發(fā)布時(shí)間：2024-03-05 18:48

　　目的分離鑒定1例突發(fā)性耳聾患者血液和腦脊液分離的豬鏈球菌并進(jìn)行分子流行病學(xué)分析。方法采用VITEK-2Compact微生物系統(tǒng)進(jìn)行初步鑒定和藥敏試驗(yàn),PCR擴(kuò)增細(xì)菌的16SrRNA基因、7個(gè)管家基因及4種毒力基因。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行血清學(xué)分型,多位點(diǎn)序列分型(MLST)進(jìn)行序列分型(STs)。結(jié)果傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定方法和16SrRNA基因測(cè)定方法均鑒定為豬鏈球菌,實(shí)時(shí)熒光定量PCR鑒定為豬鏈球菌2型,MLST分型為ST7,毒力因子溶血素基因、細(xì)胞外蛋白因子編碼基因、莢膜多糖編碼基因均為陽(yáng)性。結(jié)論引起患者突發(fā)性耳聾的細(xì)菌為我國(guó)常見(jiàn)的豬鏈球菌2型,屬于ST7型強(qiáng)毒株。

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【部分圖文】：

圖1菌落生長(zhǎng)形態(tài)

報(bào)陽(yáng)血標(biāo)本接種后，經(jīng)培養(yǎng)箱35℃孵育24h，哥倫比亞血平板上長(zhǎng)出灰白透明色，針尖樣露珠大小，光滑濕潤(rùn)，邊緣整齊有α溶血環(huán)的菌落（圖1）。經(jīng)革蘭染色，鏡下觀察為成雙排列或短鏈狀的革蘭陽(yáng)性球菌，呈散在、成對(duì)或短鏈狀分布（圖2）。圖2菌株革蘭染色鏡檢

圖3疑似豬鏈球菌菌株16srRNA基因電泳圖

7個(gè)管家基因電泳均得到清晰條帶（圖4），約500bp，與目標(biāo)條帶一致。aroA、cpn60、dpr、gki、muts、recA、thrA等位基因數(shù)量分別為1、1、1、1、1、1、3，與MLST數(shù)據(jù)庫(kù)中的序列進(jìn)行比對(duì)分析，發(fā)現(xiàn)此次分離到的菌株為ST7型。圖4豬鏈球菌菌株P(guān)CR電泳....

圖4豬鏈球菌菌株P(guān)CR電泳圖

圖3疑似豬鏈球菌菌株16srRNA基因電泳圖2.5豬鏈球菌核酸和分型核酸檢測(cè)

圖5實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果為豬鏈球菌

實(shí)時(shí)熒光定量PCR鑒定此菌株為豬鏈球菌血清型2型（圖5、圖6）。圖6實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果為豬鏈球菌2型

本文編號(hào)：3919885