本文關(guān)鍵詞：耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細菌耐藥機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細菌(Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae,CRE)耐藥機制,為臨床合理應用抗菌藥物提供理論指導,為耐藥菌株的控制提供科學依據(jù)。方法1.篩選吉林大學第一醫(yī)院檢驗科2012~2014年分離出的CRE菌株。2.使用紙片瓊脂擴散法、MIC法檢測CRE菌株對抗菌藥物的耐藥性,分析其耐藥譜。3.應用改良Hodge試驗及Carba NP試驗共同篩查CRE菌株產(chǎn)碳青霉烯酶的情況,比較兩種方法結(jié)果。4.利用聚合酶鏈反應(PCR)技術(shù)檢測CRE菌株的23種耐藥基因,分析每株CRE菌株所攜帶的耐藥基因種類。5.利用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測CRE菌株外膜蛋白m RNA含量,分析外膜蛋白的表達。6.查閱患者病例,分析CRE菌株產(chǎn)生的影響因素。結(jié)果1.12株CRE菌株包括:產(chǎn)酸克雷伯菌1株、肺炎克雷伯菌4株、大腸埃希菌1株、弗勞地枸櫞酸桿菌1株、摩根摩根菌1株、陰溝腸桿菌4株。除1株陰溝腸桿菌外,其他CRE菌株均來自患者無菌體液。2.12株CRE對哌拉西林、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率為100%;復方新諾明的耐藥率為83%;亞胺培南、美羅培南的耐藥率均為75%;左氧氟沙星、環(huán)丙沙星的耐藥率均為58%;哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星的耐藥率分別為33%、17%。3.改良Hodge實驗陽性8株:1株產(chǎn)酸克雷伯菌、3株肺炎克雷伯菌、4株陰溝腸桿菌。4.Carba NP試驗陽性菌株9株:1株產(chǎn)酸克雷伯菌、4株肺炎克雷伯菌、4株陰溝腸桿菌。5.細菌基因組耐藥基因PCR結(jié)果:對12株CRE菌株進行23種耐藥基因檢測,擴增出blaIMP-1、blaIMP-2、blaCTX-M-1、blaCTX-M-2、blaCTX-M-9、blaSHV、blaACC、blaDHA、blaqnr B、blaqnr S等10種耐藥基因。每株CRE菌株攜帶2~6種耐藥基因。6.實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,3株肺炎克雷伯菌的Omp K36基因相對表達量明顯下降,而2株陰溝腸桿菌Omp F、Omp C基因相對表達量同時下降,另外2株陰溝腸桿菌僅表現(xiàn)為Omp C基因相對表達下降。7.12株CRE菌株均分離自住院患者,分別為外科8株、ICU科1株、感染科1株、神經(jīng)內(nèi)科1株、小兒呼吸科1株。患者住院時間8~65天,除2例外其余患者均進行過開放性操作,除9號患者外,所有患者入院以來均進行過抗菌藥物治療。結(jié)論1.12株CRE菌株對各類抗菌藥物的耐藥率較高。2.Carba NP試驗具有準確度高、檢測速度快的優(yōu)點,應為臨床實驗室首選檢測碳青霉烯酶的手段。3.CRE菌株可同時攜帶碳青霉烯酶B類(blaIMP-1、blaIMP-2)、ESBLs(blaCTX-M-1、blaCTX-M-2、blaCTX-M-9、blaSHV)、Amp C酶(blaACC、blaDHA)、喹諾酮類(blaqnr S、blaqnr B)等耐藥基因。4.耐碳青霉烯類抗菌藥物的肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌存在外膜蛋白表達缺失的情況。
【關(guān)鍵詞】：腸桿菌科細菌 耐藥機制 碳青霉烯酶 外膜蛋白
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 英文縮略詞表9-13
• 第1章 緒論13-14
• 第2章 綜述14-20
• 2.1 CRE菌株產(chǎn)生碳青霉烯酶14-17
• 2.2 CRE菌株外膜蛋白表達缺失17-18
• 2.3 細菌外排泵高表達18
• 2.4 抗菌藥物作用靶位的改變18-20
• 第3章 材料與方法20-32
• 3.1 實驗菌株20
• 3.2 實驗儀器20-21
• 3.3 實驗耗材21
• 3.4 實驗試劑21-22
• 3.5 主要實驗試劑配制22
• 3.6 菌株鑒定與抗菌藥物體外敏感試驗22-23
• 3.7 碳青霉烯酶檢測23-27
• 3.8 ESBLs基因檢測27
• 3.9 AmpC酶基因檢測27-28
• 3.10 喹諾酮類抗菌藥物耐藥基因檢測28
• 3.11 外膜蛋白基因表達水平檢測28-31
• 3.12 病例回顧分析31-32
• 第4章 結(jié)果32-45
• 4.1 CRE菌株鑒定結(jié)果32
• 4.2 藥敏試驗結(jié)果32-36
• 4.3 碳青霉烯酶檢測結(jié)果36-37
• 4.4 耐藥基因PCR結(jié)果37-41
• 4.5 外膜蛋白實時熒光定量PCR結(jié)果41-43
• 4.6 病例回顧分析結(jié)果43-45
• 第5章 討論45-49
• 5.1 CRE菌株耐藥性分析45
• 5.2 碳青霉烯酶檢測結(jié)果分析45-46
• 5.3 各類耐藥基因檢測結(jié)果分析46-47
• 5.4 外膜蛋白表達結(jié)果分析47-48
• 5.5 CRE菌株產(chǎn)生影響因素48
• 5.6 展望與不足48-49
• 第6章 結(jié)論49-50
• 參考文獻50-55
• 在讀期間所獲科研成果55-57
• 致謝57

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