目的:本研究旨在觀察慢性睡眠剝奪對小鼠海馬組織α7-nAChR蛋白和基因表達情況及α7-nAChR與星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的共表達情況,進而觀察下游p-AKT、p-GSK、Nrf2、HO-1蛋白表達水平及炎性因子(TNF-α、IL-1β、IFN-γ、MCP-1)、抑炎因子(Arg-1、CD206、YM-1、TGF-β)基因表達水平,進一步探討慢性睡眠剝奪后膠質(zhì)細胞α7-nAChR/PI3K/AKT通路的炎性作用機制,探討睡眠剝奪后海馬相關(guān)認知功能變化的可能機制。方法:C57BL/6J小鼠,成年7-8周齡,隨機分為3組,每組12只。CC組(正常對照):適宜環(huán)境下飼養(yǎng)1周;SD組(慢性睡眠剝奪7d):適宜環(huán)境下飼養(yǎng)1周,利用改良多平臺水環(huán)境法進行慢性睡眠剝奪7天;SD+PHA-543613組(慢性睡眠剝奪7d+PHA-543613):正常環(huán)境下飼養(yǎng)1周,利用改良多平臺水環(huán)境法進行睡眠剝奪7天,睡眠剝奪結(jié)束后6小時腹腔注射α7-nAChR受體激動劑PHA-543613(6mg/kg),連續(xù)腹腔注射3天后處死。所有實驗動物在處死之前保證12h光照(9:00-21:00),12h黑暗(21:0...

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
縮略語／符號說明Ⅹ
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 材料方法
    1.1 實驗動物
    1.2 實驗儀器
    1.3 實驗試劑
    1.4 實驗相關(guān)溶液的配制
    1.5 實驗方法
        1.5.1 實驗動物分組
        1.5.2 慢性睡眠剝奪模型的建立
        1.5.3 腦組織取材
        1.5.4 蛋白免疫印跡分析(Western-Blot)
        1.5.5 免疫熒光染色
        1.5.6 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)
    1.6 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 慢性睡眠剝奪對小鼠海馬組織α7-nAChR的影響
        2.1.1 慢性睡眠剝奪對小鼠海馬組織α7-nAChR蛋白表達的影響
        2.1.2 慢性睡眠剝奪對小鼠海馬組織α7-nAChRmRNA表達水平的影響
        2.1.3 慢性睡眠剝奪對小鼠海馬組織α7-nAChR陽性細胞及與膠質(zhì)細胞共表達的影響
    2.2 慢性睡眠剝奪對小鼠海馬組織PIK3/AKT/GSK下游p-AKT、p-GSK蛋白表達的影響
    2.3 腹腔注射α7-nAChR激動劑PHA-543613對小鼠海馬組織α7-nAChR及與膠質(zhì)細胞共表達情況的影響
        2.3.1 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對小鼠海馬組織α7-nAChR蛋白、mRNA表達的影響
        2.3.2 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對小鼠海馬組織α7-nAChR與膠質(zhì)細胞共表達情況的影響
    2.4 腹腔注射α7-nAChR激動劑PHA-543613對小鼠海馬組織PIK3/AKT/GSK相關(guān)指標的影響
        2.4.1 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對小鼠海馬組織p-AKT、p-GSK的蛋白表達水平的影響
        2.4.2 慢性睡眠剝奪后腹腔注射PHA-543613對小鼠海馬組織抗氧化酶Nrf-2、HO-1的蛋白表達水平的影響
        2.4.3 慢性睡眠剝奪后腹腔注射α7-nAChR激動劑PHA-543613對小鼠海馬組織炎性因子及抑炎因子mRNA表達水平的影響
3 討論
    3.1 慢性睡眠剝奪與α7-nAChR
        3.1.1 慢性睡眠剝奪
        3.1.2 慢性睡眠剝奪使小鼠海馬區(qū)α7-nAChR的蛋白及基因表達下降.
        3.1.3 慢性睡眠剝奪激活小鼠海馬區(qū)膠質(zhì)細胞并抑制膠質(zhì)細胞與α 7-nAChR的共表達
    3.2 慢性睡眠剝奪與膠質(zhì)細胞α7-nAChR及PI3K/AKT/GSK-3β信號通路
        3.2.1 PI3K/AKT/GSK-3β信號通路
        3.2.2 慢性睡眠剝奪抑制海馬區(qū)膠質(zhì)細胞α7-nAChR/PI3K/AKT/GSK-3β通路
    3.3 慢性睡眠剝奪中膠質(zhì)細胞α7-nAChR/PI3K/AKT信號傳導通路參與介導抗炎、抗氧化反應(yīng)
        3.3.1 慢性睡眠剝奪中膠質(zhì)細胞α7-nAChR/PI3K/AKT調(diào)控抗氧化酶Nrf2和HO-1的表達
        3.3.2 慢性睡眠剝奪中膠質(zhì)細胞α7-nAChR/PI3K/AKT調(diào)節(jié)膠質(zhì)細胞炎性因子和抑炎因子的表達和釋放
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 α7-nAChR對中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的影響機制的研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3904898