沙門菌常見O抗原和H抗原熒光PCR檢測方法評估
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【摘要】:目的:評估沙門菌常見A~F血清群O抗原和H抗原熒光PCR檢測方法對不同血清型沙門菌的檢測效果。方法:選用不同血清型沙門菌制備模板,運用沙門菌O抗原A~F群及不同H抗原熒光PCR檢測試劑盒對這些菌株進行擴增檢測,分別計算不同血清型檢測結(jié)果的靈敏度、特異度、檢測下限、假陽性率、假陰性率、Kappa值等指標(biāo)并進行分析。結(jié)果:對7種不同沙門菌O抗原的檢測靈敏度為85.71%~100.00%,特異度為66.67%~100.00%;對7種不同沙門菌H抗原的檢測,H1,5及Hi-l的靈敏度不高,分別為35.71%及57.14%,但特異度均較高(87.50%~100.00%);經(jīng)Fisher精確檢驗,除H1,5陽性檢測的P0.05(P=0.162),其余為P0.05;C1、C2、D1、E、F血清群及H抗原1,6、1,7、g,s,t、g,m的檢測結(jié)果與血清凝集結(jié)果的一致性較高(Kappa值均大于0.75),而H1,5及Hi-l的檢測結(jié)果與血清凝集結(jié)果的一致性很差(Kappa值分別為0.302及0.492);試劑盒對不同O/H抗原核酸檢測擴增效率較好,最低檢出限為7~137608拷貝/反應(yīng)。結(jié)論:除H1,5抗原外,該熒光PCR檢測試劑盒對沙門菌O/H抗原不同血清型的檢測效果較好,優(yōu)于傳統(tǒng)血清凝集方法,可顯著提高血清型鑒定時效,有利于疾病或暴發(fā)的早期發(fā)現(xiàn)。
【作者單位】: 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】: 沙門菌 血清型 O抗原 H抗原 熒光PCR
【基金】:國家科技重大專項(2013ZX10004216) 國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(2013CB127204)
【分類號】:R440
【正文快照】: 沙門菌是常見的引起食源性疾病的致病菌。2007年世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,全世界范圍內(nèi)已發(fā)現(xiàn)2610種血清型的沙門菌[1]。至2006年,我國也已檢出近300種沙門菌血清型[2]。傳統(tǒng)的血清型鑒定耗時較長,不利于及時進行疾病暴發(fā)時追蹤傳染源以及分析比較菌株間的差異。目前已有很
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