本文關(guān)鍵詞：離子色譜法測(cè)定人體體液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：酪氨酸是組成蛋白質(zhì)的重要氨基酸,據(jù)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道,人體體液中酪氨酸及其代謝物含量的變化與某些疾病有關(guān)聯(lián)。因此,研究建立一種簡(jiǎn)便、快速、靈敏的分析方法并且應(yīng)用于人體體液中酪氨酸及其代謝物含量的檢測(cè),對(duì)于一些疾病的診斷、監(jiān)測(cè)和治療具有十分重要的臨床意義。本文采用離子色譜分離結(jié)合不同的檢測(cè)器,構(gòu)建了人體血清和尿液中酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析新方法,并應(yīng)用于實(shí)際樣品檢測(cè),取得了較好的效果。主要研究成果如下:1.建立了陰離子交換色譜-積分脈沖安培法(AEC-IPAD)測(cè)定人體血清中對(duì)羥苯基乳酸的分析新方法。血樣經(jīng)乙腈處理沉淀蛋白,離心后取上清液氮?dú)獯蹈?用流動(dòng)相溶解殘?jiān)⒍ㄈ莸较鄳?yīng)的刻度,混勻后進(jìn)樣檢測(cè)。采用IonPac AG18保護(hù)柱(50 mm×2 mm)和IonPac AS18分析柱(250 mm×2 mm),以0.023 mol/L NaOH溶液為淋洗液,流速為0.25 mL/min,在優(yōu)化的安培檢測(cè)波形條件下,對(duì)羥苯基乳酸在0.03~2 mg/L濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)0.9999,檢出限(S/N=3)為0.010 mg/L。三個(gè)水平的加標(biāo)回收率在92.0%~102%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.78%~3.79%之間。此方法準(zhǔn)確可靠,可用于實(shí)際樣品的檢測(cè)。2.建立了陰離子交換色譜-熒光法(AEC-FLD)同時(shí)測(cè)定人體血清中的酪氨酸(Tyr)、對(duì)羥苯基乳酸(PHPLA)和對(duì)羥苯基丙酸(PHPA)的分析新方法。樣品經(jīng)乙腈處理沉淀蛋白,離心后取上清液直接進(jìn)樣檢測(cè)。采用0.004 mol/L NaOH溶液作為淋洗液,流速為0.45 mL/min,三種物質(zhì)在IonPac AG21保護(hù)柱(50mm×2 mm)和IonPac AS21分析柱(250 mm×2 mm)上能得到良好的分離,熒光檢測(cè)器的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為277 nm和340 nm。Tyr、PHPLA和PHPA的線性范圍分別為0.30~25 mg/L、0.025~2 mg/L和0.025~2 mg/L,相關(guān)系數(shù)在0.9998~0.9999之間,檢出限(S/N=3)分別為0.024 mg/L、0.020 mg/L和0.019 mg/L。三個(gè)水平的加標(biāo)回收率在72.6%~99.1%之間,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于6.62%。該方法具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、二次污染小等特點(diǎn),應(yīng)用于實(shí)際樣品的測(cè)定,結(jié)果令人滿意。3.建立了陰離子交換色譜-熒光法(AEC-FLD)測(cè)定人體尿樣中的對(duì)羥苯基乳酸(PHPLA)的分析新方法。尿液經(jīng)ENVI-18固相萃取小柱,5 mL 0.003 mol/L NaOH溶液洗脫目標(biāo)物后,洗脫液中加入殼聚糖材料進(jìn)行濃縮,1 mL 0.1 mol/L Na2CO3溶液洗脫目標(biāo)分析物后直接進(jìn)樣檢測(cè)。采用0.003 mol/L Na2CO3溶液作為淋洗液,流速為0.45 mL/min,物質(zhì)在IonPac AG21保護(hù)柱(50 mm×2 mm)和IonPac AS21分析柱(250 mm×2 mm)峰形較好,熒光檢測(cè)器的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為277 nm和340 nm。PHPLA的線性范圍為0.05~10 mg/L,相關(guān)系數(shù)為0.9965,檢出限(S/N=3)為0.016 mg/L。三個(gè)水平的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中,健康人和乳腺癌患者尿樣的加標(biāo)回收率分別在98.5%~105%和86.5%~95.0%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在1.66%~4.12%和0.81%~3.36%之間。該方法已用于實(shí)際尿樣中對(duì)羥苯基乳酸的分析檢測(cè)。
【關(guān)鍵詞】：離子交換色譜-積分脈沖安培法 離子交換色譜-熒光檢測(cè)法 人體體液 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物 殼聚糖材料
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R446.1;O657.7
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 緒論9-23
• 1.1 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)展9-15
• 1.1.1 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物概述9-10
• 1.1.2 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物分析研究進(jìn)展10-14
• 1.1.3 酪氨酸及其代謝產(chǎn)物與疾病相關(guān)性研究14-15
• 1.2 乳腺癌的研究狀況15-16
• 1.3 本文研究的主要內(nèi)容16-17
• 參考文獻(xiàn)17-23
• 第二章 陰離子交換色譜-積分安培法測(cè)定人體血清中的對(duì)羥苯基乳酸23-32
• 2.1 引言23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分23-25
• 2.2.1 儀器與試劑23-24
• 2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制24
• 2.2.3 血清樣本的采集與處理24
• 2.2.4 色譜分析條件24-25
• 2.3 結(jié)果與討論25-29
• 2.3.1 淋洗液濃度的選擇25
• 2.3.2 檢測(cè)波形的優(yōu)化25-27
• 2.3.3 樣品前處理?xiàng)l件的選擇27
• 2.3.4 干擾試驗(yàn)27-28
• 2.3.5 線性方程、線性范圍和檢出限28
• 2.3.6 回收率實(shí)驗(yàn)28
• 2.3.7 樣品測(cè)定28-29
• 2.4 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 第三章 陰離子交換色譜-熒光法測(cè)定人體血清中的酪氨酸及其代謝產(chǎn)物32-42
• 3.1 引言32
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分32-34
• 3.2.1 儀器與試劑32-33
• 3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制33
• 3.2.3 血清樣本的采集與處理33
• 3.2.4 色譜分析條件33-34
• 3.3 結(jié)果與討論34-40
• 3.3.1 色譜分離條件的選擇34-35
• 3.3.2 熒光波長(zhǎng)的選擇35-36
• 3.3.3 樣品前處理?xiàng)l件的選擇36
• 3.3.4 干擾實(shí)驗(yàn)36
• 3.3.5 線性方程、線性范圍和檢出限36-37
• 3.3.6 回收率實(shí)驗(yàn)37-38
• 3.3.7 樣品測(cè)定38-40
• 3.4 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-42
• 第四章 陰離子交換色譜-熒光法測(cè)定人體尿樣中的對(duì)羥苯基乳酸42-55
• 4.1 引言42
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分42-44
• 4.2.1 儀器與試劑42-43
• 4.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制43
• 4.2.3 尿液樣本的采集與處理43
• 4.2.4 色譜分析條件43
• 4.2.5 殼聚糖磁性材料的制備43-44
• 4.3 結(jié)果與討論44-52
• 4.3.1 材料的表征44-45
• 4.3.2 色譜分離條件的優(yōu)化45
• 4.3.3 樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化45-49
• 4.3.4 干擾實(shí)驗(yàn)49
• 4.3.5 線性方程、線性范圍和檢出限49
• 4.3.6 方法的精密度和準(zhǔn)確度49-51
• 4.3.7 樣品測(cè)定51-52
• 4.4 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-55
• 第五章 小結(jié)55-56
• 致謝56-57
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果57

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本文編號(hào)：486750