背景:遺傳性痙攣性截癱(Hereditary spastic paraplegia,SPG或HSP)是以遠(yuǎn)端雙下肢進(jìn)行性虛弱無力及肌張力增高為主要癥狀的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。依據(jù)臨床特征HSP分為單純性和復(fù)雜性。HSP具有高度的臨床及遺傳異質(zhì)性,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有超過80個基因與HSP的發(fā)病有關(guān),其中由SPAST基因變異導(dǎo)致的SPG4型和由ATL1基因變異導(dǎo)致的SPG3A是最常見的常染色體顯性HSP亞型,分別約占AD-HSP患者的45%和10%。然而仍有部分HSP患者的遺傳機(jī)制不明,因此基于HSP家系尋找新的致病基因,完善HSP的突變譜具有重要的臨床意義和科學(xué)價(jià)值。目的:本論文研究基于一個甘肅地區(qū)單純性HSP家系,通過鑒定其致病性突變,為此家系以后的生育及產(chǎn)前篩查做出科學(xué)的指導(dǎo),為HSP的致病基因譜提供更豐富的依據(jù)。方法:(1)收集到1例常染色體顯性單純性HSP家系,采集其臨床信息及家族人員外周血;(2)檢索已報(bào)道與HSP相關(guān)的SPAST和ATL1基因變異的SCI(Science Citation Index)文獻(xiàn),匯總變異的相關(guān)信息,包括樣本來源,患者性別、年齡,遺傳方式,突變類型及突變位置,并...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第一章 前言
    1 常染色體顯性HSP(AD-HSP)亞型
    2 X連鎖性HSP(XL-HSP)
    3 HSP的病理機(jī)制
第二章 研究對象和方法
    1 主要試劑及儀器(表2和表3)
    2 研究對象
    3 文獻(xiàn)匯總分析
    4 樣本及臨床資料采集
        4.1 樣本采集
        4.2 臨床資料采集
    5 樣本基因組DNA的提取及鑒定
        5.1 苯酚氯仿法提取基因組DNA
        5.2 用Nanodrop測定DNA濃度及純度,操作步驟
        5.3 用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA,操作步驟
    6 PCR擴(kuò)增反應(yīng)及PCR產(chǎn)物測序鑒定
        6.1 反應(yīng)過程
        6.3 PCR產(chǎn)物測序及鑒定
    7 基因組DNA全外顯子測序及測序結(jié)果驗(yàn)證
        7.1 基因組DNA全外顯子測序
        7.2 全外顯子測序結(jié)果驗(yàn)證
        7.3 全外顯子測序所得的可疑突變基因軟件預(yù)測分析
        7.4 全外顯子測序所得的突變基因在正常人群中驗(yàn)證
    8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    1 已發(fā)表文獻(xiàn)匯總分析
        1.1 文獻(xiàn)檢索
        1.2 文獻(xiàn)匯總分析
    2 HSP相關(guān)的6 個高頻突變基因外顯子PCR擴(kuò)增及Sanger測序鑒定
        2.1 家系成員DNA提取
        2.2 PCR擴(kuò)增及Sanger測序
    3 HSP家系外顯子組測序及結(jié)果驗(yàn)證
第四章 討論
    1
        1.1 ESCRT對內(nèi)體蛋白的分揀作用
        1.2 ESCRT在脂質(zhì)膜上的作用
        1.3 ESCRT在核膜上的作用
    2 ESCRT復(fù)合體的異常是HSP的致病原因
結(jié)論
局限性與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附表一
附表二



本文編號：3813949