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熒光共振能量轉(zhuǎn)移核酸探針的構(gòu)建及其在疾病標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2023-08-06 14:50
  隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)在生化分析和臨床診斷中有著越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。基于能量轉(zhuǎn)移技術(shù)的核酸探針以核苷酸序列作為基本骨架,以堿基互補(bǔ)配對(duì)或其他相互作用方式作為識(shí)別機(jī)制,根據(jù)供體和受體間能量轉(zhuǎn)移成功實(shí)現(xiàn)與否產(chǎn)生光信號(hào)或者電信號(hào)變化,將探針和靶物之間的作用體現(xiàn)出來(lái)。目前基于能量轉(zhuǎn)移的核酸探針已經(jīng)成功應(yīng)用于檢測(cè)生物小分子、蛋白質(zhì)、核酸以及多種疾病標(biāo)志物。然而,傳統(tǒng)的能量轉(zhuǎn)移熒光探針多采用單供體-單受體能量轉(zhuǎn)移對(duì)。在僅有單個(gè)供體存在能量轉(zhuǎn)移體系中,受能量轉(zhuǎn)移效率的限制,供體熒光不能被完全猝滅,整個(gè)探針體系存在較高的背景信號(hào)和較低的信噪比,從而影響檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。為了解決這個(gè)問(wèn)題,本論文通過(guò)構(gòu)建單供體-多受體能量轉(zhuǎn)移體系,結(jié)合核酸三螺旋結(jié)構(gòu),雙核酸催化組裝(catalyzed hairpin assembly,CHA)信號(hào)放大技術(shù)等構(gòu)建了一系列通用型的低背景信號(hào)能量轉(zhuǎn)移探針,實(shí)現(xiàn)了DNA,microRNA的靈敏檢測(cè),并將其進(jìn)一步拓展應(yīng)用到癌癥的早期診斷中。本論文主要展開(kāi)了以下兩個(gè)工作:(1)設(shè)計(jì)了一種基于能量轉(zhuǎn)移的單供體-四受體三螺旋核酸探針,并成功實(shí)現(xiàn)了丙型肝炎病毒DNA的...

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮寫(xiě)符號(hào)對(duì)照表
第1章 論文選題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
    1.1 研究意義
    1.2 研究現(xiàn)狀
        1.2.1 熒光共振能量轉(zhuǎn)移核酸探針用于機(jī)理研究
        1.2.2 熒光共振能量轉(zhuǎn)移核酸探針的分析應(yīng)用
        1.2.3 基于能量轉(zhuǎn)移的信號(hào)放大技術(shù)
        1.2.4 三螺旋能量轉(zhuǎn)移探針的研究現(xiàn)狀
    1.3 存在的主要問(wèn)題
    1.4 本研究目標(biāo)
    1.5 研究?jī)?nèi)容
    1.6 研究的可行性分析
第2章 單供體-四受體能量轉(zhuǎn)移核酸探針用于丙型肝炎的靈敏檢測(cè)
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        2.3.2 丙型肝炎病毒DNA檢測(cè)的可行性
        2.3.3 單供體-四受體核酸探針背景信號(hào)考察
        2.3.4 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化
        2.3.5 線性
        2.3.6 選擇性和抗干擾能力
        2.3.7 丙型肝炎病毒DNA的實(shí)際樣檢測(cè)
    2.4 本章小結(jié)
第3章 無(wú)酶信號(hào)放大的單供體-多受體能量轉(zhuǎn)移核酸探針用于microRNA-21的靈敏檢測(cè)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.3.2 microRNA檢測(cè)的可行性
        3.3.3 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化
        3.3.4 線性考察
        3.3.5 選擇性
        3.3.6 實(shí)際樣檢測(cè)
    3.4 本章小結(jié)
第4章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 本文創(chuàng)新性
    4.3 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間科研成果
致謝



本文編號(hào):3839589

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