毒品濫用自古以來都是一個備受矚目的問題,不僅僅對人類的生命健康造成了不可挽回的損傷,同時也嚴重威脅著社會安全和經(jīng)濟的持續(xù)發(fā)展。甲基苯丙胺,也就是冰毒,是一種具有較強成癮性的合成類毒品。長期、持續(xù)的使用甲基苯丙胺會產(chǎn)生嚴重的藥物依賴現(xiàn)象,其中主要包括軀體依賴(physical dependence)以及精神依賴(psychological dependence)兩個方面。不僅如此,甲基苯丙胺的戒斷也被認為是難以解決的。多次、甚至是單次使用甲基苯丙胺后,它可以通過競爭性的抑制多巴胺轉(zhuǎn)運體(dopaminetransporter,DAT)的功能來抑制多巴胺的攝取從而增加突觸間隙多巴胺(dopamine,DA)濃度,然后可以激活大腦中的獎賞系統(tǒng),最終導致成癮。雖然對毒品濫用的研究已經(jīng)持續(xù)了數(shù)百年,但是對其具體的分子機制的認識仍然十分粗淺。Clk1,也叫做Coq7,是線粒體中一種參與泛醌合成的必要的羥化酶。以此同時,Clk1在線粒體呼吸鏈電子傳遞以及氧化應(yīng)激中發(fā)揮著重要的作用。本文主要探討了 Clk1在甲基苯丙胺誘導的條件性位置偏愛中的作用,同時對其機制進行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與野生型小鼠相比,小...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 Clk1缺失抑制甲基苯丙胺誘導的條件性位置偏愛
    1. 材料與方法
        1.1 實驗動物
        1.2 主要實驗試劑
        1.3 主要設(shè)備
        1.4 條件性位置偏愛(Conditioned place preference)
        1.5 曠場實驗(Open-field test)
        1.6 細胞培養(yǎng)
        1.7 蛋白免疫印記(Western blotting)
        1.8 免疫組織化學
        1.9 siRNA轉(zhuǎn)染
        1.10 DAT泛素化
        1.11 貼壁細胞膜蛋白提取(Thermo kit)
        1.12 組織膜蛋白提取
        1.13 細胞病毒感染實驗
    2. 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 Clk1缺失抑制甲基苯丙胺誘導的條件性位置偏愛
        3.2 Clk1缺失抑制伏隔核(NAc)△FosB的表達
        3.3 Clk1缺失抑制cAMP-CREB通路的激活
    4. 討論
第二部分 Clk1缺失通過增加鐵離子外排抑制多巴胺轉(zhuǎn)運體降解
    1. 材料與方法
        1.1 實驗動物
        1.2 主要實驗試劑
        1.3 主要設(shè)備
        1.4 細胞培養(yǎng)與細胞系的構(gòu)建
        1.5 動物組織ICP-MS樣品制備
        1.6 蛋白免疫印記(Western blotting)
        1.7 總RNA的提取及實時熒光定量PCR(Q-PCR)
        1.8 細胞免疫熒光染色
    2. 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 Clk1^+/-突變型小鼠紋狀體、海馬及前額葉皮層的Clk1表白均有顯著降低
        3.2 Clk1^+/--缺失增加DAT表達
        3.3 Clk1缺失抑制DAT降解而非促進合成
        3.4 Clk1缺失下調(diào)鐵離子濃度
        3.5 DFO時間依賴性的上調(diào)DAT及HIF-1α
        3.6 Clk1缺失誘導的鐵離子濃度降低在DAT表達升高中發(fā)揮重要作用
        3.7 Clk1^+/-突變型小鼠紋狀體及海馬鐵離子濃度下調(diào)
    4. 討論
參考文獻
第三部分 綜述
    毒品濫用的社會學思考——毒品對人類及社會的嚴重危害
        參考文獻
    參與甲基苯丙胺成癮以及神經(jīng)毒性的研宄進展
        參考文獻
攻讀學位期間出版或公開發(fā)表的論著、論文
中英文縮略詞對照表
致謝



本文編號：3893795