發(fā)布時(shí)間：2017-08-05 04:01

  本文關(guān)鍵詞：亞胺培南誘導(dǎo)肺炎克雷伯菌產(chǎn)生耐藥及耐藥機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 亞胺培南耐藥肺炎克雷伯菌 β-內(nèi)酰胺酶 AmpC酶 ompK35

【摘要】：目的:通過分析亞胺培南誘導(dǎo)肺炎克雷伯菌的耐藥特征探討Amp C酶和omp K35蛋白在亞胺培南誘導(dǎo)肺炎克雷伯菌耐藥機(jī)制中的作用。肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae,KPN)是臨床分離及醫(yī)院感染的重要致病菌之一,于1893年從大葉性肺炎患者的肺組織中首次分離到,可引起肺炎、尿路感染、敗血癥、傷口感染、腦膜炎等多種疾病,現(xiàn)已成為醫(yī)院感染的重要病原菌。由于抗菌藥物的大量使用,使肺炎克雷伯菌的耐藥十分普遍,碳青霉烯類抗生素是治療多重耐藥肺炎克雷伯菌的最強(qiáng)效的抗生素,包括亞胺培南、美洛培南等。然而,隨著碳青霉烯類抗生素的大量使用,全球許多地區(qū)出現(xiàn)了碳青霉烯類耐藥的肺炎克雷伯菌感染的報(bào)道,給臨床和治療造成了極大困難。在國內(nèi),研究亞胺培南誘導(dǎo)肺炎克雷伯菌耐藥報(bào)道的還不是很多,因此本課題有一定的創(chuàng)新性。方法:1收集標(biāo)本分離臨床收集肺炎克雷伯菌株共240株。在我院,培養(yǎng)標(biāo)本主要集中在重癥監(jiān)護(hù)病房、神經(jīng)外科病房、神經(jīng)內(nèi)科病房、呼吸科病房,泌尿外科病房等。由于抗生素的大量使用,以上幾個(gè)病區(qū)肺炎克雷伯菌的鑒定率和耐藥率都比較高,所以菌株收集主要來源于以上幾個(gè)病區(qū)。2檢測方法及監(jiān)測指標(biāo)首先采用K-B法測定10種臨床常用抗生素的耐藥情況,所選取的藥物有哌拉西林、亞胺培南、慶大霉素、氨曲南、頭孢他啶、左旋氧氟沙星、阿米卡星、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星和多黏菌素B,并提取亞胺培南耐藥的肺炎克雷伯菌株。其次采用瓊脂稀釋法檢測亞胺培南最低抑菌濃度。然后采用三維實(shí)驗(yàn)的方法分析亞胺培南耐藥的肺炎克雷伯菌所產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的類型。針對(duì)肺炎克雷伯菌株,采用普通PCR方法檢測omp K35基因,采用多重PCR的方法檢測質(zhì)粒攜帶的Amp C酶基因,用熒光定量RT-PCR方法檢測omp K35基因表達(dá)情況;同時(shí)對(duì)產(chǎn)Amp C酶的肺炎克雷伯菌用RT-PCR方法檢測Amp C酶基因的表達(dá)量情況。3統(tǒng)計(jì)方法所有的數(shù)據(jù)顯示,均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差。單因素方差分析和t檢驗(yàn)進(jìn)行組間差異分析。當(dāng)P值小于0.05時(shí),其差異有顯著性。結(jié)果:1針對(duì)240株肺炎克雷伯菌,所選取的臨床常用的抗菌藥物有哌拉西林、亞胺培南、慶大霉素、氨曲南、頭孢他啶、左旋氧氟沙星、阿米卡星、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星和多黏菌素B10種藥物進(jìn)行耐藥實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示肺炎克雷伯菌對(duì)這些藥物的耐藥率依次為:39.18%,35.36%,34.45%,32.18%,30.36%、28.72%、27.39%、24.90%,13.72%和0%。2在240株肺炎克雷伯菌株中,共檢測到48株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株,β-內(nèi)酰胺酶的檢出率20.00%(48/240)。其中產(chǎn)Amp C酶的菌株共有25株(52.08%),產(chǎn)金屬酶的菌株有4株(8.33%),產(chǎn)ESBL的菌株有11株(22.92%),同時(shí)產(chǎn)Amp C酶和超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的有3株(6.25%);還有5株菌(10.42%)的產(chǎn)酶類型有待分析。通過三維水解實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),有7株菌所產(chǎn)的Amp C酶對(duì)IMP有一定的水解作用。3 PCR、多重PCR檢測肺炎克雷伯菌IMP耐藥結(jié)果顯示,在產(chǎn)Amp C酶的菌株中,Amp C酶的基因含量均有不同程度的增加,其中最少增加4.44倍,最多增加354.59倍。90株IMP耐藥的KP菌株中,omp K35基因檢測為陰性的菌株有40株,占IMP耐藥KP菌株總數(shù)的44.44%(40/90),陽性菌株有50株,占總數(shù)的55.56%(50/90)。4在熒光定量RT-PCR對(duì)IRKp的omp K35基因表達(dá)蛋白量的檢測中,25株產(chǎn)Amp C酶KP菌株中,12株菌omp K35基因表達(dá)量減低,13株菌omp K35基因表達(dá)量正常;在25株產(chǎn)Amp C酶的KP菌株中微弱水解IMP的菌株有7株,其Amp C酶基因的表達(dá)量均有明顯升高,其中5株菌同時(shí)伴有omp K35基因表達(dá)量降低。結(jié)論:1亞胺培南能誘導(dǎo)肺炎克雷伯菌產(chǎn)生耐藥。2 Amp C酶的存在是導(dǎo)致KP對(duì)IMP耐藥的一個(gè)重要因素,其水解活動(dòng)可能在耐藥機(jī)制中起到重要作用。3 Omp K35表達(dá)量降低是KP對(duì)IMP耐藥的重要原因之一。
【關(guān)鍵詞】：亞胺培南耐藥肺炎克雷伯菌 β-內(nèi)酰胺酶 AmpC酶 ompK35
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R446.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-24
• 附圖24-30
• 附表30-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-40
• 綜述 產(chǎn)碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌40-56
• 參考文獻(xiàn)47-56
• 致謝56-57
• 個(gè)人簡歷57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號(hào)：623014