目的:本研究旨在觀察慢性睡眠剝奪對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR蛋白和基因表達(dá)情況及α7-nAChR與星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的共表達(dá)情況,進(jìn)而觀察下游p-AKT、p-GSK、Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)水平及炎性因子(TNF-α、IL-1β、IFN-γ、MCP-1)、抑炎因子(Arg-1、CD206、YM-1、TGF-β)基因表達(dá)水平,進(jìn)一步探討慢性睡眠剝奪后膠質(zhì)細(xì)胞α7-nAChR/PI3K/AKT通路的炎性作用機(jī)制,探討睡眠剝奪后海馬相關(guān)認(rèn)知功能變化的可能機(jī)制。方法:C57BL/6J小鼠,成年7-8周齡,隨機(jī)分為3組,每組12只。CC組(正常對(duì)照):適宜環(huán)境下飼養(yǎng)1周;SD組(慢性睡眠剝奪7d):適宜環(huán)境下飼養(yǎng)1周,利用改良多平臺(tái)水環(huán)境法進(jìn)行慢性睡眠剝奪7天;SD+PHA-543613組(慢性睡眠剝奪7d+PHA-543613):正常環(huán)境下飼養(yǎng)1周,利用改良多平臺(tái)水環(huán)境法進(jìn)行睡眠剝奪7天,睡眠剝奪結(jié)束后6小時(shí)腹腔注射α7-nAChR受體激動(dòng)劑PHA-543613(6mg/kg),連續(xù)腹腔注射3天后處死。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在處死之前保證12h光照(9:00-21:00),12h黑暗(21:0...

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)／符號(hào)說(shuō)明Ⅹ
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 材料方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.4 實(shí)驗(yàn)相關(guān)溶液的配制
    1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        1.5.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        1.5.2 慢性睡眠剝奪模型的建立
        1.5.3 腦組織取材
        1.5.4 蛋白免疫印跡分析(Western-Blot)
        1.5.5 免疫熒光染色
        1.5.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 慢性睡眠剝奪對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR的影響
        2.1.1 慢性睡眠剝奪對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR蛋白表達(dá)的影響
        2.1.2 慢性睡眠剝奪對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChRmRNA表達(dá)水平的影響
        2.1.3 慢性睡眠剝奪對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR陽(yáng)性細(xì)胞及與膠質(zhì)細(xì)胞共表達(dá)的影響
    2.2 慢性睡眠剝奪對(duì)小鼠海馬組織PIK3/AKT/GSK下游p-AKT、p-GSK蛋白表達(dá)的影響
    2.3 腹腔注射α7-nAChR激動(dòng)劑PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR及與膠質(zhì)細(xì)胞共表達(dá)情況的影響
        2.3.1 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR蛋白、mRNA表達(dá)的影響
        2.3.2 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織α7-nAChR與膠質(zhì)細(xì)胞共表達(dá)情況的影響
    2.4 腹腔注射α7-nAChR激動(dòng)劑PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織PIK3/AKT/GSK相關(guān)指標(biāo)的影響
        2.4.1 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織p-AKT、p-GSK的蛋白表達(dá)水平的影響
        2.4.2 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織抗氧化酶Nrf-2、HO-1的蛋白表達(dá)水平的影響
        2.4.3 慢性睡眠剝奪后腹腔注射α7-nAChR激動(dòng)劑PHA-543613對(duì)小鼠海馬組織炎性因子及抑炎因子mRNA表達(dá)水平的影響
3 討論
    3.1 慢性睡眠剝奪與α7-nAChR
        3.1.1 慢性睡眠剝奪
        3.1.2 慢性睡眠剝奪使小鼠海馬區(qū)α7-nAChR的蛋白及基因表達(dá)下降.
        3.1.3 慢性睡眠剝奪激活小鼠海馬區(qū)膠質(zhì)細(xì)胞并抑制膠質(zhì)細(xì)胞與α 7-nAChR的共表達(dá)
    3.2 慢性睡眠剝奪與膠質(zhì)細(xì)胞α7-nAChR及PI3K/AKT/GSK-3β信號(hào)通路
        3.2.1 PI3K/AKT/GSK-3β信號(hào)通路
        3.2.2 慢性睡眠剝奪抑制海馬區(qū)膠質(zhì)細(xì)胞α7-nAChR/PI3K/AKT/GSK-3β通路
    3.3 慢性睡眠剝奪中膠質(zhì)細(xì)胞α7-nAChR/PI3K/AKT信號(hào)傳導(dǎo)通路參與介導(dǎo)抗炎、抗氧化反應(yīng)
        3.3.1 慢性睡眠剝奪中膠質(zhì)細(xì)胞α7-nAChR/PI3K/AKT調(diào)控抗氧化酶Nrf2和HO-1的表達(dá)
        3.3.2 慢性睡眠剝奪中膠質(zhì)細(xì)胞α7-nAChR/PI3K/AKT調(diào)節(jié)膠質(zhì)細(xì)胞炎性因子和抑炎因子的表達(dá)和釋放
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 α7-nAChR對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的影響機(jī)制的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3904898