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神經(jīng)病理性疼痛大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶BIP與Nav1.8蛋白相互作用的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2024-05-18 21:20
  目的:鑒定慢性坐骨神經(jīng)損傷(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠中免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白(heavy-chain immunoglobulin binding protein,BIP)與Nav1.8蛋白的相互作用。為進(jìn)一步研究神經(jīng)病理性疼痛(neuropathic pain,NP)中BIP與Nav1.8蛋白相互作用的位點(diǎn),及BIP蛋白在神經(jīng)損傷后Nav1.8表達(dá)與再分布中的作用機(jī)制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:雄性SD(sprague dawley)大鼠220250g,24只,按隨機(jī)數(shù)字表分為兩組(n=12):模型組(CCI組)和假手術(shù)組(Sham組),每組12只,CCI組參照文獻(xiàn)建立CCI模型,Sham組只暴露坐骨神經(jīng),不給予坐骨神經(jīng)結(jié)扎。應(yīng)用von Frey纖維絲和鼠尾光照測(cè)痛儀分別檢測(cè)術(shù)前1 d和術(shù)后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d和14 d的機(jī)械縮足反應(yīng)閾值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和熱輻射誘發(fā)甩尾潛伏期(tail flick latency,TFL)。于術(shù)后7 d...

【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
個(gè)人簡(jiǎn)歷
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        1.3 主要試劑及耗材
        1.4 主要儀器
        1.5 實(shí)驗(yàn)器材
        1.6 實(shí)驗(yàn)溶液配制
    2 方法
        2.1 CCI模型的建立
        2.2 機(jī)械痛閾的檢測(cè)
        2.3 甩尾測(cè)試
        2.4 背根神經(jīng)節(jié)及坐骨神經(jīng)組織的獲取
        2.5 免疫熒光染色
        2.6 樣品蛋白提取
        2.7 蛋白濃度測(cè)定
        2.8 蛋白變性
        2.9 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.10 免疫共沉淀
        2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    3.1 疼痛行為學(xué)檢測(cè)
        3.1.1 CCI模型大鼠行為學(xué)觀察
        3.1.2 機(jī)械縮足反應(yīng)閾(PWMT)
        3.1.3 熱輻射誘發(fā)甩尾潛伏期(TFL)
    3.2 BIP與 Nav1.8 蛋白在CCI大鼠DRG上的表達(dá)
    3.3 BIP與 Nav1.8 蛋白在CCI大鼠坐骨神經(jīng)上的表達(dá)
    3.4 BIP與 Nav1.8 蛋白在CCI大鼠DRG上的表達(dá)分布及共定位
    3.5 BIP與 Nav1.8 蛋白在CCI大鼠坐骨神經(jīng)上的表達(dá)分布及共定位
    3.6 在CCI大鼠DRG組織中,BIP與 Nav1.8 蛋白存在相互作用
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄1
附錄2
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3977361

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