本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)頭發(fā)中內(nèi)源性大麻素和糖皮質(zhì)激素

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【摘要】：內(nèi)源性大麻素和糖皮質(zhì)激素系統(tǒng)是人體中有序、必不可少的中樞調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu),影響著許多生理過(guò)程,例如鎮(zhèn)痛、降低體溫、止痛、能量和食欲調(diào)節(jié)以及葡萄糖和脂類化合物的新陳代謝。目前主要研究的內(nèi)源性大麻素是花生四烯酸乙醇胺(AEA)和2-花生四烯酸甘油(2-AG),主要研究的糖皮質(zhì)激素是皮質(zhì)醇和可的松。頭發(fā)基質(zhì)可回溯性地記錄生理功能產(chǎn)生時(shí)糖皮質(zhì)激素和內(nèi)源性大麻素之間的關(guān)聯(lián)。但是,2-AG自發(fā)轉(zhuǎn)化為同分異構(gòu)體1-AG和OAEA自發(fā)重排成AEA,這是在頭發(fā)中準(zhǔn)確檢測(cè)2-AG和AEA的重大障礙。本文旨在建立一種同時(shí)檢測(cè)頭發(fā)中2-AG、AEA、皮質(zhì)醇和可的松含量的方法。此外,招募473名被試,探討頭發(fā)中2-AG、AEA的濃度與性別、身體健康指數(shù)以及糖皮質(zhì)激素的關(guān)聯(lián)。本文基于高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀Q-Trap3200,在大氣壓化學(xué)離子源(APCI)正離子模式下,采用多反應(yīng)檢測(cè)(MRM)模式進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)采用甲醇作為孵育溶液,并利用甲醇和去離子水的酸性混合溶液作為流動(dòng)相以避免OAEA的重排和2-AG轉(zhuǎn)化為1-AG。實(shí)驗(yàn)利用配有5μm,150 mm × 4.6 mm C18柱的安捷倫1200液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行物質(zhì)的層析分離。流動(dòng)相為甲醇和水(90:10)的混合物,其中含有2mM的乙酸銨。流速為500μL/min。該方法AEA的檢測(cè)限為1.5 pg/mg,2-AG為6 pg/mg,可的松和皮質(zhì)醇均為0.5pg/mg。AEA的線性范圍在2.5-250 pg/mg之間,2-AG的線性范圍在15-1250 pg/mg之間,皮質(zhì)醇和可的松的線性范圍均在1-250 pg/mg之間。所有待測(cè)物的日內(nèi)、日間精密度都小于20%,回收率大于90%。人群分析顯示,2-AG和AEA顯著正相關(guān),2-AG和皮質(zhì)醇、可的松顯著正相關(guān)；AEA和皮質(zhì)醇顯著正相關(guān),但與可的松不相關(guān)。肥胖人群的2-AG和皮質(zhì)醇含量高于正常人群。男性體內(nèi)2-AG和皮質(zhì)醇含量顯著高于女性,但AEA含量卻顯著低于女性。本文建立了一種檢測(cè)頭發(fā)中內(nèi)源性大麻素和糖皮質(zhì)激素的新方法。該方法操作簡(jiǎn)單、可快速辨別,而且靈敏性高,能準(zhǔn)確地檢測(cè)頭發(fā)中的2-AG、AEA和皮質(zhì)醇、可的松含量。盡管這種方法只檢測(cè)了這四種物質(zhì),但仍可用于同時(shí)檢測(cè)其他分析物。
【關(guān)鍵詞】：質(zhì)譜檢測(cè) 2-花生四烯酸甘油 花生四烯酸乙醇胺 可的松 皮質(zhì)醇 頭發(fā)基質(zhì)
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R446.1;O657.63
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• Acronyms8-11
• CHAPTER 1:INTRODUCTION11-22
• 1.1 Background11-19
• 1.1.1 A general overview of the functionalities of Glucocorticoid and Endocannabinoid Systems as well as the implication of their relationship physiologically13-15
• 1.1.2 Obesity,endocannabinoids and glucocorticoids:A synopsis in brief15-17
• 1.1.3 The HPLC-MS/MS analysis Technique17-19
• 1.2 Statement of the problem19
• 1.3 Significance of the study19-20
• 1.4 Research objective20-22
• 1.4.1 General objective20
• 1.4.2 Specific objectives20-22
• CHAPTER 2:REVIEW OF RELATED LITERATURE22-37
• 2.1 An outline of the detection methods for endocannabinoids and glucocorticoids in variousmatrices23-25
• 2.2 Matrix effect in LC-MS/MS based method of analyses and the importance of solid phaseextraction application25-28
• 2.3 The peculiar chemistry and stability of 2-AG and AEA28-31
• 2.4 Stress,obesity,endocannabinoids and glucocorticoids:A view at their relationship and itsclinical implications31-35
• 2.5 Merits and demerits associated with quantification of analytes in hair35-37
• CHAPTER 3:RESEARCH METHODOLGY37-46
• 3.1 Reagents and solution preparation37-38
• 3.2 Research Participants38
• 3.3 Hair sample collection38
• 3.4 Sample treatment38-39
• 3.5 HPLC-MS/MS conditions39-43
• 3.6 Method validation43-45
• 3.7 Statistical Analysis45-46
• CHAPTER 4:RESEARCH RESULTS46-52
• 4.1 Chromatography46-47
• 4.2 Validation parameters47-49
• 4.3 Intercorrelations between AEA,2-AG,cortisol and cortisone49-51
• 4.4 The influence of gender and BMI51-52
• CHAPTER 5:DISCUSSION OF RESEARCH FINDINGS52-59
• CHAPTER 6:LIMITATIONS OF THE STUDY, RECOMMENDATIONS FOR FUTURE RESEARCH AND CONCLUSION59-61
• ACKNOWLEDGEMENTS61-62
• REFERENCES62-71

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本文編號(hào)：558791