用放射學雜志;2008年08期

7 梅平;秦永德;王塞崗;茹仙古麗;巴雅;呂潔;謝彬;孫曉琰;;用受試者工作特征曲線分析~(99)Tc~m-MIBI顯像對甲狀腺冷結(jié)節(jié)的診斷效能[J];中華核醫(yī)學雜志;2007年03期

8 王秋實;劉輝;梁長虹;劉再毅;鄭君惠;;血液生化學與~1H磁共振波譜分析在兔肝纖維化中的診斷效能及相關(guān)性分析[J];解剖學研究;2014年01期

9 馮海龍,譚海斌,廖曉靈;顱內(nèi)動脈瘤3D-CTA診斷效能的臨床研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2003年04期

10 白曉菊,宋樹立,高學敏,鄭繼旺;阿片類戒斷綜合征中醫(yī)辨證計量診斷的初步研究[J];中國藥物依賴性雜志;2004年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 經(jīng)翔;劉艷麗;丁建民;高磊;王彥冬;張翔;張傳山;;超聲造影與增強CT鑒別肝硬化背景下≤3cm肝內(nèi)結(jié)節(jié)樣病灶的診斷效能比較和誤診分析[A];中華醫(yī)學會第十次全國超聲醫(yī)學學術(shù)會議論文匯編[C];2009年

2 閔凡貴;張鈺;黃韌;吳玉娥;潘金春;趙維波;劉香梅;王靜;;重組抗原在猴結(jié)核病血清學診斷中的應(yīng)用與評價[A];第十屆中國實驗動物科學年會論文集[C];2012年

3 田月麗;蘭曉莉;吳志堅;;~(18)F-FDG PET/CT顯像對鼻咽癌綜合治療后患者隨訪中的診斷效能及預后分析[A];中華醫(yī)學會第九次全國核醫(yī)學學術(shù)會議論文摘要匯編[C];2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 Gupta Vikash Kumar（古樸塔）;3.0T乳腺多b值彌散加權(quán)成像：確定乳腺病變信號強度比診斷效能和信噪比的最佳b值[D];東南大學;2016年

2 顏保松;基于microRNAs肺結(jié)核診斷模型的構(gòu)建及在肺結(jié)核診斷中的價值研究[D];第三軍醫(yī)大學;2016年

3 蔡多特;CellSearch System對轉(zhuǎn)移癌診斷效能的meta分析[D];廣西醫(yī)科大學;2009年

4 林金鳳;糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測對炎癥性腸病活動度的診斷效能的Meta分析[D];南方醫(yī)科大學;2014年

5 羅塏煒;重組CFP10、四種重組結(jié)核抗原純化的研究及其診斷效能分析[D];中國疾病預防控制中心;2009年

6 石海林;比較外周血PSA與PSMA對PCa的診斷價值—Meta分析[D];廣西醫(yī)科大學;2008年

7 林楠;四種結(jié)核分枝桿菌特異蛋白抗原的克隆表達和血清學評價[D];中國疾病預防控制中心;2014年

，

本文編號：661085