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基于ε-聚賴氨酸配基的內(nèi)毒素吸附劑的制備和應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2023-03-29 03:04
  膿毒血癥可以由任何部位的感染引起,臨床上常見于肺炎、腹膜、泌尿系統(tǒng)感染、腦膜炎、膿腫等。其病原微生物包括細(xì)菌、真菌、病毒及寄生蟲,膿毒血癥也常常發(fā)生在有嚴(yán)重疾病的患者中,如嚴(yán)重?zé)齻、外科手術(shù)后等患者。目前普遍認(rèn)為膿毒血癥是由于內(nèi)毒素進(jìn)入血液引發(fā)的一種全身炎癥反應(yīng)綜合征。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞外壁的組成成分,污染的手術(shù)器械、沖洗系統(tǒng)、生物制品如疫苗、抗體等表達(dá)生產(chǎn)過程中,都會(huì)有大量的內(nèi)毒素產(chǎn)生和殘留,因此內(nèi)毒素幾乎無處不在。此外在膿毒血癥治療過程中抗生素的使用,會(huì)再一次帶來大量內(nèi)毒素釋放加重病人的病情,因此對于內(nèi)毒素的去除是非常重要的,F(xiàn)有去除內(nèi)毒素的方法大多存在去除能力有限、非特異性強(qiáng),過多的非特異性吸附使其無法用于生物制品和臨床血液中內(nèi)毒素的去除。因此,臨床上急需一種對內(nèi)毒素吸附能力較強(qiáng)并且血液相容性好的內(nèi)毒素結(jié)合材料。而ε-聚賴氨酸是由白色鏈霉菌產(chǎn)生的,并且具有光譜的抗菌性并且已經(jīng)被批準(zhǔn)作為一種安全的食品防腐劑,從安全角度講它也是對人體無毒無害的。此外ε-聚賴氨酸具有25-30個(gè)賴氨酸,其可以通過陽離子的靜電作用和疏水作用,同時(shí)對內(nèi)毒素具有較好的吸附性。本論文通過以瓊脂糖凝膠4F...

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
縮略詞列表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 內(nèi)毒素與膿毒血癥
        1.1.1 內(nèi)毒素的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 人體內(nèi)毒素的來源
        1.1.3 內(nèi)毒素的結(jié)構(gòu)及物理化學(xué)特性
        1.1.4 內(nèi)毒素的生物活性
        1.1.5 內(nèi)毒素與膿毒血癥
    1.2 內(nèi)毒素的檢測
        1.2.1 家兔熱原法
        1.2.2 鱟試劑法
    1.3 內(nèi)毒素的去除
        1.3.1 活性炭
        1.3.2 萃取
        1.3.3 陰離子交換色譜
        1.3.4 組胺和組氨酸固定化的瓊脂糖吸附劑
        1.3.5 多粘菌素B(Polymyxin B,PMB)固定化的瓊脂糖吸附劑
        1.3.6 具有聚陽離子配基的色譜
        1.3.7 陽離子官能團(tuán)的聚合物
        1.3.8 ε-聚賴氨酸
        1.3.9 抗內(nèi)毒素抗體
    1.4 膿毒血癥的血液凈化治療及現(xiàn)有研究現(xiàn)狀
        1.4.1 血液凈化概述
        1.4.2 血液灌流研究進(jìn)展
    1.5 研究的主要內(nèi)容
2 瓊脂糖-ε-聚賴氨酸吸附劑的制備及內(nèi)毒素檢測方法的建立
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 瓊脂糖-聚賴氨酸內(nèi)毒素吸附劑的制備
        2.3.2 瓊脂糖-聚賴氨酸吸附劑-R的制備
        2.3.3 瓊脂糖-多粘菌素B(PMB)吸附劑的制備
        2.3.4 合成吸附劑的配基密度測定
        2.3.5 內(nèi)毒素檢測方法的建立
        2.3.6 內(nèi)毒素的靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.7 內(nèi)毒素吸附率和飽和吸附容量
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 合成吸附劑的密度計(jì)算
        2.4.2 不同抗凝劑中內(nèi)毒素檢測回收率
        2.4.3 內(nèi)毒素溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.4.4 不同種類吸附劑對內(nèi)毒素吸附情況
        2.4.5 瓊脂糖-ε-聚賴氨酸(ε-PLL)和瓊脂糖-多粘菌素B(PMB)對內(nèi)毒素血漿溶液的吸附對比
    2.5 小結(jié)
3 瓊脂糖-ε-聚賴氨酸內(nèi)毒素吸附劑的優(yōu)化及性能評價(jià)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 主要儀器及耗材
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 瓊脂糖-ε-聚賴氨酸合成優(yōu)化
        3.3.2 吸附劑性能測試
        3.3.3 不同膠血比對吸附劑吸附性能影響
        3.3.4 吸附劑對FITC-LPS水溶液的吸附實(shí)驗(yàn)
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.4.1 瓊脂糖-ε-聚賴氨酸合成優(yōu)化
        3.4.2 計(jì)算內(nèi)毒素吸附率和飽和吸附量
        3.4.3 不同膠血比對吸附效果的影響
        3.4.4 吸附劑對FITC-LPS水溶液的吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.5 小結(jié)
4 內(nèi)毒素吸附劑血液相容性實(shí)驗(yàn)
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 主要儀器及耗材
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 細(xì)胞溶血實(shí)驗(yàn)
        4.3.2 人血漿總蛋白、白蛋白的測定
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.4.1 溶血實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.2 不同氨基密度對血漿中內(nèi)毒素的吸附率及總蛋白和白蛋白的非特異性吸附
    4.5 小結(jié)
結(jié)論
展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝



本文編號:3773861

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