本文關(guān)鍵詞：狼瘡腎炎患者血清定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究

  更多相關(guān)文章： 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 狼瘡性腎炎 iTRAQ 載脂蛋白B 補(bǔ)體C1q子組件單元C 血清淀粉樣蛋白A1

【摘要】：目的：利用同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)技術(shù)結(jié)合2維液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(two-dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2D-LC-MS/MS)技術(shù)篩選狼瘡腎炎(Lupus Nephritis, LN)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic Lupus Erythematosus, SLE)非腎炎患者患者血清差異表達(dá)蛋白。為L(zhǎng)N的早期診斷以及病情監(jiān)控,從血清定量蛋白質(zhì)組學(xué)的方向提供新的角度和思路。方法：采用LN患者和SLE非腎炎患者血清標(biāo)本作為研究對(duì)象,并以健康人群血清為對(duì)照。利用安捷倫多重親和排除系統(tǒng)(Agilent multiple affinity removal LC column-Human 14, MARS)分別去除各組血清中的14種高豐度蛋白,并對(duì)低豐度蛋白進(jìn)行超濾濃縮,分別標(biāo)記為：①系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎組(LN-low);②SLE非腎炎組(SLE-low);③健康對(duì)照組(N-low)。運(yùn)用iTRAQ技術(shù)構(gòu)建SLE非腎炎患者和LN患者在疾病不同階段的差異蛋白表達(dá)譜,并將所有的差異表達(dá)蛋白進(jìn)行Gene Ontology(簡(jiǎn)稱GO)分類和信號(hào)通路分析(Ingenuity Pathway Analysis, IPA);隨后用免疫印跡法(Western-Blot, WB)對(duì)差異蛋白--載脂蛋白B (Apolipoprotein B, APOB)、補(bǔ)體Clq子組件單元C(Complement C1q subcomponent subunit C, C1QC)和血清淀粉樣蛋白A1 (Serum Amyloid A1, SAA1)進(jìn)行蛋白水平的鑒定；最后使用SAA1 (Human) ELISA Kit測(cè)定SAA1在LN、SLE非腎炎組和健康對(duì)照組血清樣本中的濃度,并用SPSS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：1、用SDS-PAGE電泳來(lái)驗(yàn)證待測(cè)血清高豐度蛋白的去除效率,結(jié)果顯示：可見(jiàn)的蛋白條增多,一些原本未見(jiàn)的低豐度蛋白條帶顯現(xiàn)出來(lái)；使用Quantity One軟件來(lái)做進(jìn)一步的分析比較,98%以上的高豐度蛋白已被去除。2、經(jīng)iTRAQ聯(lián)合2D-LC-MS/MS分析,共鑒定出302個(gè)非冗余蛋白(95%的可信區(qū)間)。通過(guò)設(shè)置差異蛋白的篩選標(biāo)準(zhǔn)：Cut-off值為ProtScore (unused)1.5,且P0.05, Ratio1.2(上調(diào))或Ratio0.8(下調(diào))。得到243個(gè)差異蛋白,其中LN組與健康對(duì)照組比較,有235個(gè)差異蛋白(上調(diào)蛋白233個(gè),下調(diào)蛋白2個(gè))；SLE非腎炎組與健康對(duì)照組比較,有243個(gè)差異蛋白(上調(diào)蛋白3個(gè),下調(diào)蛋白240個(gè))；LN組與SLE非腎炎組比較,有243個(gè)差異蛋白,且全部是上調(diào)蛋白。3、生物信息分析可知,差異蛋白主要位于細(xì)胞外,發(fā)揮炎癥反應(yīng)或者急性反應(yīng)的生物學(xué)作用；在IPA分析上差異蛋白的信號(hào)途徑主要有LXR/RXR激活、FXR/RXR激活以及補(bǔ)體系統(tǒng)等。用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve, ROC曲線)分析血清SAA1在SLE非腎炎和LN的表達(dá)情況,其曲線下面積(area under the ROC curve,記為AUC)診斷LN為0.843,P=0.001,當(dāng)SAA1的Cut-off值為1.555μg/mL時(shí),靈敏度為70.5%,特異度為85.7%。結(jié)論：1、經(jīng)iTRAQ結(jié)合2D-LC-MS/MS技術(shù)分析,LN和SLE非腎炎之間存在243個(gè)的差異表達(dá)蛋白,且差異蛋白SAA1可能是診斷LN的潛在分子標(biāo)志物2、SLE與LN的發(fā)生發(fā)展涉及機(jī)體多條作用通路,如免疫異常、機(jī)體急性反應(yīng)以及血脂異常等。炎性反應(yīng)可能是促進(jìn)SLE與LN發(fā)生發(fā)展的主要因素。
【關(guān)鍵詞】：系統(tǒng)性紅斑狼瘡 狼瘡性腎炎 iTRAQ 載脂蛋白B 補(bǔ)體C1q子組件單元C 血清淀粉樣蛋白A1
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R593.242;R446.1
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-15
• 材料與方法15-28
• 結(jié)果28-59
• 討論59-65
• 本課題的創(chuàng)新點(diǎn)和展望65-66
• 參考文獻(xiàn)66-74
• 附錄74-76
• 綜述76-90
• 參考文獻(xiàn)84-90
• 致謝90-91
• 攻讀研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文91

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 葉任高,陽(yáng)曉;狼瘡腎炎的診斷和治療近況[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2002年09期

2 高曉健,張玉琦;狼瘡腎炎并發(fā)甲狀腺功能減退癥1例[J];新醫(yī)學(xué);2002年06期

3 楊念生,薛志強(qiáng),黃越芳,陳雄輝,葉任高;狼瘡腎炎與妊娠的相互影響[J];中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年02期

4 徐雷艇,王美美;誘生型一氧化氮合酶與狼瘡腎炎[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2003年05期

5 孫茹蓉,王美美;單核細(xì)胞趨化蛋白-1在狼瘡腎炎中的表達(dá)和治療前景[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2004年07期

6 朱小霞,王美美;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β與狼瘡腎炎[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2004年10期

7 黎磊石,劉志紅;狼瘡腎炎治療的前景[J];中華腎臟病雜志;2004年01期

8 劉冠賢,鄧安國(guó),方敬愛(ài),劉建社,王玉梅,石詠軍;狼瘡腎炎患者尿單核細(xì)胞趨化蛋白-1檢測(cè)的臨床意義[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2005年10期

9 劉志紅;黎磊石;;狼瘡腎炎的治療[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2006年02期

10 申宗利;劉鳳梅;;環(huán)磷酰胺沖擊治療狼瘡腎炎的療效觀察[J];中國(guó)鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2006年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王曉非;蔣莉;劉海娜;張榕;張曉莉;;早期狼瘡腎炎患者血中可溶性CD40配體的變化及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2003年

2 鐘力;高建華;徐珊;張劍勇;尹志華;;激素聯(lián)合中藥治療難治性狼瘡腎炎的臨床研究[A];全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合強(qiáng)直性脊柱炎專題研討會(huì)論文匯編[C];2007年

3 鐘力;高建華;徐珊;張劍勇;尹志華;;激素聯(lián)合中藥治療難治性狼瘡腎炎的臨床研究[A];第十一屆全國(guó)中醫(yī)風(fēng)濕病學(xué)術(shù)研討會(huì)專輯[C];2006年

4 劉曉倩;戴明;陳曉翔;胡大偉;鮑春德;;狼瘡腎炎患者外周血白介素18及其結(jié)合蛋白基因的表達(dá)[A];全國(guó)自身免疫性疾病專題研討會(huì)暨第十一次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

5 郭桂梅;陳順樂(lè);沈南;倪旭鳴;鮑春德;戴岷;王海豐;黃新芳;錢捷;;狼瘡腎炎患者腎組織基因表達(dá)的研究[A];第十二屆全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

6 顧越英;;狼瘡腎炎的臨床治療進(jìn)展[A];浙江醫(yī)學(xué)會(huì)2007年風(fēng)濕病年會(huì)論文匯編[C];2007年

7 肖嫦娟;饒慧;;不同治療方案對(duì)Ⅴ型狼瘡腎炎的綜合療效對(duì)比[A];第17次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

8 李雪璐;邢艷;;雌二醇和白細(xì)胞介素-10在女性狼瘡腎炎患者血漿的表達(dá)水平及其意義[A];第17次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

9 林書(shū)典;;伴抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體陽(yáng)性狼瘡腎炎的臨床病理特征[A];第17次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

10 陽(yáng)曉;葉任高;;狼瘡腎炎的診斷和治療[A];第七屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎臟病會(huì)議專題講座匯編[C];2003年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 陶春祥;狼瘡腎炎的藥物治療[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

2 衣曉峰;李華虹;如何判斷狼瘡腎炎患者腎損害？[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

3 熊明山;粵港兩地共克頑疾[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2000年

4 魏開(kāi)敏;狼瘡腎炎的免疫抑制治療[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 張馨梅;彌漫增殖性狼瘡腎炎的臨床和病理研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

2 王娟;狼瘡腎炎伴血栓性微血管病變的臨床病理研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

3 劉志純;TWEAK-P38 MAPK信號(hào)通路在狼瘡腎炎發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D];中南大學(xué);2011年

4 方明;中醫(yī)藥治療狼瘡腎炎的證候與療效相關(guān)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高雁;難治性狼瘡性腎炎病例分析及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[D];浙江大學(xué);2015年

2 陳雪雯;狼瘡腎炎患者臨床檢測(cè)指標(biāo)的診斷價(jià)值分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

3 黃俊;雌激素上調(diào)TWEAK表達(dá)在狼瘡腎炎發(fā)病機(jī)制中作用的研究[D];蘇州大學(xué);2016年

4 榮成智;狼瘡腎炎患者血清定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

5 林秋萍;趨化因子CXCL9/10/11在人腎小球系膜細(xì)胞上的表達(dá)及在狼瘡腎炎診斷中的意義[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 馬東鋒;狼瘡腎炎治療的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2009年

7 陳慧;血、尿白介素-6的檢測(cè)在重癥狼瘡腎炎患者中的臨床價(jià)值[D];川北醫(yī)學(xué)院;2010年

8 趙永利;狼瘡腎炎病理分型與臨床特征的相關(guān)性探討[D];吉林大學(xué);2010年

9 宋星慧;增生性狼瘡腎炎治療的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2008年

10 雷永生;1032例狼瘡腎炎臨床病理分析[D];鄭州大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：595197